用什么溶解引物最合适?

常用的溶剂是水或者TE缓冲液(pH7.4——8.0),两者在实际实验中都是常用的。一般认为,TE缓冲液比较稳定,能提供稳定的pH环境,适合于保存引物(以及质粒或基因组DNA)。但也有人认为,TE中的EDTA分子会影响后续PCR的效率。如果您很注重PCR效率的话就要考虑到这一点。而双蒸水很易得,操作方便,也是常用的溶剂。但双蒸水对于引物也有弊端:因为pH原因以及没有足够的离子,不利于引物的长期保存。当然,如果您对实验的要求没有这么严格的话,用水或TE都足以能满足您的需要。......阅读全文

设计引物时需要避免引物之间形成什么而造成引物自连。

设计引物时需要避免引物之间形成_碱基互补配对。而造成引物自连。相同末端或相同黏性末端或相同平末端。末端特指双链DNA分子的端位碱基,是专用名词,不可以用在单链引物上。且引物之间的碱基互补配对不一定是所有碱基都能够互补配对,少量配对也会使两种引物结合在一起,从而不能获得特异性DNA产物。

什么是锚定引物

锚定引物是在扩未知序列(RACE或genome walking)时,与未知序列一侧结合的引物,基本都是试剂盒里自带的

什么是引物延伸分析?

引物延伸分析(primer extension analysis)主要用于mRNA 5′端作图。poly(A)+RNA首先与过量5′端标记的且与靶RNA互补的单链寡核苷酸引物杂交,然后用反转录酶延伸这个引物。产生的cDNA与RNA模板互补且长度与引物5′端和RNA 5′端之间的距离相等。该法在mRN

什么是引物?有什么功能特点?

引物,是指在核苷酸聚合作用起始时,刺激合成的,一种具有特定核苷酸序列的大分子,与反应物以氢键形式连接,这样的分子称为引物。引物通常是人工合成的两段寡核苷酸序列,一个引物与靶区域一端的一条DNA模板链互补,另一个引物与靶区域另一端的另一条DNA模板链互补,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶

为什么做pcr和测序用的引物不一样

pcr引物和测序引物是可以通用的,最多是纯化方式不一样,测序的要求高一些。最重要的是,pcr扩增是从引物开始的,而测序一般要从引物下游几十个bp以后,信号才逐渐稳定,能够读出来。所以拿pcr引物去测序,那只能测出引物下游几十个bp以后的片段,这样你pcr的片段就会测不全。故而需要重新设计测序引物,一

高效液相色谱仪样品一般用什么溶剂溶解

不同样品前处理方法不一样。溶解的话看样品极性大小,选用不同浓度的甲醇,乙腈,丙酮,,甲苯,环己烷等等

溶解药物的dmso-用什么来稀释成想要的浓度

你好,DMSO是一种细胞保护剂,它的作用机理是在细胞膜上打洞,使细胞内的水分子能渗透出来,从而防治冷冻细胞时,细胞内冰晶的形成,而破坏细胞。所以在做细胞冻存时它是必不可少的,但DMSO又能损伤细胞使用它时需要有一定浓度,一般采用的是终浓度10%就行了。最大浓度药物的DMSO含量是0一般来说,培养基中

高效液相色谱仪样品一般用什么溶剂溶解

HPLC样品的浓度这个需要看你分析的是什么样品,他的响应值是高还是低,检测项目是杂质检测还是含量检测,如果做有关物质,一般浓度较高,因为要检测出很小的杂质,根据响应值的不同来确定浓度,具体操作的时候可以做成不同浓度,来做比较,确定,一般选用浓度为样品定量限的200倍,含量的话,定量限20-100倍都

什么是细胞溶解?

细胞溶解或渗透溶解发生在细胞因渗透失衡而破裂时,导致过多的水扩散到细胞中。水可以通过细胞膜扩散或通过称为水通道蛋白的选择性膜通道进入细胞,这极大地促进了水的流动。它发生在低渗环境中,水通过渗透进入细胞并导致其体积增加到超过膜容量并且细胞破裂的程度。细胞壁的存在可防止细胞膜破裂,因此细胞溶解仅发生在动

怎么通过看扩增曲线和溶解曲线看引物的好差

具体要看你做什么实验,模板和扩增的基因实怎样的.1、扩增曲线:一般来说如果你做双ΔCT法那么你的扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个CT值(上限是1个CT值);同一个基因在...

用引物延伸法进行-RNA-的分析

实验方法原理 引物延伸法主要用于 mRNA5' 末端作图。poly (A) + RNA 先与过量 5' 末端标记的且与靶 RNA 互补的单链寡核苷酸引物杂交,然后用反转录酶延伸这个引物。产生的 cDNA 与 RNA 模板互补且长度与引物 5' 末端和 RNA 5'

用引物延伸法进行-RNA-的分析

引物延伸法主要用于 mRNA5' 末端作图。poly (A) + RNA 先与过量 5' 末端标记的且与靶 RNA 互补的单链寡核苷酸引物杂交,然后用反转录酶延伸这个引物。产生的 cDNA 与 RNA 模板互补且长度与引物 5' 末端和 RNA 5' 末端之间的距离相

用引物延伸法进行-RNA-的分析

            实验方法原理 引物延伸法主要用于 mRNA5' 末端作图。poly (A) + RNA 先与过量 5' 末端标记的且与靶 RNA 互补的单链寡核苷酸引物杂交,然后用反转录酶延伸这个引物。产生的 cDNA 与 RNA 模板互补且

使用什么样的ELISA试剂盒才最合适?

