TUNEL检测出现标记效率低的原因

a. 使用乙醇或甲醇固定会导致标记的效率较低。b. 固定时间过长,导致交联程度过高。此时宜减少固定时间。c. 荧光淬灭。Fluorescence在普通光照10分钟就会严重淬灭。解决方法是需注意避光操作。d. 碘化丙啶双染时,如果碘化丙啶染色过深会导致观察到的本试剂盒的TUNEL染色效果减弱。碘化丙啶可以接受fluorescein激发产生的荧光,从而起到淬灭作用。解决方法是用较低浓度的碘化丙啶染色,例如0.5μg/ml碘化丙啶。......阅读全文

细胞凋亡检测实验——TUNEL法

实验方法原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶)的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下,过氧化物酶可产生很强的颜色反应,特异准确

出现黄疸的原因

正常人血清总胆红素1.7~20μmol/L(0.1~1.2mg/dl)。当各种原因导致血液中游离胆红素或结合胆红素升高时,可导致高胆红素血症。原因:胆红素生成过多。肝处理胆红素能力下降。胆红素的排泄受阻。显性黄疸:血清中胆红素浓度超过34.2μmol/L时,含有较多弹性蛋白的巩膜、黏膜及皮肤与胆红素

一步法TUNEL细胞凋亡检测技巧及常见问题分析

1. 对于贴壁细胞或细胞涂片: a. PBS或HBSS洗涤一次。b. 如果细胞贴得不牢,可以干燥样品使细胞贴得更牢。c. 用碧云天生产的免疫染色固定液或4%多聚甲醛固定细胞30分钟。d. 用PBS或HBSS洗涤一次。e. 加入碧云天生产的免疫染色强力通透液或含0.3% Triton X-100的PB

粉尘检测仪的出现,大大提升了工作效率

  在当下工业生产环境中,粉尘检测仪是作为环境检测的一个必要设备,越来越多被应用在工业生产之中。在我们使用粉尘检测仪产品之前,首先要了解产品的工作原理,才能更好地选购适合自己的。  市面上大多数粉尘检测仪都是只要安装在收尘器或者布袋除尘器上就可以工作,无需校准和其他设置,使用非常简单。安装在烟气管道

造成HBsAg检测出现假阳性的几种原因

造成HBsAg检测出现假阳性的原因可能会有以下几种:  1. 待测标本溶血或含有血细胞。  2. 待测标本长菌或其它原因混浊。  3. 洗板时洗涤液溢出,污染其它孔。  4. 洗板机内部管道有真菌生长。  5. 洗板机设置不当。  6. 手工洗板时,拍干用纸未更换。  7. 实验中,实际孵育时间过长

TUNEL检测的基本原理介绍

  细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transfe

引起钾低的原因

  引起钾低中最常见原因为地方性甲状腺肿,伴甲状腺功能减退症。随着生活水平提高,此类病人逐渐减少。目前引起甲低常见病因有桥本甲状腺炎,是由于淋巴细胞逐渐代替甲状腺细胞,使甲状腺激素合成、分泌没有场所而导致的甲减。  还可见于核素碘-131治疗,由于核素杀伤了一部分甲状腺细胞,使甲状腺激素的合成、分泌

COD检测出现负值,是什么原因

COD检测出现负值一般有如下几个原因:1.水样和空白做混了,区分下水样和空白再做。2.水样COD很低,超出了试剂量程下限。3.消解用的消解管/比色皿不干净,需要在试验前清洗干净。4.操作误差,比色时消解管未完全放至底部。5.仪器故障,建议仪器校准或返厂维修。

TUNEL分析实验——组织切片的-TUNEL-染色

实验材料组织试剂、试剂盒甲醛NaOHPBS二甲苯乙醇蛋白酶 KTris-HCl 溶液仪器、耗材Parafilm 膜实验步骤1. 取下组织,立即用新制备的 4% 甲醛固定,室温过夜。用多聚甲醛制备 4% 的甲醛溶液,在 100 ml 水中加 8 g 多聚甲醛,在通风橱中加热至 50~60℃,加几滴 1

罗氏TUNEL细胞凋亡检测程序

一、 原理:TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的 dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,

出现负峰的原因

有可能是你们的流动相用的甲醇不好,甲醇里有强紫外吸收物质,所以会有负峰有时流动相与配样溶剂不一样也会引起负峰流动相和样品的溶剂不一样,样品中的杂质没有紫处吸收或吸收很小,而流动相紫外吸收大,如用甲醇时波长设定在220nm以下时,常出现这种现象.

低电阻检测仪故障原因及排除方法

  回路电阻测试仪的详细介绍按新《电力设备交接和预防性试验规程》要求,各种开关设备导电回路电阻的测量,其测试电流不得小于100A。对此我厂按新规程要求设计开发出新一代智能回路电阻测试仪产品,该产品适用于测试高低压开关的主触头接触电阻值,高低压电缆线路的直流电阻值等。    1.现象:回路电阻测试仪

低电阻检测仪故障原因及排除方法

  回路电阻测试仪的详细介绍按新《电力设备交接和预防性试验规程》要求,各种开关设备导电回路电阻的测量,其测试电流不得小于100A。对此我厂按新规程要求设计开发出新一代智能回路电阻测试仪产品,该产品适用于测试高低压开关的主触头接触电阻值,高低压电缆线路的直流电阻值等。    1.现象:回路电阻测试仪

