分离42和55之间的蛋白用多少浓度的胶比较好

一般凝胶浓度低是容易出现条带模糊的情况。个人手法是:用好点的材料制备凝胶来进行分析。10%的浓度可以用来分离这两种蛋白,将电泳电压在后半程调高可改善条带清晰度。也可以调高分离胶浓度至12%,但差别会较10%的更小。是在不行可以考虑用梯度胶分。“用好点的材料”是说的丙烯酰胺和甲叉。“将电泳电压在后半程调高改善条带扩散”,分离胶用135V,缩短电泳时间。两种浓度的差别也不是太大。为了扩大差别,可以通过预染marker来控制电泳时间,将小分子的蛋白跑出去,用更多的凝胶长度来加大两者的差别。不过电泳时间延长对条带清晰程度会有影响。样品的pH也会对条带的清晰程度有影响,以前做分子量和差不多大的酵母样时,条带就有些模糊。其实有时只要能将两者区分开,不一定非要追求最佳分离效果。......阅读全文

蛋白质纯化

是当代生物产业当中的核心技术。该技术难度、成本均高;例如一个生物药品的成本75%都花在下游蛋白质分离纯化当中。常用技术有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动。根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等。3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分

G蛋白的种类

G蛋白的种类已多达40余种,大多数存在于细胞膜上,由α、β、γ三个不同亚单位构成,总分子量为100kDa左右。其中β亚单位在多数G蛋白中都非常类似,分子量36kDa左右。γ亚单位分子量在8-11kDa之间。Gα蛋白分为Gs、Gi、Go、Gq、G12、G13等六类。这些不同类型的G蛋白在信号传递过程各

外在蛋白的定义

  膜外在蛋白又称膜周边蛋白,是与整合蛋白相对的,是指:不直接与脂双层疏水部分相互连接,它们常常通过离子键、H键与脂质分子或膜表面的蛋白质分子相结合。

膜蛋白的分类

膜蛋白是膜功能的主要体现眷。根据与膜脂的结合方式以及在膜中的位置的不同,膜蛋白分为:整合蛋白(integralprotein)、外周蛋白(peripheralprotein)脂锚定蛋白(1ipid—anchoredprotein)。整合蛋白(IntegraIProteins):部分或全部镶嵌在细胞膜

脂蛋白的介绍

  脂蛋白(lipoprotein)是一类由富含固醇脂、甘油三酯的疏水性内核和由蛋白质、磷脂、胆固醇等组成的外壳构成的球状微粒。脂蛋白对于昆虫和哺乳动物细胞外脂质的包装、储存、运输和代谢起着重要作用,脂蛋白代谢异常(通常伴随着脂质组分和蛋白质组分的改变)与动脉硬化症、糖尿病、肥胖症以及肿瘤发生密切相

蛋白质亚基

在结构生物学,一个蛋白质亚基是一个单一的蛋白质分子,其组装(或“ coassembles ”)与其他蛋白质分子以形成蛋白复合物。一些天然存在的蛋白质具有相对较少的亚基,因此被描述为寡聚体,例如血红蛋白或DNA聚合酶。其他的可能由非常多的亚基组成,因此被描述为多聚体,例蛋白质亚基如微管和其他细胞骨架蛋

蛋白质测序

一、概念当前,所谓蛋白质测序,主要指的是蛋白质的一级结构的测定。蛋白质的一级结构(Primary structure)包括组成蛋白质的多肽链数目。很多场合多肽和蛋白质可以等同使用。多肽链的氨基酸顺序,它是蛋白质生物功能的基础。  蛋白质氨基酸顺序的测定是蛋白质化学研究的基础。自从1953年F.San

脑脊液蛋白是什么

  脑脊液蛋白是脑脊液生化检查的一项,是指脑脊液中的蛋白含量,脑脊液蛋白的正常范围内是0.15-0.45g/L,这个是脑脊液蛋白的正常范围。  一般来说,有些疾病可能会造成脑脊液蛋白的上升,比如格林-巴利综合征,一般来说得了格林-巴利综合征以后,患者有可能在发病后两周以后出现脑脊液蛋白的上升,但是细

脑脊液蛋白电泳原理

原理: 与血清蛋白电泳相同,利用各种蛋白质在电场作用下迁移率不同来进行检测。由于CSF蛋白质含量较低,电泳前须进行浓缩处理。一般采用透析法浓缩,将CSF加入透析袋内,置于吸水的透析液中,CSF中的水分移至透析液内,CSF的蛋白质浓度增加后,再进行电泳分析。 脑脊液蛋白电泳试剂与器材: (1)器

