分离42和55之间的蛋白用多少浓度的胶比较好
一般凝胶浓度低是容易出现条带模糊的情况。个人手法是：用好点的材料制备凝胶来进行分析。10%的浓度可以用来分离这两种蛋白，将电泳电压在后半程调高可改善条带清晰度。也可以调高分离胶浓度至12%,但差别会较10%的更小。是在不行可以考虑用梯度胶分。“用好点的材料”是说的丙烯酰胺和甲叉。“将电泳电压在后半程调高改善条带扩散”，分离胶用135V,缩短电泳时间。两种浓度的差别也不是太大。为了扩大差别，可以通过预染marker来控制电泳时间，将小分子的蛋白跑出去，用更多的凝胶长度来加大两者的差别。不过电泳时间延长对条带清晰程度会有影响。样品的pH也会对条带的清晰程度有影响，以前做分子量和差不多大的酵母样时，条带就有些模糊。其实有时只要能将两者区分开，不一定非要追求最佳分离效果。......阅读全文
转染过程中载体蛋白对于目的蛋白是否有影响
转染后Western检测不到高表达量的目的蛋白有很多原因首先就是抗体是否合适需检测的目的蛋白，可以考虑更换其他抗体然后转染可以是瞬时转染，也可以是稳定细胞株转染假如是瞬时转染检测不到，可能就是抗体或者Western操作的问题假如是稳定细胞株转染检测不到，可能是目的基因没有稳定整合到基因组中，或者插入
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验
ATP储存液的配制依赖环核苷酸的蛋白质激酶蛋白质激酶C酪蛋白激酶酪氨酸激酶凝胶蛋白质激酶分析试剂、试剂盒ATP储存液 实验步骤一、Mg-ATP 储存液的配制ATP 买来时通常是钠盐。大多
蛋白质分离实验_分离已知pI－的蛋白质
实验材料含10 mg蛋白质／ml 的溶于水的样品试剂、试剂盒缓冲液（pH>pI）仪器、耗材50 μm 内径的未包被的融合硅毛细管柱CE 仪器实验步骤1. 用 pH 高于蛋白质的pI的 5 mmol/L 缓冲液 1/10 （V/F） 稀释蛋白质样品，使蛋白质（终浓度 = 1.0 mg/ml） 产生电荷
蛋白质免疫印迹实验悬浮细胞蛋白提取相关
悬浮细胞蛋白提取 1）所需器材：制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管（最好高温高压处理）、两个大冰盒、长满细胞的培养瓶、10ml离心管、手套、移液枪、吸头（最好高温高压处理）、滤纸、保存于4℃冰箱的PBS（最好高温高压处理）、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一种蛋白酶抑制剂，剧毒）、离
影响高密度脂蛋白代谢的酶和蛋白类
已知卵磷脂-胆固醇酰基转移酶促进胆固醇的酯化并转入HDL颗粒的核心，胆固醇脂转移蛋白促进极低密度脂蛋白的甘油三酯转移到HDL，因而加速了HDL的成熟和代谢。肝脏甘油三酯脂酶（肝脂酶）可催化水解富甘油三酯的脂蛋白。近来发现在清道夫受体BI介导的高密度脂蛋白胆固醇酯选择性摄取过程中，肝脂酶是主要的调
球蛋白和清蛋白的区别有哪些？都是什么？
球蛋白是一种存在于人体中的血清蛋白，球蛋白是一种常见的蛋白，基本存在于所有的动植物体中。球蛋白具有免疫作用，因此也有人称球蛋白为免疫球蛋白。白蛋白又称为清蛋白，由肝实质细胞合成，是血浆中含量最多的蛋白质，占总蛋白的57%～68%。白蛋白主要生理功能包括：作为内源性氨基酸营养源；其具有相当的酸碱缓冲能
关于锌蛋白酶促进蛋白质代谢的作用
锌与蛋白质代谢有密切关系，缺锌时蛋白质合成受阻。因为锌是蛋白质合成过程中多种酶的组成成分。如蛋白质合成所必需的RNA聚合酶中就含有锌。缺锌会影响大豆蛋白态氮的含量，同时也反应在鲜重上。植物缺锌的一个明显特征是植物体内RNA聚合酶的活性提高。由此可见，缺锌植物体内蛋白质含量降低是由于RNA降解加快
蛋白质测定仪用于羊奶蛋白质测定
研究表明，羊奶是最接近母乳的奶，分子结构与母乳最相似，含有大量的乳清蛋白，婴儿对羊奶的消化率可达94%以上。因此在现代的很多奶制品生产企业，羊奶的生产频率很高，而在这些企业的品控中心，一般都配备有蛋白质测定仪这样的检测仪器，用于测定羊奶中的蛋白质含量，从而保障产品的质量。
Cell：靶向TMED9蛋白有望治疗多种毒性蛋白病
科学家们早就知道，数十种遗传性疾病（也称为毒性蛋白病），是由细胞中特定错误折叠蛋白的堆积引起的。但是，负责这种堆积的分子机制仍然是个谜，这就阻止了开发相应疗法的努力。 如今，在一项新的研究中，来自美国布罗德研究所、哈佛医学院和布莱根妇女医院的研究人员发现一些毒性蛋白病（toxic protei
新蛋白质组学方法引领蛋白功能研究革命
人类细胞是通过成千上万个蛋白质的协同作用来控制它们生长和分化的。但是，到目前为止，大多数人类蛋白质的特定功能还不清楚。 疾病的发生常常是由于冠军细胞蛋白质功能的失常。目前，世界各地已经启动了大量大规模的研究计划以了解所有人类蛋白质的功能。 现在，来自IRCM（Instiut de recherc
藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE标记蛋白A方法
藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE-标记蛋白A方法 藻红蛋白标记抗体的方法： 1. 巯基化藻红蛋白（PE）的制备； （1） 将600μl浓度为15.5mg/ml的盐酸巯醇亚胺加到1.2ml浓度为3.6mg/ml的PE中； （2） 将以上混合液和1.2ml pH6.
