分离42和55之间的蛋白用多少浓度的胶比较好
一般凝胶浓度低是容易出现条带模糊的情况。个人手法是:用好点的材料制备凝胶来进行分析。10%的浓度可以用来分离这两种蛋白,将电泳电压在后半程调高可改善条带清晰度。也可以调高分离胶浓度至12%,但差别会较10%的更小。是在不行可以考虑用梯度胶分。“用好点的材料”是说的丙烯酰胺和甲叉。“将电泳电压在后半程调高改善条带扩散”,分离胶用135V,缩短电泳时间。两种浓度的差别也不是太大。为了扩大差别,可以通过预染marker来控制电泳时间,将小分子的蛋白跑出去,用更多的凝胶长度来加大两者的差别。不过电泳时间延长对条带清晰程度会有影响。样品的pH也会对条带的清晰程度有影响,以前做分子量和差不多大的酵母样时,条带就有些模糊。其实有时只要能将两者区分开,不一定非要追求最佳分离效果。......阅读全文
脂蛋白(a)的特性
10~140mmol/L(0~300毫克/L) 检查介绍 脂蛋白(a)是血液中脂蛋白的成分之一,结构复杂,是一种与血纤维蛋白溶解酶原有相同性质的糖蛋白。 临床意义 增高:见于动脉粥样硬化性心脑血管病、急性心肌梗死、家族性高胆固醇血症、糖尿病、大动脉瘤及某些癌症等。 减低:见于肝脏疾病、
GC球蛋白介绍
GC球蛋白介绍: GC球蛋白由肝细胞合成,分子上具有一个与类固醇结合的位点,是结合与运送维生素D及其代谢产物的工具。能和单体的肌动蛋白(G-肌动蛋白)以等分子比例结合,并能抑制G-肌动蛋白聚合为F-肌动蛋白,是肌动蛋白的主要清除剂,可防止微生物侵袭机体致细胞破坏后对组织的损害。
核蛋白提取实验
实验材料 水稻悬浮细胞试剂、试剂盒 匀浆液裂解缓冲液SDS 样品缓冲液磷酸缓冲液实验步骤 ( 1 ) 按照 Morre 和 Anderson 的方法从水稻悬浮细胞中分离细胞核,本文对方法进行了一些改动。所有分离细胞核的步骤都在冰上或 4°C 进行。( 2 ) 3000 g 离心 5 min 收集约
球蛋白的来源
按球蛋白来源可分为两种,一为健康人静脉血来源的丙种球蛋白制剂,按蛋白质含量有10%、16%、16.5%等数种(国内制品浓度在10%以上),其中丙种球蛋白占95%以上。 另一种为胎盘血来源的丙种球蛋白(人胎盘血丙种球蛋白),即胎盘球蛋白,制剂含蛋白质5%,其中丙种球蛋白占90%以上。胎盘球蛋白制
膜蛋白的表达
常用于重组膜蛋白的表达系统有真核表达系统、原核表达系统和近些年来发展的无细胞表达系统。其中以大肠杆菌(E.coli)为代表的原核表达系统因为操作简单、成本相对低廉、遗传背景清楚、方便同位素标记,以及有大量可利用的表达载体和宿主菌株等原因,是当下获取重组膜蛋白的最主要途径。对于一些膜蛋白而言,采用增加
蛋白质染色
二维凝胶电泳(2-DE)是广为蛋白质组学科学家们应用的经典技术之一,蛋白混合物在两个维度上被分离。第一步是常规的等电聚焦,此过程中蛋白质根据其等电点被分离。接着,第二维使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),将蛋白质按分子量进一步分离。上述两步操作在互相垂直的两个方向上,使分离的蛋白
提纯蛋白的步骤
蛋白纯化方法很多,也很复杂,一般程序如下:分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。 前处理 分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态,不丢失生物活性。为此,动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去
膜蛋白的功能
◆运输蛋白:膜蛋白中有些是运输蛋白,转运特殊的分子和离子进出细胞;◆酶:有些是酶,催化相关的代谢反应;◆连接蛋白:有些是连接蛋白,起连接作用;◆受体:起信号接收和传递作用。
有关刺突蛋白
当CO-VID-19大流行时,Lu很快将其研究HIV-1病毒的专业知识应用于SARS-CoV-2。在大流行之前,Lu研究了哪种形状的HIV-1尖峰容易受到抗体的攻击。运用类似的技术,她于2020年3月求助于SARS-CoV-2。由于刺突蛋白在SARS-CoV-2病毒的外部非常突出,因此它们是疫苗和治