使用什么样的ELISA检测试剂盒才是*合适的?许多刚刚接触elisa试剂盒实验的客户会问出这样那样的一些小问题,选择产品大家可以从优势、服务这两方面来重点考虑,而对于哪种试剂盒好上海劲马首先向您推荐R&D品牌的,这种也是用的*多的。其实这并不是个简单的实验,多个因子,各种条件,往往让你无从下手。如果

引物的Tm值是什么

负责引物合成的公司会给你引物的详细信息,其中有理论tm值,应该是和这个公式tm=2*(a+t)+4*(g+c)计算的一样,你在进行调整优化即可。

需要什么级别的引物?

根据实验需要,确定订购引物的纯度级别。应用引物长度要求纯度级别要求一般PCR扩增< 60baseHEPD>60 basePAGE诊断PCR扩增< 40baseHEPD, PAGEDNA测序20base左右HEPD亚克隆,点突变等根据实验要求定HEPD, PAGE,HPLC基因构建(全基因合成)根据实

什么是上下游引物

引物(Primer)在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反

什么是上下游引物

引物(Primer)在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链

引物的化学本质是什么?

引物是一小段DNA或RNA,在PCR中是DNA,细胞内一般是RNA。

拿到引物之后先做什么?

一般由公司合成好的引物,最终发货的都是干粉形式。由于干粉是很细微的干燥粉末,肉眼几乎不可见,同时又很容易飞扬起来。所以在接到引物管以后,切记不要急于打开管盖。而是要先保持盖住状态、把管子放到离心机里做短暂离心,使干粉收集到管底。然后才可开盖、进行下一步的溶解。

什么是上下游引物?

引物(Primer)在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,核酸聚合酶可由其3′端开始合成新的核酸链。体外人工设计的引物被广泛用于聚合酶链反

溶解曲线双峰可以用吗

如果不是很明显的话,是可以用的,但是很明显,就要重新设计实验一般的主峰前面出峰的话,是引物二聚体,而如果主峰后面出峰的话,一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰,可以通过改变引物浓度,退火温度和镁离子浓度来解决,但如果次峰强于主峰,就是说杂带的特异性高于目的条带,一般的只能换引物了。

用甲醇过柱子会溶解硅胶?

  今天有人问我,硅胶能溶解于甲醇吗?然后我结合亲身经历斩钉截铁的告诉她,甲醇溶解硅胶是毫无疑问的,可是她追问"硅胶的成分不是SiO2吗,应该是什么都不溶才对呀。"登时语塞,SiO2能溶甲醇好像不太成立。那么甲醇究竟溶解硅胶吗?  其实,早在很多年之前这个问题就已经被人们提出,对于大部分的有机化学家

溶解曲线双峰可以用吗

如果不是很明显的话,是可以用的,但是很明显,就要重新设计实验一般的主峰前面出峰的话,是引物二聚体,而如果主峰后面出峰的话,一般的是非特异性的大片段的扩增。如果主峰相对强于次峰,可以通过改变引物浓度,退火温度和镁离子浓度来解决,但如果次峰强于主峰,就是说杂带的特异性高于目的条带,一般的只能换引物了。扩

乙酸乙酯提取物液相进样用什么溶解

这个主要看你的流动相是什么了。一般样品最好使用流动相溶解。不要说流动相不好溶解,或者担心析晶什么的。如果流动相不好溶,这个样品到了仪器里面一样容易析出的。乙酸乙酯一般用乙腈或者甲醇都可以溶解。不过最好还是用流动相。

手提式高压灭菌锅什么时候开盖最合适?

    手提式高压灭菌锅是科研实验室中或是高效实验教学中经常会用到的灭菌设备,其原理是通过对密闭空间中的水不断加热,从而聚集湿热水蒸气,逐渐造成锅内高压,从而达到灭菌的效果,由于使用手提式高压灭菌锅灭菌,锅内不仅会产生高压,还会产生高温水蒸气,因此为了保障操作人员的安全,防治热空气突然喷出,对实验

怎样选择最合适的球磨机?

  大多数人都熟悉球磨机。球磨机是粉碎物料的关键设备。广泛用于水泥、硅酸盐制品、新型建筑材料、耐火材料、化肥、黑色和有色金属选矿、玻璃陶瓷等生产行业,用于各种矿石和其他可磨材料的干磨或湿磨。  球磨机不同转速的影响也不同。  球磨机的转数直接决定研磨介质在滚筒中的运动状态和研磨操作的效果。  当转数

什么是溶解氧

溶解在水中的分子态氧称为溶解氧,通常记作DO。用每升水里氧气的毫克数表示。溶解氧量受水温、气压和溶质(如盐分)的影响,随水温升高而减少,与大气中氧分压成比例增加。水中的溶解氧虽然不是污染物质,但它是衡量水体自净能力的一个指标。溶解氧值是研究水自净能力的一种依据。在一条流动的河水中,取不同地段的水样来

什么是溶解氧

溶解氧就是指在溶解在血浆中的氧,量远小于结合氧,溶解氧量与压力成正比。有些部位毛细血管狭窄,血细胞无法穿过,只能依靠血浆中的溶解氧。通过增加压力,提升血液中的溶解氧是一个更可行方式。可以试试O2ARK高压民用氧舱。碾压般的存在。

什么是溶解氧?

溶解氧DO(英文Dissolved Oxygen的简写)表示的是溶解于水中分子态氧的数量,单位是mg/L。水中的溶解氧饱和含量与水温、大气压和水的化学组成有关,在一个大气压下,0℃的蒸馏水中溶解氧达到饱和时的氧含量为14.62mg/L,在20℃时则为9.17mg/L。水温升高、含盐量增加或大气压