染色体分离实验——甘油梯度法
实验材料染色质试剂、试剂盒甘油 染色质分离缓冲液溶液仪器、耗材JS-13 转桶式转头实验步骤1. 准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色质分离缓冲液溶液。2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃，1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度沉降。3. 以 3 ml —份收集梯度顶部组分。4. 每一组分固定少量样品（10~20 ml）于载玻片上，用相差显微镜观察确定含染色体的组分。5. 收集含有纯化的染色体的样品。6. 制备得到的样品用 JA-20 转头在 4℃，5000 r/min 离心 15 分钟以除去其中的甘油，用分离缓冲液重悬浮染色体沉淀。展开......阅读全文
染色体分离实验——甘油梯度法
实验材料染色质试剂、试剂盒甘油 染色质分离缓冲液溶液仪器、耗材JS-13 转桶式转头实验步骤1. 准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色质分离缓冲液溶液。2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃，1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度沉降
染色体分离实验——Percoll梯度法
实验材料染色质试剂、试剂盒精胺精咪Percoll 溶液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，匀浆分离得到的染色质。Percoll 溶液：
染色体分离实验——蔗糖梯度纯化法
实验材料染色质粗品试剂、试剂盒蔗糖分离缓冲液仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 准备两种 18ml，浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液（聚胺，水相或己二醇法的缓冲液），然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品溶液轻轻
甘油梯度法染色实验
实验材料：染色质试剂、试剂盒：甘油、染色质、分离缓冲液溶液仪器、耗材：JS-13 转桶式转头实验步骤：准备 5 份 6 ml 的 10%、20%、30%、40%、50%（v/v）甘油/染色质分离缓冲液溶液。2. 用 JS-13 转桶式转头在 4℃，1000 r/min 离心 50 分钟进行染色质梯度
染色体分离实验—水相法分离染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒水相裂解缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤1. 像聚胺法的第 1、2 步中讲的那样诱导悬浮或单层培养细胞的中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃，1000 g 离心 10 分钟然后重悬浮，典型的制备量为 10 ml 新鲜培养基含 108 个细胞。3. 将浓的细胞悬液在冰上放置至少 30
染色体分离实验——聚胺法分离染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒秋水仙胺聚胺缓冲液实验步骤有丝分裂中细胞的同步化1. 37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的浓度加入秋水仙胺。收获细胞并在聚胺缓冲液中裂解3. 收获细胞。对于悬浮培养
抗药性突变株的分离实验——梯度平板法
实验方法原理生物的抗药性突变是 DNA 分子的某一特定位置的结构改变所致，与药物的存在无关，某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段，而不是作为引发突变的诱导物，因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体，极个别抗性突变的细胞会在平板上长成菌落。将这些菌落挑取纯化，进一步进行
线粒体分离实验—用蔗糖密度梯度法纯化线粒体
实验材料线粒体悬液试剂、试剂盒蔗糖溶液Tris-HClEDTA仪器、耗材Bockman SW28 号转头实验步骤1. 在用于 Bockman SW28 号转头（或与其等同的产品）的 Uitradear 离心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一层 15 ml 1.5 mol
密度梯度细胞分离法
实验方法原理 制备密度梯度液，通过密度梯度液离心细胞，收集各梯度组分，用培养基稀释，培养细胞。实验材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶仪器、耗材 生长培养基生长培养基+20% Percoll25ml离心管注射器或梯度收集器24孔培养板折光仪或密度计低速离心机实验步骤 通过下述方法之一制备密度梯度液：(
密度梯度细胞分离法
实验方法原理 制备密度梯度液，通过密度梯度液离心细胞，收集各梯度组分，用培养基稀释，培养细胞。 实验材料 细胞样品
密度梯度细胞分离法
实验方法原理制备密度梯度液，通过密度梯度液离心细胞，收集各梯度组分，用培养基稀释，培养细胞。实验材料细胞样品试剂、试剂盒D-PBS0.25%胰蛋白酶仪器、耗材生长培养基生长培养基+20% Percoll25ml离心管注射器或梯度收集器24孔培养板折光仪或密度计低速离心机实验步骤通过下述方法之一制备密
密度梯度细胞分离法
实验方法原理 制备密度梯度液，通过密度梯度液离心细胞，收集各梯度组分，用培养基稀释，培养细胞。 实验材料 细胞样品
染色体分离实验
聚胺法分离染色质 水相法分离染色质 用己二醇法分离中期染色质 蔗糖梯度纯化法 Percoll梯度法 甘油梯度法
Percoll梯度法染色实验
实验材料：染色质试剂、试剂盒：精胺、精咪、Percoll、溶液仪器、耗材：聚碳酸酯离心管实验步骤：1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。2. 加入 10 ml Percoll 溶液，匀浆分离得到的染色质。Perco
