依赖核酸序列的扩增技术的定义和原理
1.概述：依赖核酸序列的扩增(Nucleic acid sequence-based amplification，NASBA)，又称自主序列复制系统(self- sustainedsequence replication，3SR)或再生长序列复制技术。1990年Guatelli等首先报道了这一技术.NASBA 主要用于RNA的扩增、检测及测序.该反应有赖于AMV 逆转录酶，T7RNA多聚酶和核酸酶H(RNaseH)共同协作而完成。NASBA反应体系中除含有上述三种酶外，还含有核糖核苷，两种特殊的引物和缓冲液。引物I 3‘末端与靶序列互补，5’端含T7RNA多聚酶的启动子，这一引物是用于合成cDNA的.引物Ⅱ的碱基序列与cDNA的5‘ 未端互补。2.原理：在NASBA反应时，首先引物Ⅰ与RNA模板复性( 结合)，AMV逆转录酶催化合成cDNA，RNaseH水解cDNA上的RNA，形成一条单链的DNA;引物Ⅱ随即与此cDNA的5&#......阅读全文
依赖核酸序列的扩增技术的定义和原理
1.概述：依赖核酸序列的扩增(Nucleic acid sequence-based amplification，NASBA)，又称自主序列复制系统(self- sustainedsequence replication，3SR)或再生长序列复制技术。1990年Guatelli等首先报道了这一技术.
依赖核酸序列的扩增技术叙述
国内外的研究结果均表明，草莓组织中富含多糖等物质，分离优质核酸较困难，核酸巾的杂质影响taq DNA聚合酶的活性，从而影响PCR技术在草莓病毒检测中的应用。为了提高利用PCR技术草莓病毒检测的稳定性，国内外的学者在草莓核酸提取方法做了较多的研究，利用OIAGEN公司生产的植物RNA提取试剂盒(P
依赖核酸序列的扩增技术简述
该技术的检测反应有赖于AMV逆转录酶、噬菌体T7RNA多聚酶、核糖核酸酶H、两种特别设计的特异性寡核苷酸引物和分子信标探针共同协作而完成。 NASBA全称是nucleic acid sequence-based amplification，即依赖核酸序列的扩增技术。 依赖核酸序列的扩增技术，是
依赖核酸序列的扩增技术相关
NASBA的简要过程如下：1.RNA模板链进入反应混合物后，第一个引物首先与模板链的3'端结束。2. 反转录酶，合成反义的补偿的DNA链。3. RNA 酶H（一种核糖核酸内切酶，能够特异性地水解杂交到DNA链上的RNA磷酸二酯键，分解RNA/DNA杂交体系中的RNA链，但不能消化单链或双
依赖核酸序列的扩增技术解析
1.概述：依赖核酸序列的扩增(Nucleic acid sequence-basedamplification，NASBA)，又称自主序列复制系统(self-sustainedsequence replication，3SR)或再生长序列复制技术。1990年Guatelli等首先报道了这一技术.NA
依赖核酸序列的扩增技术检测
1 核酸提取 NASBA 方法的核酸提取可按照常规的RNA提取方法进行，根据实际需要可以采取不同的方法。 2 核酸扩增 将纯化的RNA 加到标准的NASBA 反应体系中后，先在65 ℃条件下作用5 min 去除RNA 的二级结构，然后在恒温的42 ℃条件下开始扩增反应。 3 产物的检测
核酸序列扩增法的定义和原理
中文名称核酸序列扩增法英文名称nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 义一种在等温系统中扩增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶仅在结合核酸上相应位点时才能起作用的特点，将结合位点序列与靶序列相连，然后产生靶分子的RNA拷贝，形成反转录和RN
依赖核酸序列的扩增的基本方法
基本方法为:将引物，标本加入扩增反应液，65℃1min使RNA分子二级结构打开，降温至37℃加入逆转录酶，T7rna聚合酶和RNaseH，并在37℃反应1——1.5小时，其产物经琼脂 糖电泳，溴乙锭染色即可在紫外仪下看到条带.NASBA的特点为操作简便，不需特殊仪器，不需温度循环.整个反应过程由三种