非还原型蛋白和还原型蛋白反相hplc的不同
反向色谱是流动相极性大于固定相极性，所以流动相极性增大，它的洗脱能力就减小，因为留在固定相上的物质是极性小的物质，所以用极性溶剂来洗保留时间就会增大。
基因重组蛋白相比于普通蛋白有什么优点
选择合适的 蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素，包括：目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外，许多蛋白质表达项目也存在着风险，尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择，不同的系统有不同的特性和应用。在这里，
关于蛋白质工程融合蛋白质的介绍
脑啡肽(Enk)N端5肽线形结构是与δ型受体结合的基本功能区域，干扰素（IFN）是一种广谱抗病毒抗肿瘤的细胞因子。黎孟枫等人化学合成了EnkN端5肽编码区，通过一连接3肽编码区与人α1型IFN基因连接，在大肠杆菌中表达了这一融合蛋白。以体外人结肠腺癌细胞和多形胶质瘤细胞为模型，采用3H－胸腺嘧啶
基因重组蛋白相比于普通蛋白有什么优点
选择合适的 蛋白表达系统是重组蛋白成功表达的关键。需要考虑以下方面的因素，包括：目标蛋白性质、用途、蛋白质产量和成本。此外，许多蛋白质表达项目也存在着风险，尤其是大蛋白、膜蛋白、核蛋白和具有大量翻译后修饰的蛋白质。目前卡梅德生物可以提供几种表达系统可供客户选择，不同的系统有不同的特性和应用。在这里，
小鼠心脏组织蛋白样品的蛋白质组学分析
实验步骤1. 蛋白质双向电泳1) 第一向固相pH梯度等电聚焦电泳a. 上样：第一向等电聚焦采用胶内加样的方法进行。精确吸取一定量的蛋白样品(银染样品的蛋白上样量为140 ug计，考染样品为1.3 mg)加入重泡涨液(8 mol/L尿素，2%CHAPS，痕量滨酚蓝，20 mmol/L DTT，0.
蛋白质制备过程中如何保持蛋白活性？
蛋白质的制备是一项十分细致的工作。涉及物理学、化学和生物学的知识很广。高分子蛋白质具有一定的立体构象，相当不稳定，极易变性、变构，为得到天然状态的蛋白质，尽量采用温和的手段，如中性、低温、避免起泡等，还要注意防腐。动物材料中的蛋白质有些可溶的形式存在于体液（如血浆、消化硫等）中，可以不必经过提取直接
球状蛋白质和纤维状蛋白质区别
以长轴和短轴之比为标准，球状蛋白质小于10，纤维状蛋白质大于10。纤维状蛋白多为结构蛋白，是组织结构不可缺少的蛋白质，由长的氨基酸肽链连接成为纤维状或蜷曲成盘状结构，成为各种组织的支柱，如皮肤、肌腱、软骨及骨组织中的胶原蛋白；球状蛋白的形状近似于球形或椭圆形。许多具有生理活性的蛋白质，如酶、转运蛋白
尿常规中的蛋白与尿微量白蛋白的区别
1 尿常规中的蛋白 尿常规中蛋白是指尿液中的总蛋白。 正常情况下，一些蛋白质可以透过肾小球的滤过屏障进入原尿中，但经肾小管重吸收后，只有极少量的蛋白质进入尿液中。正常人尿常规中蛋白一项应为阴性。受尿总蛋白测定的方法学限制，尿总蛋白的定性、定量灵敏度均较低，故该指标主要用于体检，如泌尿系统疾
Cell：构建出RGS蛋白调节G蛋白信号的全面图谱
在一项新的研究中，来自美国斯克里普斯研究所的研究人员全面绘制了细胞内的一类关键蛋白如何调节从细胞表面受体传入的信号。此外，他们揭示了人们通常在这类蛋白中存在的变异导致他们的细胞在相同的细胞受体受到刺激时做出不同的反应，这为为什么不同人对相同的药物作出的反应存在有很大的不同提供了一个合理的解释。相
Nature：揭示伴侣蛋白ClpB清理有毒蛋白聚集物机制
细胞如何解开聚集在一起的蛋白？在一项新的研究中，来自荷兰国家原子分子研究所（AMOLF）和德国癌症研究中心的研究人员如今发现伴侣蛋白ClpB可强行拉开蛋白链中暴露的环状结构（loop），随后将它们从蛋白聚集物中拉取出来。相关研究结果于2020年1月29日在线发表在Nature期刊上，论文标题为“