蛋白酶简介
CAS编码 9014-01-1,9001-92-7,9036-06-0英文通用名称 Protease中文通用名称 蛋白酶英文商品名称 Proteinase性状描述 近乎白色至浅棕黄色无定形粉末或液体。溶于水,水溶液一般呈淡黄色。几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚。主要作用是使蛋白质水解为低分子蛋白胨、多肽及
扩展蛋白的结构
其氨基末端为约 2 2个氨基酸编码的信号肽,进入分泌途径后被剪切, 使扩张蛋白成为成熟肽 。该蛋白碳末端假定的结合 区域 ( 约10kDa ) 含有一系列保守的色氨酸残基 ( w) , 这些色氨酸残基有一定的间隔,很像纤维酶 的纤维素结合区域。中间区域 ( 1 5 k Da ) 被认为是重要的催
血浆蛋白的组成
血液由有形成分红细胞、白细胞和血小板,以及无形的液体成分血浆(plasma)组成。血液凝固后析出淡黄色透明液体,称为血清(serum)。血清与血浆的区别在于血清中没有纤维蛋白原,但含有一些在凝血过程中生成的分解产物。 生理情况下,血液经血管在全身不断流动,转运各种物质与组织之间。血浆,组织间液
《科学》文章复活蛋白
来自北卡罗莱纳州大学化学系,俄勒冈州大学生态与进化生物学中心的研究人员“复活”了4亿5千万年前的一个蛋白:脊椎动物糖皮质激素和盐皮质激素受体(glucocorticoid (GR) and mineralocorticoid (MR) receptors),寻找引起这类受体进化的变化,这一研究成果公
血浆蛋白的分类
分类方法 血浆蛋白是血浆中最主要的固体成分,含量为60~80g/L,血浆蛋白质种类繁多,功能各异。用不同的分离方法可将血浆蛋白质分为不同的种类。 最初用盐析法只是将血浆蛋白分为白蛋白和球蛋白,后来用分段盐析法可细分为白蛋白、拟球蛋白、优球蛋白和纤维蛋白等组分。 用醋酸纤维薄膜电泳法可分为白
糖蛋白的结构
糖蛋白中的糖链变化较大,含有丰富的结构信息。寡糖链往往是受体、酶类的识别位点。 1、 N-糖苷键型(N-连接) N-糖苷键型主要有三类寡糖链: ① 高甘露糖型,由GlcNAc和甘露糖组成; ② 复合型:除了GlcNAc和甘露糖外、还有果糖、半乳糖、唾液酸; ③ 杂合型,包含①和②的特征
蛋白质电泳
蛋白质电泳(主要内容如下)One-Dimensional SDS-PAGETwo-Demensional SDS-PAGEProtein Electrophoresis in Agarose Gel Gel StainingRecipesOne-Dimensional SDS-PAGE·
Tau蛋白是什么
Tau蛋白在正常人体内的主要功能是诱导与促进微管蛋白聚集成微管,并维持其稳定性。成人大脑中有6种Tau蛋白亚型,其中三种是有三段微管结合重复区域(2N3R、1N3R、0N3R) ,另三种是有四段微管结合重复区域 (2N4R、1N4R、0N4R)。2N4R/ Tau-441 是Tau全长蛋白 , K1
脂蛋白的作用
可溶性脂蛋白即血浆脂蛋白在动物体内脂质的运输方面起重要作用,脂蛋白中的脂质还能与细胞膜的组分相互交换,参与细胞脂质代谢的调节;此外,血浆脂蛋白与动脉粥样硬化型心血管疾病之间有密切关系,低脂蛋白血和高脂蛋白血也都是血浆脂蛋白异常的疾病。不溶性脂蛋白是各种生物膜(如细胞膜、细胞器膜)的主要组成成分。
诱饵蛋白是什么
测蛋白质与蛋白质之间相互作用,已知的那个蛋白就是诱饵蛋白。用诱饵来寻找可结合的蛋白。
提纯蛋白的步骤
蛋白纯化方法很多,也很复杂,一般程序如下:分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。 前处理 分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态,不丢失生物活性。为此,动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去
