PCR标准曲线线性关系不佳的原因
（1）加样/稀释误差: 使得标准品不呈梯度。（2）标准品出现降解: 应避免标准品反复冻融，或重新制备并稀释标准品。（3）引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针。（4）模板中存在抑制物，或模板浓度过高......阅读全文
PCR标准曲线线性关系不佳的原因
（1）加样/稀释误差: 使得标准品不呈梯度。（2）标准品出现降解: 应避免标准品反复冻融，或重新制备并稀释标准品。（3）引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针。（4）模板中存在抑制物，或模板浓度过高
绝对定量时标准曲线线性关系不佳的原因
加样误差：加大模板稀释倍数，提高加样体积；标准品降解：重新制备标准品，重复实验；模板浓度太高：增加模板稀释倍数。
标准曲线线性关系不佳问题分析
加样存在误差：使得标准品不呈梯度。标准品出现降解：应避免标准品反复冻融，或重新制备并稀释标准品。 引物或探针不佳：重新设计更好的引物和探针。 模板中存在抑制物，或模板浓度过高。
实时荧光曲线PCR曲线起峰较缓的原因
实时荧光曲线PCR曲线起峰较缓的原因。1，非特异性扩增：主要原因为引物特异性不好、Tm值较低或模板质量不高，可以根据设计原则设计新引物或者通过梯度PCR对引物退火温度（Tm值）进行优化，上调Tm值，选购质量较好的离心柱法核酸提取试剂，提高核酸提取质量，等等。2，引物二聚体可通过琼脂糖凝胶电泳确认引物
pcr相对定量的标准曲线如何画
PCR相对定量试验不需要画标准曲线，标准曲线是绝对定量时才用的，因为要了解目的样品中的分子拷贝数，才需要使用标准品用来绘制标准曲线，相对法引入内参基因作为参照，最终采用2的负δt次幂计算相对倍数即可。我想你要的是验证扩增条件是否合适时使用的标准曲线是不是，那个曲线一般也就是在计算扩增效率及选择模板稀
PCR反应结束无扩增曲线出现的原因
扩增效率问题：电泳检测qPCR反应产物，观察是否有目的条带出现。如果没有，则需要逐一排查引物、模板以及反应条件问题；确认引物是否降解：长时间未用的引物应先通过 PAGE 电泳检测完整性，以排除引物降解的可能性；模板浓度太低或目标基因表达丰度过低：减少稀释度，重复实验，一般未知浓度的样品。通常基因表达
elisa标准曲线r方低原因
有可能是遗漏重要的变量，也有可能是变量之间的存在太强的线性相关性。很多时候，客户操作没有问题，标准曲线良好，但检测多次样本依然不在检测范围。像细胞因子，如IL-6需在炎症刺激情况才会大量产生，一般非炎症样本测值会非常低。针对这种测值比较低的情况，一般建议根据文献选取适合的样本类型，同时可以选用高灵敏
荧光定量pcr的标准曲线怎么做
采用相对法定量要求必须目的基因和内参具有相同的扩增效率,所以需要做efficiencycurve如果得到的斜率小于0.1,可以采用相对法,否则,需要重新设计能达到相同扩增效率的引物,或者就需要制作标准曲线,制作标准曲线,可以将基因片段克隆到质粒,然后体外转录成rna,定量以后合成cdna,然后按比例
原子吸收光谱分析法影响标准曲线线性关系的因素
影响火焰原子吸收光谱灵敏度的主要因素有仪器性能、溶液状态、火焰状态、元素性质、光源强度等。对于仪器，首先使用元素的纯标准溶液，在仪器的推荐条件下，确定其检测限，看它是否符合仪器的指标，在改变分析条件时，看它是否能得到较好的检测限
原子吸收光谱分析法影响标准曲线线性关系的因素