血液中血清蛋白和其他球蛋白的分离原理
实验原理带电质点在电场作用下，带正电荷的移向负极，带负电荷的移向正极，这种现象称为电泳。蛋白质分子具有许多可解离的酸性基团和碱性基团，在一定的pH条件下，它会解离而带电，在某一pH下，蛋白质分子中所带的正电荷数恰好等于负电荷数，即分子静电荷等于零。此时蛋白质分子在电场中不移动，溶液的这一PH值称为该
球状蛋白质和纤维状蛋白质区别
以长轴和短轴之比为标准，球状蛋白质小于10，纤维状蛋白质大于10 [2] 。纤维状蛋白多为结构蛋白，是组织结构不可缺少的蛋白质，由长的氨基酸肽链连接成为纤维状或蜷曲成盘状结构，成为各种组织的支柱，如皮肤、肌腱、软骨及骨组织中的胶原蛋白；球状蛋白的形状近似于球形或椭圆形。许多具有生理活性的蛋白质，
抗体蛋白A或蛋白G微珠层析柱的制备
蛋白A或蛋白G微珠-抗体层析柱是免疫亲和层析技术中最常用的微珠基质之一。此类层析柱容易制备，由于抗体分子是通过Fc段与微珠基质结合，抗原结合片段（Fab）可与抗原最大限度地发生作用。以下介绍的方法可用于蛋白质抗原的纯化，但类似的方案也适用于任何其他抗原。 抗体可直接与蛋白A或蛋白G结合。根据抗
饲料中粗蛋白测定方法——粗蛋白测定仪法
饲料的生产过程中，为了保证加工而成的产品的品质，需要对饲料进行相关的检测，其中一项就是使用粗蛋白测定仪测定饲料中的粗蛋白。目前这种方法也是饲料中粗蛋白测定方法中重要的一种方式，我们也可以称其为粗蛋白测定仪法。 粗蛋白测定仪法的原理是凯氏定氮法测定饲料中的含氮量。通过化学试剂破坏
尿蛋白VS尿微量蛋白，傻傻分不清楚？
首先我们先分清什么是尿蛋白，以及产生尿蛋白的几个原因：24小时尿蛋白定量是指收集24小时内的排出的所有的尿液来做定性试验的一种尿液检测方法。清晨第一次的小便排干净后，从第二次小便开始留。记录第一次小便的时间，直至第二天的这个时间，为24个小时内的，每一次所有的小便，都放在一个容器里，混合均匀，然后从
血清脂蛋白和血清脂蛋白电泳的注意事项
样本：可用新鲜、未冷冻的血清分离脂蛋白。血浆不适合用来做脂蛋白电泳，因为会出现一条纤维蛋白原区带。 带有清晰的分离组分的脂蛋白图形是进行准确解释的先决条件。如果能够很好地满足这些条件，在脂蛋白电泳和参考方法(超速离心法)之间就可以相当一致。各组分的精密度不同，用变异系数表示，估计一般都在5%以
蛋白质的结构及蛋白质的功能（二）
(二)蛋白质空间橡象与功能活性的关系 蛋白质多种多样的功能与各种蛋白质特定的空间构象密切相关，蛋白质的空间构象是其功能活性的基础，构象发生变化，其功能活性也随之改变。蛋白质变性时，由于其空间构象被破坏，故引起功能活性丧失，变性蛋白质在复性后，构象复原，活性即能恢复。 在生物体内，当某种物质
尿蛋白加号和尿蛋白定量不相符怎么回事？
临床上经常有患者问，自己的尿常规蛋白++，24小时定量0.4克；而有的人尿常规蛋白阴性，定量确是0.8克。这是不是化验不准确呢？到底应该相信哪个？下面就简单介绍一下两者不相符的几种常见原因：一、一天中不同的时间段，尿蛋白排泄量是不恒定的。晨起相对较低，而我们留取尿常规往往都是留晨尿，所以可能尿蛋白量
蛋白质免疫印迹实验贴壁细胞蛋白提取
贴壁细胞蛋白提取（细胞蛋白含量一般约为1x10-9mg/细胞） 1）所需器材：制冰机、细胞刮刀、标记笔、两套1.5ml EP管（最好高温高压处理）、两个大冰盒、手套、长满细胞的培养瓶、保存于4℃冰箱的PBS、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟（PMSF，一种蛋白酶抑制剂，剧毒）、移液枪、吸头（最好高温