什么是分泌蛋白
分泌蛋白是指在在细胞内合成后,分泌到细胞外起作用的的蛋白质。1、组成生物体的蛋白质大多数是在细胞质中的核糖体上合成的,各种蛋白质合成之后要分别运送到细胞中的不同部位,以保证细胞生命活动的正常进行。有的蛋白质要通过内质网膜进入内质网腔内,成为分泌蛋白。2、在核糖体上分泌出的蛋白质,进入内质网腔后,还要
什么是转运蛋白
转运蛋白(transport proteins)是膜蛋白的一大类,介导生物膜内外的化学物质以及信号交换。脂质双分子层在细胞或细胞器周围形成了一道疏水屏障, 将其与周围环境隔绝起来。尽管有一些小分子可以直接渗透通过膜,但是大部分的亲水性化合物,如糖,氨基酸,离子,药物等等,都需要特异的转运蛋白的帮助来
膜蛋白分离方法
1 细胞质膜资料1895 年 ,Overton 从研究细胞透性得出 " 细胞膜由连续的脂类物质组成 " 。1925 年 Gorter&Grendel: 用脂单分子膜技术测定细胞膜中脂分子的总面积,提出: "细胞膜是由双层脂分子组成 " 。1935 年 Danielli&Davson :从测定膜的表面
常见组织蛋白简介
组织蛋白酶B组织蛋白酶B(CTSB) 是溶酶体内半胱氨酸蛋白水解酶,其催化作用由Cys ,His 实现,易被巯基试剂抑制,又称巯基酶,属于木瓜蛋白酶家族,在pH 3.0 ~ 7.0 都具有活性, 碱性条件下会不可逆失活 。CTSB 存在于细菌、病毒、原生动物、植物和哺乳动物中,在肝、脾、肾、骨、神经
融合蛋白的定义
融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义,一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物,另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白,如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一,介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既
分泌蛋白是什么
分泌蛋白是指在在细胞内合成后,分泌到细胞外起作用的的蛋白质。1、组成生物体的蛋白质大多数是在细胞质中的核糖体上合成的,各种蛋白质合成之后要分别运送到细胞中的不同部位,以保证细胞生命活动的正常进行。有的蛋白质要通过内质网膜进入内质网腔内,成为分泌蛋白。2、在核糖体上分泌出的蛋白质,进入内质网腔后,还要
血浆脂蛋白概述
血脂是血浆(血清)中所有脂类的总称。包括三脂酰甘油(TC)、磷脂(PI)胆固醇(Ch)胆固醇酯(CE)及少量的游离脂肪酸(FFA)。血液中的脂类,部分由食物经消化道吸收而来,部分由人体内组织自身合成或体内各组织的分解释入。血液脂类物质不溶于水或微溶于水,血液中除脂肪酸与清蛋白结合外,其余都与载脂蛋白
锌指蛋白的作用
锌指蛋白是一类具有手指状结构域的转录因子,对基因调控起重要的作用。根据其保守结构域的不同,可将锌指蛋白主要分为C2H2型、C4型和C6型。锌指通过与靶分子DNA、RNA、DNA-RNA的序列特异性结合,以及与自身或其他锌指蛋白的结合,在转录和翻译水平上调控基因的表达、细胞分化以及胚胎发育。
脂蛋白染色介绍
1.油红O(oil red)染色将凝胶先置于平皿中,用5%乙酸固定20min,用H2O漂洗吹干后,再用油红O应用液染色18h,在乙醇∶水=5∶3中浸洗5min,最后用蒸馏水洗去底色。必要时可用氨基黑复染,以证明是脂蛋白区带。2.苏丹黑B(sudan black B)将2g苏丹黑B加60ml吡啶和40
弹性蛋白的功能
ELN基因编码一种蛋白质,它是弹性纤维的两种成分之一。编码的蛋白质富含疏水氨基酸,如甘氨酸和脯氨酸,它们形成由赖氨酸残基之间的交联所界定的可移动疏水区域。已发现该基因的多个转录变体编码不同的亚型。弹性蛋白的可溶性前体是原弹性蛋白。无序的表征与弹性反冲的熵驱动机制一致。结论是构象障碍是弹性蛋白结构和功