食品检测技术培养基出现沉淀的原因

  一、称量错误  天平称量不准确、计算称量错误导致配制培养基的浓度不正确,都有可能导致岀现部分沉淀。  二、水质不佳  多数培养基的制备需要使用纯化水、去离子水配制,而天然水中含有含有较多的矿物盐离子,若错误的使用了自来水,矿泉水配制,或使用的纯化水离子未除净,都有可能导致培养基灭菌后岀现浑浊现象

尿液分析仪检测出现假阳性的原因

 假阳性。即尿液分析仪潜血反应阳性,镜检阴性,其常见原因有:  (1)血红蛋白(Hb) 尿液分析仪潜血反应既能与完整的RBC发生阳性反应,也可与RBC溶解释放的Hb发生阳性反应,而显微镜只能检出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量极微,定性为阴性。疾病时,尿中Hb有两个来源:一是发生血管内溶血,血

TUNEL分析实验——贴壁细胞的-TUNEL-染色

实验材料细胞试剂、试剂盒PBSTdT 反应混合液仪器、耗材Parafilm 膜实验步骤1. 用无菌镊子将一无菌盖玻片放入 35 mm 培养皿中。2. 将大约 1X104 细胞接种于无菌盖玻片上,培养 24~48 小时。凋亡诱导时,细胞铺满不超过 80%。如细胞贴壁不太好,可以用纤连蛋白、聚赖氨酸或血

哪些原因可致HBsAg检测出现假阳性?

哪些原因可致HBsAg检测出现假阳性?:乙型肝炎病毒HBsAg检测假阳性原因分析目前国内临床多采用ELISA 法检测乙型肝炎血清标志物,它以免疫学反应为基础,将抗原抗体的特异性反应与www.med126.com酶对底物的高效催化作用相结合,通过洗涤除去多余游离反应物,以保证实验结果特异性和稳定性,但

hoechst-和tunel法检测细胞凋亡的区别

hoechst法看凋亡,主要是看sub-G1期的细胞数量。原理就是凋亡的细胞,由于DNA正在降解,所以含量比正常细胞要少。在以PI荧光强度(代表DNA量)为横坐标的柱状图上,一般会有2个峰,G1和G2,G1就是正常细胞,G2是正在分裂的2倍体。2者间是S期细胞。如果有凋亡的细胞,在G1前会有细胞出现

代谢性低钾的原因

  1.钾摄入减少一般饮食含钾都比较丰富。故只要能正常进食,机体就不致缺钾。消化道梗阻、昏迷、手术后较长时间禁食的患者,不能进食。如果给这些患者静脉内输入营养时没有同时补钾或补钾不够,就可导致缺钾和低钾血症。然而,如果摄入不足是唯一原因,则在一定时间内缺钾程度可以因为肾的保钾功能而不十分严重。当钾摄

原位末端标记技术检测细胞凋亡的介绍

  细胞凋亡时,DNA 断裂早于形态学改变及DNA 含量减少,原位末端标记( ISEL) 是将渗入到凋亡细胞中的外源性核苷酸在酶和DNA 的催化下与凋亡细胞因内源性核酸酶的激活而产生的单股或双股断裂相结合,较前述方面具更高灵敏性。通常有两种方法:  ①DNA 聚合酶I 或klenow 大片段介导的单

关于细胞凋亡检测—原位末端标记技术的基本介绍

  细胞凋亡时,DNA 断裂早于形态学改变及DNA 含量减少,原位末端标记( ISEL) 是将渗入到凋亡细胞中的外源性核苷酸在酶和DNA 的催化下与凋亡细胞因内源性核酸酶的激活而产生的单股或双股断裂相结合,较前述方面具更高灵敏性。通常有两种方法: ①DNA 聚合酶I 或klenow 大片段介导的单位

TUNEL-assay

PROTOCOL:•Deparaffinize and rehydrate slides:3 x 3´ Xylene3 x 2´ 100% ethanol1 x 2´ 95%, 80%, 70% ethanol (each)1 x 5´ 1x PBS•Microwave antigen retrie

TUNEL-labeling

In Situ Cell Death (Apoptosis) Detection by TUNEL labelingby Boehringer Mannheim (Catalog No. 1684809), modified by Josiah N. Wilcox andJosé C. Rodrig

TUNEL-方法

Terminal deoxynucleotidyl Transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) is an in situ method for detecting the 3'-OH ends of DNA exposed dur

三种流式方法检测细胞凋亡

一、检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点1、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相关

细胞凋亡的三种流式检测方法

一、检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点:1、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相

细胞凋亡的检测方法

(一) 测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜 的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。(二) 用价值流式细胞仪检测有下列特点:(1)检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比

细胞凋亡的检测方法

(一)   测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。(二)   用价值流式细胞仪检测有下列特点:(1)检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡

罗氏公司TUNEL细胞凋亡检测程序

(In situ cell death detection kit-POD法)一、 原理:TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的dU

过滤效率不达标的原因

  熔喷无纺布本身的过滤性能其实只有70%以下的,纯粹靠熔喷超细纤维的纤维细、空隙小、孔隙率高的纤维三维集合体的机械阻挡作用是不够的。不然,一味增加材料克重厚度反而会大大增加过滤阻力。所以熔喷过滤材料普遍都是会通过静电驻极的工艺对熔喷布进行添加静电电荷效应,利用静电的方法提升过滤效率,可以达到99.