转录依赖的扩增系统的定义方法

1.概述:转录依赖的扩增系统(Transcript-based amplification system,TAS),是Kwen等人于1989年研究报道的,主要用于扩增RNA. 合成A、B引物,引物A的3‘末端与待扩增RNA互补,其5’端有T7RNA多聚酶的启动子信息.逆转录酶以A引物为起点合成cDNA;引物B与此cDNA3‘端互补合成cDNA第二链.逆转录酶除具有逆转录活性外,还有DNA多聚酶的活性及RNaseH的活性.T7RNA多聚酶又以此双链DNA为模板.转录出与待扩增RNA一样的RNA ,这些RNA又可作为下轮反应的模板.T7RNA多聚酶的催化效率很高,一个模板可转录10——103个RNA拷贝,因而反应液中待检RNA的数量以10的指数方式扩增.转录依赖的扩增系统的主要特点是扩增效率高,因为其拷 2. TAS RNA贝数呈10的指数方式增加,只需6个循环靶序列的拷贝数就能达到2×10。它的另一个特点是特异性高,由于......阅读全文

转录依赖的扩增系统的定义方法

1.概述:转录依赖的扩增系统(Transcript-based amplification system,TAS),是Kwen等人于1989年研究报道的,主要用于扩增RNA. 合成A、B引物,引物A的3‘末端与待扩增RNA互补,其5’端有T7RNA多聚酶的启动子信息.逆转录酶以A引物为起点合成cDN

什么是转录依赖的扩增系统?

转录依赖的扩增系统(Transcript-basedamplification system,TAS),是Kwen等人于1989年研究报道的,主要用于扩增RNA.合成A、B引物,引物A的3‘末端与待扩增RNA互补,其5’端有T7RNA多聚酶的启动子信息.逆转录酶以A引物为起点合成cDNA;引物B与此

转录依赖的扩增系统的主要特点

TAS的主要特点是扩增效率高,因为其RNA拷贝数呈10的指数方式增加,只需6个循环靶序列的拷贝数就能达到2×106。它的另一个特点是特异性高,由于TAS只能进行6次温度循环,错掺率低,加之用葡聚糖珠夹心杂交,因而特异性也高。虽然本法有较高的特异性和敏感性,但其循环过程复杂,需重复加入逆转录酶和T7R

依赖核酸序列的扩增技术的定义和原理

1.概述:依赖核酸序列的扩增(Nucleic acid sequence-based amplification,NASBA),又称自主序列复制系统(self- sustainedsequence replication,3SR)或再生长序列复制技术。1990年Guatelli等首先报道了这一技术.

依赖核酸序列的扩增的基本方法

基本方法为:将引物,标本加入扩增反应液,65℃1min使RNA分子二级结构打开,降温至37℃加入逆转录酶,T7rna聚合酶和RNaseH,并在37℃反应1——1.5小时,其产物经琼脂 糖电泳,溴乙锭染色即可在紫外仪下看到条带.NASBA的特点为操作简便,不需特殊仪器,不需温度循环.整个反应过程由三种

依赖ρ因子的转录终止

ρ因子是一种分子量为46kDa的蛋白质,以六聚体为活性形式。

核酸扩增—转录介导的扩增技术(TMA)

  TMA是一种利用RNA聚合酶和逆转录酶在约42℃等温条件下来扩增RNA或DNA的技术,其原理是带有T7 RNA聚合酶识别的启动子序列的启动子引物与模板退火经反转录形成RNA-DNA杂交分子,被反转录酶的RNase H活性水解形成单链RNA,然后与引物2退火,通过反转录合成双链DNA,在T7 RN

最杰出的等温扩增方法之一——解旋酶依赖性扩增HDA

解旋酶依赖性扩增技术(helicase-dependent amplification,HDA)于2004年发明,是模拟动物体内DNA的复制机制的一种体外恒温基因扩增技术。随着技术的发展,在反应速度、特异性和灵敏度上也不断被提升,至少有三代HAD技术,整个系统比较简单,高效。 系统核心组成:解旋酶,

依赖核酸序列的扩增技术简述

  该技术的检测反应有赖于AMV逆转录酶、噬菌体T7RNA多聚酶、核糖核酸酶H、两种特别设计的特异性寡核苷酸引物和分子信标探针共同协作而完成。  NASBA全称是nucleic acid sequence-based amplification,即依赖核酸序列的扩增技术。 依赖核酸序列的扩增技术,是

依赖核酸序列的扩增技术检测

  1 核酸提取  NASBA 方法的核酸提取可按照常规的RNA提取方法进行,根据实际需要可以采取不同的方法。  2 核酸扩增  将纯化的RNA 加到标准的NASBA 反应体系中后,先在65 ℃条件下作用5 min 去除RNA 的二级结构,然后在恒温的42 ℃条件下开始扩增反应。  3 产物的检测 

依赖核酸序列的扩增技术解析

1.概述:依赖核酸序列的扩增(Nucleic acid sequence-basedamplification,NASBA),又称自主序列复制系统(self-sustainedsequence replication,3SR)或再生长序列复制技术。1990年Guatelli等首先报道了这一技术.NA

