相差显微镜的基本原理
相差显微镜是一种将光线通过透明标本细节时所产生的光程差(即相位差)转化为光强差的特种显微镜。光线通过比较透明的标本时,光的波长(颜色)和振幅(亮度)都没有明显的变化。因此,用普通光学显微镜观察未经染色的标本(如活的细胞)时,其形态和内部结构往往难以分辨。然而,由于细胞各部分的折射率和厚度的不同,光线通过这种标本时,直射光和衍射光的光程就会有差别。随着光程的增加或减少,加快或落后的光波的相位会发生改变(产生相位差)。光的相位差人的肉眼感觉不到,但相差显微镜能通过其特殊装置——环状光阑和相板,利用光的干涉现象,将光的相位差转变为人眼可以察觉的振幅差(明暗差),从而使原来透明的物体表现出明显的明暗差异,对比度增强,使我们能比较清楚的观察到普通光学显微镜和暗视野显微镜下都看不到或看不清的活细胞及细胞内的某些细微结构。相差显微镜的成像原理: 镜检时光源只能通过环状光阑的透明环,经聚光器后聚成光束,这束光线通过被检物体时,因各部分的光程不同......阅读全文
包涵体蛋白质的溶解及复性实验
基本方案 实验方法原理 包涵体形成的原因比较复杂,至今尚不完全清楚。研究表明它的形成并非由于表达蛋白浓度超过溶解度造成的,链内二硫键的错配也不是它形成的主要原
涨知识|徕卡显微镜的七种观察方式之四
4、像差观察(Phasecontrast) 在光学显微镜的发展过程中,相差镜检术的发明成功,是近代显微镜技术中的重要成就。我们知道,人眼只能区分光波的波长(颜色)和振幅(亮度),对于无色透明的生物标本,当光线通过时,波长和振幅变化不大,在明场观察时难观察到标本。 相差观察:相差显微镜利用被检
几种特殊显微镜的应用
1.荧光显微镜(fluorescencemicroscope)是用来观察标本中的自发荧光物质或以荧光素染色或标记的细胞和结构。荧光显微镜是以高压汞灯产生的短波紫外线为光源,并配有激发、阻断、吸热和吸收紫外线等滤片系统,标本中的荧光物质在紫外线激发下产生各种颜色的荧光,借以研究该荧光物质在细胞和组织
微生物液体培养实验——细菌培养的检测
实验材料细菌仪器、耗材显微镜玻片盖玻片滴管实验步骤一、利用计数板检测 1. 用一片干净的盖玻片盖住一片干净的计数玻片或者petraff-Hausser小室,参见下面。 2. 用含少量培养液的吸管接触盖玻片的边缘。 3. 在相差显微镜400倍下观察,并且按一个小方块中所见的每个细菌大约相当于2x
酵母细胞的观察实验
酵母细胞的直径大约 5 pm,它们的很多重要特征在光学显微镜下都能够观察到。在实验室中,最好定期在相差显微镜下观察酵母培养物,以掌握细胞的生理状态以及污染情况。很多现代酵母细胞生物学研究采用复杂检测方法,用蛋白质特异抗体或特异结合某些细胞器的荧光染料对酵母细胞染色,近来,开始使用绿色荧光蛋白(G
消除微生物污染
实验方法原理通过冲洗单层培养物或通过离心重悬非贴壁细胞,以高浓度抗生素清洗培养物数次,然后将培养物传代,用加抗生素的培养基传三次,再用不加抗生素的培养基传三次,每次传代后都要检测是否污染。实验材料DBSS
标本放置时间对尿有形成分分析仪检测尿液红细胞的影响
尿液有形成分检查是最常用的尿液常规检查项目之一。UF-100流式尿液有形成分分析仪除能计数RBC、WBC数量外,还能给出红细胞均一型、非均一型和混合型等实用信息,对沁尿系统疾病的诊断、鉴别血尿来源具有重要临床应用价值。但普遍存在的现状是尿液从采集到用UF-100检测,往往需要3-4h,甚至更长,我们
消除微生物污染
实验方法原理通过冲洗单层培养物或通过离心重悬非贴壁细胞,以高浓度抗生素清洗培养物数次,然后将培养物传代,用加抗生素的培养基传三次,再用不加抗生素的培养基传三次,每次传代后都要检测是否污染。实验材料DBSS试剂、试剂盒高浓度抗生素培养液仪器、耗材用于传代培养的材料带有40×或60×物镜的相差显微镜用于
