用什么溶解引物最合适?

常用的溶剂是水或者TE缓冲液(pH7.4——8.0),两者在实际实验中都是常用的。一般认为,TE缓冲液比较稳定,能提供稳定的pH环境,适合于保存引物(以及质粒或基因组DNA)。但也有人认为,TE中的EDTA分子会影响后续PCR的效率。如果您很注重PCR效率的话就要考虑到这一点。而双蒸水很易得,操作方便,也是常用的溶剂。但双蒸水对于引物也有弊端:因为pH原因以及没有足够的离子,不利于引物的长期保存。当然,如果您对实验的要求没有这么严格的话,用水或TE都足以能满足您的需要。......阅读全文

用什么溶解引物最合适?

常用的溶剂是水或者TE缓冲液(pH7.4——8.0),两者在实际实验中都是常用的。一般认为,TE缓冲液比较稳定,能提供稳定的pH环境,适合于保存引物(以及质粒或基因组DNA)。但也有人认为,TE中的EDTA分子会影响后续PCR的效率。如果您很注重PCR效率的话就要考虑到这一点。而双蒸水很易得,操作方

溶解引物需要什么水

先离心!然后加入适量的水或TE溶解。一般配制成较高浓度的母液(约100μM),保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。引物浓度不宜偏高,浓度过高有两个弊端:一是容易形成引物二聚体(primer-dimer),二是当扩增微量靶序列并且起始材料又比较粗时,容易产

引物溶解引物保存

1. 如何测定引物的OD值?用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量,请注意紫外分光光度计的使用,测定时溶液的吸光度最好稀释到0.2~0.8之间(吸光度太高或太低会有较大的误差)。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,取部分溶液稀释到1 ml 并在1 ml 标准比色皿中测定其吸光度

引物溶解引物保存

1.  如何测定引物的OD值? 用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量,请注意紫外分光光度计的使用,测定时溶液的吸光度最好稀释到0.2~0.8之间(吸光度太高或太低会有较大的误差)。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,取部分溶液稀释到1 ml 并在1 ml 标准比色皿中测定其

如何溶解引物?

干燥后的引物质地非常疏松,开盖前最好离心一下,或管垂直向上在桌面上敲敲,将引物粉末收集到管底。根据计算出的体积加入去离子无菌水或10mM Tris pH7.5缓冲液,室温放置几分钟,振荡助溶,离心将溶液收集到管底。溶解引物用的水一般不要用蒸馏水,因为有些蒸馏水的pH值比较低(pH4-5),引物在这种

怎样溶解引物?

生工的合成报告单给出了每OD引物稀释为100 μmoL/L(即100 pmol/ul)浓度的加水量,您可以根椐您的实验需要加入适量的无核酸酶的双蒸水(PH>6.0)或TE缓冲液(PH7.5~8.0),开启瓶盖溶解之前最好在3000~4000转/分钟的转速下离心1分钟,防止开盖时引物散失。

引物溶解稀释方法

在实验室进行分子克隆实验时,经常需要合成大量的引物,而这些合成的引物首先要进行适当的稀释才能使用。如果不稀释就使用引物,往往造成引物的浪费和过早的活性丧失,更有一些被污染而不能使用。因此,建议对合成的引物先进行稀释,然后使用。稀释的引物利于保存和应用。现将方法简单叙述如下:1. Oligo DNA是

如何溶解和保存引物?

如何溶解引物?干燥后的引物质地非常疏松,开盖前最好瞬时离心一下,或管垂直向上在桌面上敲敲,将引物粉末收集到管底。根据计算出的体积加入去离子无菌水或TE(pH8.0)缓冲液,室温放置几分钟,振荡助溶,离心将溶液收集到管底。溶解引物用的水一般不要用蒸馏水,因为有些蒸馏水的pH值比较低(pH4-5),引物

已经溶解的引物的问题

已经溶解的引物,为什么原先使用正常,而过一段时间再使用就不好了?如果您溶解引物的水pH过低或污染了菌或核酸酶,会使引物降解。使用时没有充分解冻混合,液体不均匀也可能会造成引物加入量不准确。建议分装引物,避免反复冻溶。建议使用10mM Tris pH7.5缓冲液溶解引物,因为有些蒸馏水的pH值

压电PVDF薄膜用什么溶剂溶解

N-甲基吡咯烷酮应该可以吧,实在不行就长时间搅拌加热试试

PVDF可以用什么溶剂溶解

给支点招吧gy106(站内联系TA)PVDF 均聚物只溶于少数几个溶剂,NMP、DMAc、DMF、TEP和DMSOrenwenfeng(站内联系TA)这些溶剂在涂覆过程中挥发,选一个可以溶解易挥发的溶剂就可以了,不要与材料反应纪宁(站内联系TA)Originally posted by atu0 a

western-blot-一抗用什么溶剂溶解

western blot 一抗一般都是以原液的形式保存的,不需要用溶剂溶解western blot 一抗使用的时候一般只需要稀释,购买时厂家应该会提供一抗稀释液。如果没有一抗稀释液可以用TBST或者PBST稀释,这个要看具体使用的情况了

western-blot-一抗用什么溶剂溶解

western blot 一抗一般都是以原液的形式保存的,不需要用溶剂溶解western blot 一抗使用的时候一般只需要稀释,购买时厂家应该会提供一抗稀释液。如果没有一抗稀释液可以用TBST或者PBST稀释,这个要看具体使用的情况了

chipseq-扩增用的PCR引物是什么

PCR引物说通俗点就是一段基因片段,一般是在NCBI上查找的

什么是引物?