蔗糖梯度纯化法实验
实验材料：染色质粗品试剂、试剂盒：聚碳酸酯离心管仪器、耗材：Dounce 匀浆器实验步骤：准备两种 18ml，浓度分别为 20% 和 60% 的蔗糖分离缓冲液（聚胺，水相或己二醇法的缓冲液），然后以线性形式加到一 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用梯度生成器形成沿离心管的密度梯度。2. 将染色质粗品
密度梯度分离法分离单个核细胞（MNCs）
试剂和材料：1. 合适的培养基或冷冻液；2. PBSA；3. Ficoll-Hypague；4. 巴氏吸管；5. 50ml离心管；实验方法：1. 将脐血样品用PBSA按1：1比例稀释；2. 将15ml Ficoll-Hypague吸入50ml离心管；3. 将30mlPBSA稀释的脐血样品缓慢地加到F
染色体分离实验——用己二醇法分离中期染色质
实验材料细胞试剂、试剂盒己二醇缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 按聚胺法第 1 和 2 步中所述诱导 500 ml 悬浮或单层培养细胞为中期阻遏状态。2. 细胞在 4℃ 1000 r/min 离心 10 分钟，用 10 ml 培养基重悬浮。3. 将重悬浮的细胞冷却至 4℃ 放置 20
通过甘油分级梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。实验材料 λ 噬菌体颗粒悬浮液试剂、试剂盒 EDTA甘油SM胰 DNase Ⅰ仪器、耗材 Beckman SW41 或 SW28 转子或相当型号离心管实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液E
通过甘油分级梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。 实验材料 λ 噬菌体颗粒悬浮液
通过甘油分级梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。实验材料λ 噬菌体颗粒悬浮液试剂、试剂盒ED
离心技术在使用Metrizamide梯度分离染色体中的应用
本文讲述使用Metrizamide梯度分离染色体的方法和步骤。1. 细胞系和组织培养。中国仓鼠卵巢（CHO）和Hela细胞系在McCoy’s培养基中补加10%胎牛血清培养，用碳酸氢盐缓冲系统，需要5%CO2。2. 细胞同步化。为了在收获时有更多的有丝分裂细胞，用0.
【锐赛小课题】染色体分离实验
一、聚胺法分离染色质 试剂、试剂盒：秋水仙胺、聚胺缓冲液 实验步骤： 有丝分裂中细胞的同步化 1. 37℃，用合适的含有 FCS，抗生素和其他必要成分的培养基培养细胞。 2. 收集有丝分裂细胞前 10~16 小时在培养基中以 0.06 μg/ml 的
分离核仁实验——高镁法分离核仁
实验材料细胞试剂、试剂盒Dulbecco’s 盐溶液蔗糖核仁保存液仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液Dulbecco’s 盐溶液：0.136 mol/L NaCl2.6 mmol/L KCl8 mmol/L Na2HPO41.4 mmol/L KH2PO4，pH 7.0蔗糖 A
乙酸丙酮法血清甘油三酯测定实验
实验方法原理 本法用异丙醇抽提血清TG，氧化铝吸附磷脂及游离甘油氢氧化钾皂化，过碘酸钠氧化生成甲醛，甲醛与乙酸丙酮在氨离子存在下加热生成黄色的 3，5二乙酰-1，4二甲基吡啶〔Hantgsch止反应）显色程度与标本中TG浓度成正比。实验步骤 一、实验试剂：1. 异丙醇（分析试剂）2. 氧化铝（中性、
乙酸丙酮法血清甘油三酯测定实验
实验方法原理本法用异丙醇抽提血清TG，氧化铝吸附磷脂及游离甘油氢氧化钾皂化，过碘酸钠氧化生成甲醛，甲醛与乙酸丙酮在氨离子存在下加热生成黄色的 3，5二乙酰-1，4二甲基吡啶〔Hantgsch止反应）显色程度与标本中TG浓度成正比。实验步骤一、实验试剂：1. 异丙醇（分析试剂）2. 氧化铝（中性、层分
PH梯度萃取分离及柱色谱分离原理
pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段.其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态（游离型或解离型）,从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数.如混合黄酮苷元,由于结构中酚羟基的数目和位置不同,...
培养细胞染色体显示法实验
实验方法原理 培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点，是制备染色体极好的对象。实验材料 细胞试剂、试剂盒 HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材 酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤 1. 培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %～90 %汇合单层培养细胞；
小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞
PriCells-小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞 基本原理活细胞（密度较小）和死细胞（密度较大）密度不同，从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。 附加材料高密度溶液：Ficoll-Paque（Ficoll和泛影酸钠；Pharmacia LKB）或Lympholyte-M（Cedarlane）
什么叫PH梯度萃取分离
PH梯度萃取分离就是根据不同物质在不同PH下析出沉淀的原理来提纯所需物质pH梯度萃取法是分离酸性、碱性、两性成分常用的手段。其原理是由于溶剂系统 pH变化改变了它们的存在状态（游离型或解离型），从而改变了它们在溶剂系统中的分配系数。如混合黄酮苷元，由于结构中酚羟基的数目和位置不同，各自所呈酸性强弱不