依赖核酸序列的扩增技术叙述

  国内外的研究结果均表明,草莓组织中富含多糖等物质,分离优质核酸较困难,核酸巾的杂质影响taq DNA聚合酶的活性,从而影响PCR技术在草莓病毒检测中的应用。为了提高利用PCR技术草莓病毒检测的稳定性,国内外的学者在草莓核酸提取方法做了较多的研究,利用OIAGEN公司生产的植物RNA提取试剂盒(P

依赖核酸序列的扩增技术相关

  NASBA的简要过程如下:1.RNA模板链进入反应混合物后,第一个引物首先与模板链的3'端结束。2. 反转录酶,合成反义的补偿的DNA链。3. RNA 酶H(一种核糖核酸内切酶,能够特异性地水解杂交到DNA链上的RNA磷酸二酯键,分解RNA/DNA杂交体系中的RNA链,但不能消化单链或双

频率依赖选择的定义

中文名称频率依赖选择英文名称frequency dependent selection定  义对某种基因型的选择依赖于该基因型在群体中的频率,频率低,选择有利于该种基因型;频率高,选择不利于该种基因型。应用学科遗传学(一级学科),进化遗传学(二级学科)

依赖ρ因子的转录终止的功能介绍

依赖ρ因子的转录终止:在依赖ρ因子终止的转录中,产物RNA的3'-端会依照 DNA 模板,产生较丰富而且有规律的C碱基。ρ因子正是识别产物 RNA 上这些终止信号序列,并与之结合。结合 RNA后的ρ因子和 RNA pol都可发生构象变化,从而使RNA pol的移动停顿,ρ因子中的解旋酶活性使

转录图谱的定义

转录图谱是在识别基因组所包含的蛋白质编码序列的基础上绘制的结合有关基因序列、位置及表达模式等信息的图谱。在人类基因组中鉴别出占具2%~5%长度的全部基因的位置、结构与功能,最主要的方法是通过基因的表达产物mRNA反追到染色体的位置。

转录的定义介绍

转录(Transcription)是遗传信息从DNA流向RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以A、U、C、G四种核糖核苷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。作为蛋白质生物合成的第一步,进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特

转录物的定义

中文名称转录物英文名称transcript定  义在DNA模板上由RNA聚合酶催化转录生成的mRNA。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

共转录的定义

中文名称共转录英文名称cotranscription定  义(1)原核生物的基因以多顺反子或操纵子形式存在,被转录为一个共同的信使核糖核酸(mRNA)。(2)通过基因操作使不同的基因同时在细胞或组织中一起转录。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)

贴壁依赖性的定义

中文名称贴壁依赖性英文名称anchorage dependence定  义一些真核细胞需要附着在固体表面才能在体外培养中生长的特性。应用学科遗传学(一级学科),发育遗传学(二级学科)

基因扩增技术的定义

又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力,能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品,因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等多领域

通用转录因子的定义

通用转录因子(general transcription factors, GTFs)   。真核生物中有效的和启动子特异性的起始过程中需要几个起始因子,这些起始因子称为通用转录因子。

转录终止因子的定义

中文名称转录终止因子英文名称transcription termination factor定  义辅助具有RNA聚合酶活性的转录复合体特异性地识别转录终止信号的蛋白质因子(如ρ因子等),其作用导致转录终止。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),基因表达与调控(二级学科)

转录物组的定义

转录组也称“转录物组”。是一个基因组转录的所有RNA。

通用转录因子的定义

通用转录因子(general transcription factors, GTFs) 。真核生物中有效的和启动子特异性的起始过程中需要几个起始因子,这些起始因子称为通用转录因子

转录物组的定义

转录组也称“转录物组”。是一个基因组转录的所有RNA。

转录的定义和过程

转录(Transcription)是遗传信息从DNA流向RNA的过程。即以双链DNA中的确定的一条链(模板链用于转录,编码链不用于转录)为模板,以A、U、C、G四种核糖核苷酸为原料,在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。作为蛋白质生物合成的第一步,进行转录时,一个基因会被读取并被复制为mRNA,即特

邻近依赖性调节的定义

中文名称邻近依赖性调节英文名称context-dependent regulation定  义转录因子对转录的调节受到其同启动子上结合的其他转录因子的相对位置的影响或受共同参与的转录因子丰度的影响。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),总论(二级学科)

胸腺依赖性抗原的定义

胸腺依赖性抗原(TD-Ag),是指刺激B细胞产生抗体需要有巨噬细胞和T淋巴细胞协助的抗原。如,多数蛋白质抗原。

基因扩增子的定义

扩增子为基因组的一个DNA片段,当生物接触某种抑制该片段所含基因的功能的药物后,该DNA片段可形成多个线性拷贝。例如,哺乳动物中二氢叶酸还原酶可被甲氨喋呤抑制,当哺乳动物接触该药物后,则引起二氢叶酸还原酶基因(dihydrofolate reductase)的扩增。扩增片段常会有除被抑制基因序列以外