玻底培养皿的特点和使用方法
玻底培养皿使用专门的模具生产,产品在一致性和使用便利上均超过同类进口产品。玻底培养皿使用高透明度的USP class VI 聚苯乙烯为原料制成。产品表面经过特殊处理,适合贴壁细胞的培养。产品在无尘车间中生产,保证洁净度。玻底培养皿应用的显微镜领域一般包括:共聚焦显微镜,高分辨率显微镜,荧光成像,
标本放置时间对尿有形成分分析仪检测尿液红细胞的影响
尿液有形成分检查是最常用的尿液常规检查项目之一。UF-100流式尿液有形成分分析仪除能计数RBC、WBC数量外,还能给出红细胞均一型、非均一型和混合型等实用信息,对沁尿系统疾病的诊断、鉴别血尿来源具有重要临床应用价值。但普遍存在的现状是尿液从采集到用UF-100检测,往往需要3-4h,甚至更长,我
消除微生物污染
实验方法原理 通过冲洗单层培养物或通过离心重悬非贴壁细胞,以高浓度抗生素清洗培养物数次,然后将培养物传代,用加抗生素的培养基传三次,再用不加抗生素的培养基传三次,每次传代后都要检测是否污染。实验材料 DBSS试剂、试剂盒 高浓度抗生素培养液仪器、耗材 用于传代培养的材料带有40×或60×物镜的相差显
按光学原理可分为偏光、相衬和微差干涉对比显微镜
按光学原理可分为偏光、相衬和微差干涉对比显微镜等1、偏光显微镜是鉴定物质细微结构光学性质的一种显微镜。凡具有双折射性的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而必须利用偏光显微镜。主要用于研究透明与不透明各向异性材料。一般具有双折射的物质都可以用这种显
尿红细胞形态检查及意义
尿红细胞增加(血尿)是一个危险的信号,可能是泌尿系统恶性肿瘤的唯一临床表现。因此,对血尿患者必须及早诊断其基础疾病。而血尿的诊断首先要鉴别其是肾小球性血尿,还是非肾小球性血尿。肾小球性血尿常见于各种原发性或继发性肾小球肾炎,非肾小球性血尿则常见于肾结石、肾肿瘤等。如果是肾小球性血尿,我们需要做有关
尿红细胞形态及其临床意义
尿红细胞增加(血尿)是一个危险的信号,可能是泌尿系统恶性肿瘤的唯一临床表现。因此,对血尿患者必须及早诊断其基础疾病。而血尿的诊断首先要鉴别其是肾小球性血尿,还是非肾小球性血尿。肾小球性血尿常见于各种原发性或继发性肾小球肾炎,非肾小球性血尿则常见于肾结石、肾肿瘤等。如果是肾小球性血尿,我们需要做有关检
检查隐匿性肾炎的方式介绍
本病因为主要表现为尿检异常,所以主要检查方式为尿常规及尿沉渣,尿常规化验常见轻度蛋白尿或见镜下血尿,或二者同时出现,大多数患者肾功能检查结果正常。鉴别肾小球及肾小管性蛋白尿可行尿蛋白SDS-PAGE电泳,肾小球性蛋白尿中常呈现中、大分子蛋白尿,而肾小管主要为小分子蛋白尿。 以持续性间断镜下血尿
酵母细胞的观察实验
酵母细胞的直径大约 5 pm,它们的很多重要特征在光学显微镜下都能够观察到。 在实验室中,最好定期在相差显微镜下观察酵母培养物,以掌握细胞的生理状态以及污染情况。很多现代酵母细胞生物学研究采用复杂检测方法,用蛋白质特异抗体或特异结合某些细胞器的荧光染料对酵母细胞染色,近来,开始使用绿色荧光蛋白(GF
简述肾小球肾炎的相关检查
1、尿液 通过尿常规可用于初步观察尿蛋白、潜血、白细胞、管型、细菌、酸碱度和比重等。尿相差显微镜观察红细胞的形态,用于观察血尿是否来源于肾脏。24小时尿蛋白定量有助于判断蛋白尿的多少。 2、血液 一般包括血常规,血生化,肌酐清除率;其他包括感染、肿瘤和免疫方面有助于辅助诊断的各项检验。
支原体的检测
实验材料 细胞仪器、耗材 培养瓶载物片盖片显微镜实验步骤 1. 标本制备用尖镊子从培养瓶中直接取出预先置入的支持物(长形盖片;24 小时前置入),令细胞面向上,置放在载物片上,再覆以24 mmX 36 mm的较大盖片;如不用支持物培养法,也可取少许培养液滴在载物片上,再覆以盖片法观察亦可。2.