核酸序列扩增法的定义
中文名称核酸序列扩增法英文名称nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 义一种在等温系统中扩增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶仅在结合核酸上相应位点时才能起作用的特点，将结合位点序列与靶序列相连，然后产生靶分子的RNA拷贝，形成反转录和RN
核酸序列的扩增技术优势
相对于免疫学方法或其他基因检测法，NASBA在试验的快速、敏感性、特异性方面有更多的优势。 特异性强：NASBA是一种快速、等温的RNA扩增技术，通过AMV逆转录酶和T7 RNA聚合酶进行的扩增反应，因为反应条件温和以及比PCR短的反应时间，因此转录更加忠实于模板，错配率很低，因而特异性更强。
核酸序列扩增法的技术特点
中文名称核酸序列扩增法英文名称nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 义一种在等温系统中扩增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶仅在结合核酸上相应位点时才能起作用的特点，将结合位点序列与靶序列相连，然后产生靶分子的RNA拷贝，形成反转录和RN
转录依赖的扩增系统的定义方法
1.概述：转录依赖的扩增系统(Transcript-based amplification system，TAS)，是Kwen等人于1989年研究报道的，主要用于扩增RNA. 合成A、B引物，引物A的3‘末端与待扩增RNA互补，其5’端有T7RNA多聚酶的启动子信息.逆转录酶以A引物为起点合成cDN
核酸扩增—转录介导的扩增技术(TMA)
TMA是一种利用RNA聚合酶和逆转录酶在约42℃等温条件下来扩增RNA或DNA的技术，其原理是带有T7 RNA聚合酶识别的启动子序列的启动子引物与模板退火经反转录形成RNA-DNA杂交分子，被反转录酶的RNase H活性水解形成单链RNA，然后与引物2退火，通过反转录合成双链DNA，在T7 RN
恒温核酸扩增技术的扩增速度
由于恒温核酸扩增只需要在一个温度下进行，相比较于PCR不同温度之间的循环，恒温扩增不需要反复的升温降温过程，有些恒温扩增的速度是快于PCR的扩增速度的。例如：环介导恒温核酸扩增（LAMP），重组聚合酶扩增法（RPA）以及切刻内切酶恒温扩增（NEAR）。目前英国公司optigene已经成功的改造了
基因扩增技术的定义
又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力，能检测单分子DNA或对每10万个细胞中仅含1个靶DNA分子的样品，因而此方法立即在分子生物学、微生物学、医学及遗传学等多领域
核酸扩增—链置换扩增技术(SDA)
SDA是一种基于酶促反应的DNA体外等温扩增技术，采用标记的两种不同荧光基团的探针。在SDA过程中，该探针被掺入到双链扩增产物中，由限制内切酶的酶切使淬灭基团与荧光基团分开，从而释放荧光，用荧光偏振检测法定量检测。SDA较之PCR有更高的扩增效率，耗时仅30min。其基本系统包括一种限制性核酸内
序列特异性引物的定义和技术特点
序列特异性引物指一种测定基因突变的方法。即利用针对点突变的2个等位特异性寡核苷酸(ASO)引物(A、B标记其中之一)与另一共同引物（C）组成引物系统；在引物延伸时，A与B同时竞争靶序列上同一复性位点，扩增反应后，经凝胶电泳及放射自显影，胶片上的显带是标记同位素的引物所扩增的产物。
恒温核酸扩增技术通量
在实际的产业化中，分子诊断仪器的通量往往至关重要。对于qPCR而言，由于引物设计的成熟和荧光通道的多样性，往往可以比较好的实现高通量检测。由于恒温核酸扩增技术引物设计较为困难，单一的反应温度会造成引物和模板，引物与引物之间的非特异性链接和扩增，使得恒温扩增的检测通量受到限制。但同时也得益于反应温
恒温核酸扩增技术概述