影响火焰原子吸收光谱灵敏度的主要因素有仪器性能、溶液状态、火焰状态、元素性质、光源强度等。对于仪器，首先使用元素的纯标准溶液，在仪器的推荐条件下，确定其检测限，看它是否符合仪器的指标，在改变分析条件时，看它是否能得到较好的检测限
荧光定量PCR标准曲线有几个梯度
相对定量 相对定量得到的结果为特定样本中目的基因相对于另一参照样本的量的变化。 在某些不需要对基因进行绝对定量，只需要确定基因相对表达差异的情况下，如某样品在经过某种处理后目的基因表达量是增加了还是减少了，用相对定量的方法就可以得到结果，相对定量是一种更普遍、更简单的方法。 内参基因 实
荧光定量PCR扩增曲线形状异常的原因
A.扩增效率过高 出现非特异扩增或引物二聚体：反应体系内模板浓度太高以及模板核酸质量较差，可能导致出现抑制PCR反应的现象。在绝对定量时表现扩增效率大于110%。 解决方案：去除模板浓度最高的反应孔并重新分析标准曲线；对目的基因做标准曲线，一般用质粒做梯度稀释，或用PCR产物做梯度稀释，
定量pcr没有扩增曲线是什么原因
一般扩增曲线是应该有的，如果没有：1、扩展失败，应调整反应条件和体系。建议：把你做的qPCR板不要丢了，拿去做一个普通凝胶电泳，看看有没有条带。2、荧光收集失败，软件是不是开始点错了，比如你是FAM荧光，你点成了别的荧光。
菌种的保存效果不佳的原因分析
1、可能是由于保存后未将保存液吸尽，反复冻融形成冰晶损伤菌株细胞，影响了菌株活性。2、确定所保存的菌种是否为对数生长期的菌种，我们建议普通菌种保存为18小时内的新鲜菌种，而霉菌需要待孢子出现后保存其孢子。
硫化物标准曲线线性不好的原因
主要原因还是硫化物不稳定造成的。根据我的经验，应该注意的地方如下：1、硫化钠标准使用液配制的时候，当加入乙酸锌-乙酸钠溶液后，溶液将出现混悬状态。在取用时应摇匀。有可能会造成移液管移液困难。2、显色时，加入的试剂含硫酸，应沿管壁徐徐加入，避免冲击太大。加完后立即闭塞。避免硫化氢的流逝。3、在整个过程
硫化物标准曲线线性不好的原因
主要原因还是硫化物不稳定造成的。根据我的经验，应该注意的地方如下：1、硫化钠标准使用液配制的时候，当加入乙酸锌-乙酸钠溶液后，溶液将出现混悬状态。在取用时应摇匀。有可能会造成移液管移液困难。2、显色时，加入的试剂含硫酸，应沿管壁徐徐加入，避免冲击太大。加完后立即闭塞。避免硫化氢的流逝。3、在整个过程
硫化物标准曲线线性不好的原因
主要原因还是硫化物不稳定造成的。根据我的经验，应该注意的地方如下：1、硫化钠标准使用液配制的时候，当加入乙酸锌-乙酸钠溶液后，溶液将出现混悬状态。在取用时应摇匀。有可能会造成移液管移液困难。2、显色时，加入的试剂含硫酸，应沿管壁徐徐加入，避免冲击太大。加完后立即闭塞。避免硫化氢的流逝。3、在整个过程
硫化物标准曲线线性不好的原因
主要原因还是硫化物不稳定造成的。根据我的经验，应该注意的地方如下：1、硫化钠标准使用液配制的时候，当加入乙酸锌-乙酸钠溶液后，溶液将出现混悬状态。在取用时应摇匀。有可能会造成移液管移液困难。2、显色时，加入的试剂含硫酸，应沿管壁徐徐加入，避免冲击太大。加完后立即闭塞。避免硫化氢的流逝。3、在整个过程
PCR疑难问题解答第二篇：荧光定量PCR（二）
在qPCR 技术中重要的参数指标有哪些？ 扩增及溶解曲线：扩增曲线是PCR过程中，以循环数为横坐标，以荧光强度为纵坐标所绘制的曲线。主要用于反映qPCR的动态进程；溶解曲线是用来验证扩增产物特异性的，如果产物是单一条带，溶解曲线就会出现单峰，如果有引物二聚体或其它非特
菌种的保存效果不佳的原因有哪些？
1、可能是由于保存后未将保存液吸尽，反复冻融形成冰晶损伤菌株细胞，影响了菌株活性。2、确定所保存的菌种是否为对数生长期的菌种，我们建议普通菌种保存为18小时内的新鲜菌种，而霉菌需要待孢子出现后保存其孢子。