引物,是指在核苷酸聚合作用起始时,刺激合成的,一种具有特定核苷酸序列的大分子,与反应物以氢键形式连接,这样的分子称为引物。引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶

什么是上游引物和下游引物

虽然这个问题很简单,但我怎么发觉挺难回答的......上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物(引物就是单链寡聚核苷酸,基因扩增需要从引物开始),同理,下游引物指与目的基因片断下游序列结合者。具体示意如下:(上下两条长线代表DNA模板)5'-----------------------

刚合成的引物用降落PCR的原因是什么?

因为理论计算的TM值用来确定退火的温度只是一个参考呀,最合适的退火温度会因为各种原因而有所差异,就连PCR仪都会有影响的,我们实验室就是,好多都是在一台能拉出条带,而在另一台上就拉不出条带,或者相反的。降落(TD)PCR代表了一种完全不同的PCR优化方法。由于开始时的退火温度选择高于估计的Tm值,随

氧化镧用盐酸和硝酸溶解有什么区别

在溶解上差别不大,不过得看你后面的用途,因为除了镧离子外,还分别引进了Cl(-)和NO3(-)。一般来说,除Cl(-)难度大得多,除NO3(-)离子容易得多。

什么是特异引物?

 多数情况下,我们要研究的基因序列都能在数据库中找到现成的序列。如果你要得到某一段序列的话,针对这个序列设计引物就行了。这样得到的引物每一个位置上的碱基都是确定的,这样的引物就叫“特异引物”。特异引物由于碱基是确定的,所以由这个序列所计算出的Tm值以及PCR退火温度都是确定的。一般特异引物的退火温度

什么是简并引物?

简并引物是指代表编码单个氨基酸所有不同碱基序列可能性引物的混合物。PCR为了增加特异性,可以参考密码子使用表,根据不同生物的碱基使用偏好,减少简并性。简并度越低,产物特异性越强,设计引物时应尽量选择简并性小的氨基酸,并避免引物3'末端简并。

PCR引物是什么

聚合酶链式反应简称PCR(Polymerase Chain Reaction) (又称:多聚酶链式反应) PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可

高效液相水和甲醇什么比例最合适

1、95%水-5%甲醇冲洗30-60min,2、纯甲醇冲洗30-60min.流速一般是1ml/min.

土壤消解到什么程度时-赶酸最合适

底部糊状,但是一定不要干结,那样就出问题了,有的金属会以氧化态存在,其实比较好的方法是在快干的时候加0.5ml左右的水,然后反复两到三次,因为赶酸需要的温度比较高特别是高氯酸之类的,所以这样反复几次效果比较好。

上游引物和下游引物有什么区别

简单的说上游引物就是和要扩增基因片断上游序列结合的引物,下游引物指与目的基因片断下游序列结合者.上游引物:DNA分子两端不一样,因为核苷酸分子不是对称的,5'位有个磷酸,3'位是-OH 就是:磷酸端和羟基端。DNA复制总是从5’端到3’端,因为DNA聚合酶只能往3’端加核苷酸。下游引

PCR引物和测序引物有什么区别

一、定义不同:PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。测序引物分自带引物和通用引物,自带引物为客户自行设计的PCR扩增引物或者载体及目的片段上设计的引物进

水中溶解氧的测定一般用什么方法

一般有三种方法:碘量法,叠氮化钠修正法,膜电极法。水中溶解氧的测定一、碘量法【原理】水样中加入硫酸锰和碱性碘化钾,水中溶解氧将低价锰氧化成高价锰,生成四价锰的氢氧化物棕色沉淀。加酸后,氢氧化物沉淀溶解形成可溶性四价锰Mn(SO4)2,Mn(SO4)2与碘离子反应释出与溶解氧量相当的游离碘,以淀粉作指

水中溶解氧的测定一般用什么方法

一般有三种方法:碘量法,叠氮化钠修正法,膜电极法。水中溶解氧的测定一、碘量法【原理】水样中加入硫酸锰和碱性碘化钾,水中溶解氧将低价锰氧化成高价锰,生成四价锰的氢氧化物棕色沉淀。加酸后,氢氧化物沉淀溶解形成可溶性四价锰Mn(SO4)2,Mn(SO4)2与碘离子反应释出与溶解氧量相当的游离碘,以淀粉作指