酪蛋白的制备

实验方法原理 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调到4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。实验材料 牛乳试剂、试剂盒 乙醇 无水乙醚 醋酸 醋酸钠 乙醇

GST蛋白纯化步骤

制备细胞裂解物:1.每100ml培养物的细胞沉淀悬于4mlPBS;2.加入溶菌酶至终浓度1mg/ml,冰上放置30min;3.用针筒将10ml 0.2%Triton X-100强行注入细胞裂解物中,剧烈震动数次混匀;4.加入DNase和RNase至终浓度5μg/ml,4℃震动温育10min;5.4℃

卵清蛋白概述

  蛋清中的主要蛋白质包括卵清蛋白、卵转铁球蛋白、类卵沾蛋白、卵沾蛋白、溶菌酶、球蛋白G2、球蛋白G3等。卵清蛋白等电点4.5,其本质是含磷糖蛋白。卵清蛋白是蛋清中的主要蛋白组分,其结构与性质会显著影响蛋清蛋白在食品加工过程中的功能性质。因此研究卵清蛋白在热处理或美拉德反应后的变化对了解蛋清蛋白在食

血影蛋白的简介

  血影蛋白(spectrin)又称红膜肽,存在于哺乳类动物红细胞膜的内侧,是红细胞膜蛋白的主要成份。改变处理血影的离子强度后进行电泳分析,则血影蛋白和肌动蛋白条带消失,说明这两种蛋白不是内在膜蛋白。约占膜提取蛋白的30%。

蛋白层析系统

  蛋白层析系统是一种用于生物学、农学领域的仪器,于2013年12月26日启用。  技术指标  1 系统泵 1.1 全自动微量柱塞泵,双泵四泵头,每个泵头都有独立除气阀。 1.2 流速:0.001~25ml/min,增量1ul/min 1.3 压力范围:0~20 MPa (200bar,2900ps

蛋白聚集的机理

蛋白质聚集通常是通过一系列过程实现,首先是蛋白内部结构的变化导致形成二聚体或寡聚体,随后聚集体生长,最终形成亚可见或可见的颗粒。1. 初始聚集/成核蛋白质存在一定固有的构象波动或局部结构扰动,这些结构的变动可能会导致蛋白质中具有聚集倾向的序列或“热点(hot spot)”被暴露,进而使其与另外的蛋白

转染过程中载体蛋白对于目的蛋白是否有影响

转染后Western检测不到高表达量的目的蛋白有很多原因首先就是抗体是否合适需检测的目的蛋白,可以考虑更换其他抗体然后转染可以是瞬时转染,也可以是稳定细胞株转染假如是瞬时转染检测不到,可能就是抗体或者Western操作的问题假如是稳定细胞株转染检测不到,可能是目的基因没有稳定整合到基因组中,或者插入

非还原型蛋白和还原型蛋白反相hplc的不同

反向色谱是流动相极性大于固定相极性,所以流动相极性增大,它的洗脱能力就减小,因为留在固定相上的物质是极性小的物质,所以用极性溶剂来洗保留时间就会增大。

新蛋白质组学方法引领蛋白功能研究革命

人类细胞是通过成千上万个蛋白质的协同作用来控制它们生长和分化的。但是,到目前为止,大多数人类蛋白质的特定功能还不清楚。 疾病的发生常常是由于冠军细胞蛋白质功能的失常。目前,世界各地已经启动了大量大规模的研究计划以了解所有人类蛋白质的功能。 现在,来自IRCM(Instiut de recherc

Cell:靶向TMED9蛋白有望治疗多种毒性蛋白病

  科学家们早就知道,数十种遗传性疾病(也称为毒性蛋白病),是由细胞中特定错误折叠蛋白的堆积引起的。但是,负责这种堆积的分子机制仍然是个谜,这就阻止了开发相应疗法的努力。  如今,在一项新的研究中,来自美国布罗德研究所、哈佛医学院和布莱根妇女医院的研究人员发现一些毒性蛋白病(toxic protei