将大片段插入-DNA-导入哺乳动物细胞和胚胎实验
基本方案1 通过质体融合将完整的 YAC 导入哺乳动物细胞 基本方案2 将细菌人工染色体(BAC或PAC)引入到哺乳动物细胞和小鼠胚胎中
从人关节软骨中分离软骨祖细胞
试剂和材料: 1.骨关节炎患者行膝盖关节半切开手术时未累及的部分; 2.链霉蛋白酶消化培养基:DMEM/F12(1:1)、5%的F、抗坏血酸 50μg/ml、葡萄糖 1mg/ml、庆大霉素(50mg/ml),0.2%(终浓度100μg/ml)、链霉蛋白酶 70U/ml、HEPES 10mmo
蛋白质的短暂表达实验
实验材料载体试剂、试剂盒牛血清DMEM葡聚糖PBSDMSOEDTA仪器、耗材培养皿培养箱相差显微镜离心机实验步骤1. 将目的基因亚克隆至合适的载体中得到所需的重组DNA,用小量法(5 ml 培养物)或用CsCl/溴化乙锭离心法纯化重组DNA。2. 将在DMEM-10 CS中生长汇片的COS-7细
蛋白质的短暂表达实验
实验材料 载体试剂、试剂盒 牛血清DMEM葡聚糖PBSDMSOEDTA仪器、耗材 培养皿培养箱相差显微镜离心机实验步骤1. 将目的基因亚克隆至合适的载体中得到所需的重组DNA,用小量法(5 ml 培养物)或用CsCl/溴化乙锭离心法纯化重组DNA。2. 将在DMEM-10 CS中生长汇片的COS
多毛细胞白血病的简介
本病系一种特殊类型的慢性B淋巴细胞白血病。患者表现有贫血、发热、脾肿大,外周血细胞往往减少。诊断本病的主要依据是在外周血或骨髓中见到有特征性的多毛细胞。细胞胞浆周边不规则,呈锯齿状或伪足状突起,有时为细长毛发状伸出。相差显微镜及扫描电镜检查是辨认毛细胞的重要手段。酸性磷酸酶染色阳性且不被左旋酒石
实验诊断毛细胞白血病的血象特点
约2/3的患者有中重度全血细胞减少,血细胞比容20%~35%;轻中度血小板减少常见,但诊断时血小板10×109/L,极少数超过200×109/L;淋巴细胞比例显著增高,但毛细胞的比例变化较大:低白细胞者可少于淋巴细胞的20%,白细胞>10×109/L的患者毛细胞可以是主要成分。毛细胞直径10~25μ
甘油梯度法染色实验
实验材料:染色质试剂、试剂盒:甘油、染色质、分离缓冲液溶液仪器、耗材:JS-13 转桶式转头实验步骤:准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%(v/v)甘油/染色质分离缓冲液溶液。2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃,1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度
染色体分离实验——甘油梯度法
实验材料染色质试剂、试剂盒甘油 染色质分离缓冲液溶液仪器、耗材JS-13 转桶式转头实验步骤1. 准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%(v/v)甘油/染色质分离缓冲液溶液。2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃,1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度沉降
显微技术(图)
显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。—、光学显微镜(一)、普通光学显微镜普通生物显微镜由3部分构成,即:①照明系统,包括光源和聚光器;②光学放大系统,由物镜和目镜组成,是显微镜的主体,为了消除
光学显微镜观察镜检几种方式介绍
在光学显微镜的发展过程中,相差镜检术的发明成功,是近代显微镜技术中的重要成就.我们知道,人眼只能区分光波的波长(颜色)和振幅(亮度),对于无色通明的生物标本,当光线通过时,波长和振幅变化不大,在明场观察时很难观察到标本. 相差显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检,也就是有效地利用光的干涉现象,将
蛋白质的短暂表达实验
基本方案 实验材料 载体 试剂、试剂盒
蛋白质的短暂表达实验
基本方案 实验材料 载体 试剂、试剂盒