恒温核酸扩增技术是利用各种酶，引物，脱氧核苷三磷酸（dNTP），模板DNA以及缓冲液的混合物在同一温度下温浴一定时间，让不同的酶与DNA进行反应，从而达到特定DNA片段的扩增。与传统的PCR核酸扩增相比，恒温核酸扩增不需要在不同温度之间的转换，只要保持酶反应的最佳温度，37℃、42℃、56℃或6
标准核酸序列的使用和维护
标准核酸序列的使用 将按DNA测序技术指导原则测定得到的供试品DNA序列与标准核酸序列进行计算比对，进而结合判定标准进行种属鉴别或鉴定。判定标准的制定应考虑不同物种的变异范围，并在相应通则或品种项下予以明确。核酸序列比对方法一般建议根据样品特点从以下三种方法中选择采用。 1.BLAST法
基因扩增的定义和原因
基因扩增（gene amplification）是指某一个特定基因的拷贝数选择性地增加而其它基因的拷贝数并未按比例增加的过程 [1] 。基因扩增产生的可能原因：1）由错误的DNA复制和修复导致的基因复制；2）自私遗传元件偶然捕获而导致的DNA重复；3）人工聚合酶链式反应（PCR）扩增。
基因扩增技术原理和过程
PCR扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲扩增的DNA片段,一般需20-30个碱基对,过少则难保持与DNA
停止转移序列的定义和功能
停止转移序列（stop transfer sequence），肽链上的一段特殊序列，与内质网膜的亲合力很高，能阻止肽链继续进入内质网腔，使其成为跨膜蛋白质。
cDNA末端快速扩增技术的定义
定义：cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3’末端的有效方法。
cDNA末端快速扩增技术的定义
⑴.5’ RACE-PCR：利用mRNA的3‘末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点，以连有SMART寡核营酸序列通 用接头引物的Oligo(dT)30MN作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA。然后用一个基因特异引物GSP2 (gene specific primer,GSP)作为上游引物
EMA－常温核酸扩增技术介绍
基于分子仿生学的原理，把生物体内(如大肠杆菌，酵母或人体等)多酶介导的核酸复制机理在体外再现，使痕量的核酸靶标在普通生物耐受的条件下(常温下)进行快速的扩增，同时利用特异性荧光探针结合扩增产物，通过荧光检测仪实时监测荧光信号，实现核酸靶标的快速扩增和检测。 常温核酸扩增技（简称EMA技术），是由点晶
核酸等温扩增技术有什么
环介导等温扩增技术（LAMP）。依赖于核酸序列的扩增技术（NASBA）。滚环扩增技术（RCA）。单引物等温扩增技术（SPIA）。依赖于解旋酶的等温扩增技术（HAD）。链接代扩增技术（SDA）。快速等温检测放大技术（RIDA）。切刻内切酶核酸恒温扩增技术（NEMA）。核酸等温扩增技术，无论是在实际操作
核酸等温扩增技术及其应用
据微生物学家的估计，采用培养技术，仅有约1%的细菌可以培养。在过去的一个世纪里，以聚合酶链反应（PCR）为代表的基于核酸的检测技术发展迅速，为其他病原体的精确检测诊断提供了可能。毋庸置疑，Kary Mtlllis发明的PCR技术是20世纪80年代分子生物学领域的一项革命性突破。也许他本人当时也没有想
恒温核酸扩增技术的特异性
由于恒温核酸扩增的整个反应是没有温度的变化，模板DNA双链的打开，引物与互补片段的链接以及新片段的合成都是在同一温度下进行的。这就造成某些情况下的反应体系里引物之间形成非特异性互补，扩增，最后造成假阳性的结果。与PCR相比，恒温核酸扩增更易出现假阳性的结果。
核酸疫苗的定义和功能
核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因（DNA或RNA）直接导入动物体细胞内， 并通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白， 诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答， 以达到预防和治疗疾病的目的。