非还原型蛋白和还原型蛋白反相hplc的不同

反向色谱是流动相极性大于固定相极性,所以流动相极性增大,它的洗脱能力就减小,因为留在固定相上的物质是极性小的物质,所以用极性溶剂来洗保留时间就会增大。

中性蛋白酶在大豆分离蛋白中的应用

大豆分离蛋白的应用:能水解大豆分离蛋白成小分子肽,大大提高了大豆分离蛋白的生物效价,使其易为人体消化吸收,同时还提高了溶解,降低了粘度,改善了大豆分离蛋白的功能特性。

蛋白质测定仪测奶制品蛋白质

  随着人们生活水平的提高,鲜奶已成为人们普遍食用的营养佳品。鲜奶中蛋白质、脂肪、糖类含量丰富,且易被人体消化吸收;鲜奶中钙、铁等矿物质含量也很丰富,是人们补钙的天然优良食品。在日本就有一杯奶改善一个民族之说。蛋白质是鲜奶的重要组成成分,也是评价鲜奶质量的重要营养学指标之一。    目前,市售部分大

尿蛋白加号和尿蛋白定量不相符怎么回事?

临床上经常有患者问,自己的尿常规蛋白++,24小时定量0.4克;而有的人尿常规蛋白阴性,定量确是0.8克。这是不是化验不准确呢?到底应该相信哪个?下面就简单介绍一下两者不相符的几种常见原因:一、一天中不同的时间段,尿蛋白排泄量是不恒定的。晨起相对较低,而我们留取尿常规往往都是留晨尿,所以可能尿蛋白量

染色质蛋白非组蛋白α螺旋转角α螺旋模式介绍

  这是最早在原核基因的激活蛋白和阻抑物中发现的。迄今已经在百种以上原核细胞和真核生物中发现这种最简单、最普遍的DNA结合蛋白的结构模式。这种蛋白与DNA结合时,形成对称的同型二聚体(symmetric homodimer)结构模式。构成同型二聚体的每个单体由20个氨基酸的小肽组成α螺旋-转角-α螺

基因重组蛋白相比于普通蛋白有什么优点

选择合适的 蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素,包括:目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外,许多蛋白质表达项目也存在着风险,尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择,不同的系统有不同的特性和应用。在这里,

球状蛋白质和纤维状蛋白质区别

  以长轴和短轴之比为标准,球状蛋白质小于10,纤维状蛋白质大于10 [2] 。纤维状蛋白多为结构蛋白,是组织结构不可缺少的蛋白质,由长的氨基酸肽链连接成为纤维状或蜷曲成盘状结构,成为各种组织的支柱,如皮肤、肌腱、软骨及骨组织中的胶原蛋白;球状蛋白的形状近似于球形或椭圆形。许多具有生理活性的蛋白质,

尿蛋白VS尿微量蛋白,傻傻分不清楚?

首先我们先分清什么是尿蛋白,以及产生尿蛋白的几个原因:24小时尿蛋白定量是指收集24小时内的排出的所有的尿液来做定性试验的一种尿液检测方法。清晨第一次的小便排干净后,从第二次小便开始留。记录第一次小便的时间,直至第二天的这个时间,为24个小时内的,每一次所有的小便,都放在一个容器里,混合均匀,然后从

Cell:构建出RGS蛋白调节G蛋白信号的全面图谱

  在一项新的研究中,来自美国斯克里普斯研究所的研究人员全面绘制了细胞内的一类关键蛋白如何调节从细胞表面受体传入的信号。此外,他们揭示了人们通常在这类蛋白中存在的变异导致他们的细胞在相同的细胞受体受到刺激时做出不同的反应,这为为什么不同人对相同的药物作出的反应存在有很大的不同提供了一个合理的解释。相

完全蛋白质和半完全蛋白质等简介

  完全蛋白质  所含必需氨基酸种类齐全,数量充足,相互之问比例也适当,不但能够维持成人的健康,也能够促进人体的生长发育,如乳中的酪蛋白、蛋类中的卵白蛋白、大豆球蛋白、小麦中的麦符蛋白等。   半完全蛋白质  所含各种必需氨基酸种类齐全,但各种氨基酸含量多少不匀,互相之间比例不合适。在膳食中作为唯一

果蝇蛋白与功能蛋白编织成天然纤维

  据美国物理学家组织网4月21日(北京时间)报道,美国莱斯大学和德克萨斯农工大学研究人员通过基因嵌入融合技术,将不同蛋白质与一种来自果蝇的转录因子结合,再拉成纤细结实的线,就能织成任何想要的纹理构造。这种材料拥有多种潜在功能,可作为化学催化剂和生物传感器,在未来的组织工程领域前景广阔