rtpcr中没有溶解曲线的原因是什么
你设置溶解曲线那一步骤了吗？要是没设，当然不会起峰。可能由于你的引物根本没有把目的片段PCR出来，自然也就没有峰。
实时荧光定量pcr实验中扩增曲线末尾起跳的原因
末尾起跳原因：（1）阴参曲线末尾起跳，通常表示存在污染；（2）复检样本，排除非特异性扩增的可能性；（3）正常样本也可存在曲线末尾起跳，表示样本浓度低或者加样量不准确。解决方法：排除是否存在污染；复检样本，如果复检后曲线为阴性直线则说明之前的末尾起跳为非特异性扩增，如果复检后曲线仍与之前一致则说明末尾
浅析水产酶制剂使用效果不佳原因
1 应用技术方面的原因1.1 酶种选择不对 酶制剂是一种具有生物活性的添加剂，只有在适宜的条件下，它才能发挥出较强的活性。饲用酶制剂是在养殖动物体内发挥作用的，因此要有理想的效果就必须选择适合养殖动物消化道环境的酶制剂。而水产动物由于种类众多，消化生理结构差异较大，消化道的环境也不一样，在
pcr原始曲线和扩增曲线区别
扩增曲线可以粗略地判断扩增效率。SYBR Green的双delta Ct法要求目的基因和内参的扩增效率基本一致。如果不一致，需要对公式进行修正，部分qPCR仪的配套软件可以做到，直接输入每对引物的扩增效率。但无论如何，保证高扩增效率是实验成功的关键。如果扩增效率一致，不同Ct的曲线显示出来就基本是平
蛋白定量标准曲线r方值不准确原因
1、蛋白质的不同对测定结果的影响。当蛋白质不同，其包含的上述小基团含量发生变化时，就会影响蛋白质含量的测定。2、溶液中干扰物质的影响。蛋白质所包括的具有紫外吸收的小基团为常见基团，其产生紫外吸收的特异性并不强，一些高浓度的无机化合物也会对蛋白质的含量测定产生干扰。
PCR异常曲线解析
在PCR实验过程中，我们经常会遇到各种奇特的扩增曲线，如何正确解读这些曲线并且做出恰当的解决方案是我们一线实验者需要练就的基本功。今儿，小编将多年累积的功力编成“武功秘籍”奉上，助你PK掉那些令人犯晕的异常曲线。异常曲线1：PCR扩增抑制原因分析：H07存在扩增抑制解决方案：将样本稀释后进行扩增（抑
bca法制作的标准曲线点发生较大偏高的原因
BCA法是一种常用的蛋白质浓度检测方法，它通过比色反应测定样品中的蛋白质浓度。如果在BCA法制作标准曲线时出现了偏高的情况，可能有以下原因：标准品的配制不准确：在BCA法中，标准品的配制非常关键，如果标准品的浓度不准确，会导致标准曲线的点位偏高或者偏低。反应时间过长：在BCA法中，试剂的反应时间对结
氨氮吸光度测定标准曲线不是直线的原因
答案氨氮在水中的吸收光谱与其浓度之间并不是呈线性关系，因此氨氮吸光度测定标准曲线通常会发现不是直线。解释这是由于氨氮含量很低时，其光吸收效应较小，随着浓度的增加，它的光吸收效应变得更强。当浓度超过一定范围时，光吸收与浓度之间的关系会变得不稳定，使得标准曲线出现曲线趋势，而非直线。为了获得准确可靠的氨
实时荧光定量PCR结果分析，教你从菜鸟到高手
实时荧光定量PCR技术(Real-Time Quantitative PCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 在对荧光定量PCR结果进行分析时首先要了解几个概念： 基线（Baseline）指在PCR扩
cv循环性能曲线对比标准数据差很多原因
实验对象本身电容太小或导电性太差或是夹子碰到电解液等。数据对比标准数据差很多可能是因为一些外界原因，例如实验对象本身电容太小或导电性太差或是夹子碰到电解液等。