相差显微镜的基本原理
相差显微镜是一种将光线通过透明标本细节时所产生的光程差(即相位差)转化为光强差的特种显微镜。光线通过比较透明的标本时,光的波长(颜色)和振幅(亮度)都没有明显的变化。因此,用普通光学显微镜观察未经染色的标本(如活的细胞)时,其形态和内部结构往往难以分辨。然而,由于细胞各部分的折射率和厚度的不同,光线通过这种标本时,直射光和衍射光的光程就会有差别。随着光程的增加或减少,加快或落后的光波的相位会发生改变(产生相位差)。光的相位差人的肉眼感觉不到,但相差显微镜能通过其特殊装置——环状光阑和相板,利用光的干涉现象,将光的相位差转变为人眼可以察觉的振幅差(明暗差),从而使原来透明的物体表现出明显的明暗差异,对比度增强,使我们能比较清楚的观察到普通光学显微镜和暗视野显微镜下都看不到或看不清的活细胞及细胞内的某些细微结构。相差显微镜的成像原理: 镜检时光源只能通过环状光阑的透明环,经聚光器后聚成光束,这束光线通过被检物体时,因各部分的光程不同......阅读全文
细胞生长曲线实验
实验方法原理 细胞生长曲线是观察细胞生长基本规律的重要方法。只有具备自身稳定生长特性的细胞才适合在观察细胞生长变化的实验中应用。因而在细胞系细胞和非建系细胞生长特性观察中,生长曲线的测定是最为基本的指标。细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。实验材料 细胞试剂、试剂盒 D-Hanks液牛血清R
光学显微镜由哪些部分构成
普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。机械部分的作用是外部帮助固定和调节,照明部分的作用是在镜台下方帮助呈像,光学部分的作用是根据需要观察使用。机械部分包括(1)镜座(2)镜柱 (3)镜臂(4)镜筒(5)物镜转换器(旋转器)(6)镜台(载物台)(7)调节器。机械部分的作用
临床常用的细菌检验技术
细菌的培养和分离技术微生物分离鉴定流程第一节 细菌的形态学检查工具:显微镜显微镜检查的目的:1.镜检可以了解标本中有无细菌及大致的菌量2.根据细菌形态、排列和染色性有助于对标本中的病原菌进行初步诊断,对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考意义方法:包括不染色标本检查法和染色标本检查法常用的显微镜(1)
细胞破碎和蛋白质溶解实验
实验方法原理 通过固体剪切力破碎组织和细胞,释放蛋白进入溶液。市售的匀浆器主要有四类,刀片式组织破碎匀浆器、内切式组织匀浆器、玻璃匀浆器和用于规模生产的髙压匀浆器。玻璃匀浆器的匀浆头(杵)有玻璃制的,也有特夫隆制的,既可以手动也可以电动。由于匀浆过程中蛋白质被蛋白酶降解的可能性较小,所以匀浆是简便、
染色体显带实验_显Q带法
实验方法原理染色体显带是沿着整个染色体的长轴,能显现出着色深浅不同、横向走行的带(Band)。显带原理尚未完全弄清,从多种方法证实,染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。因用相差显微镜观察未染色的染色体时,也能直接观察到染色体存在着带的现象。但用特殊方法处理后,再用染料染色,则带更加清楚。随显带
常用原代动物细胞培养:肝星状细胞培养材料和方法
材料 相差显微镜,荧光显微镜,手术器械,雄性SD大鼠,体重250-450 g,戊巴比妥钠,200目尼龙网,小牛血清(或胎牛血清,则更好),DMEM,胰酶消化液(以HBSS配),Nycodenz(以GBSS配),D- Hanks'(KCl 0.4 g/L,KH2PO4 0.06 g
线粒体分离实验
从组织培养细胞中分离线粒体 从组织中分离线粒体 用蔗糖密度梯度法纯化线粒体 实验材料 细胞
人脐静脉内皮细胞的形态学观察和鉴定方法
人脐静脉内皮细胞爬片准备:细胞换液后直接在倒置显微镜下观察细胞的形态及生长特征,并作相差摄影,同时进行常规HE染色观察并摄片。鉴定采用DAB免疫组织化学法,在6孔培养板中放置载玻片,在玻片上植入2ml含有1×106的细胞悬液,待细胞贴壁后,取出载玻片,放入-20℃的冷丙酮中固定30min,用PBS冲
染色体显带实验
实验方法原理 染色体显带是沿着整个染色体的长轴,能显现出着色深浅不同、横向走行的带(Band)。显带原理尚未完全弄清,从多种方法证实,染色体显带现象是染色体本身存在着带的结构。因用相差显微镜观察未染色的染色体时,也能直接观察到染色体存在着带的现象。但用特殊方法处理后,再用染料染色,则带更加清楚。随显
光学细胞生物显微镜
显微镜是观察细胞世界的重要工具,没有它也就没有细胞学及今天的细胞生物学。显微镜的研制,是从15世纪开始并逐渐发展起来。zui早的显微镜是荷兰眼镜商詹森父子在简单的放大镜的基础上设计出来的,是放大10倍的原始显微镜,其技术性能也比较简单。半个多世纪后,英国物理学家胡克创制了*架具有科学研究价值的复
细菌的物理性状
1.光学性质 细菌为半透明体。当光线照射至细菌,部分被吸收,部分被折射,故细菌悬液呈混浊状态。菌数越多浊度越大,使用比浊法或分光光度计可以粗略地估计细菌的数量。由于细菌具有这种光学性质,可用相差显微镜观察其形态和结构。2.表面积 细菌体积微小,相对表面积大,有利于同外界进行物质交换。如葡萄球菌直径约
FISH-技术基本实验
实验方法原理试剂、试剂盒70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液(PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材水浴锅增湿器玻片实验步骤一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%,如果房间湿度计显示低于45%,则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±2℃,在
FISH-技术基本实验
实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇SSC磷酸盐缓冲溶液(PBS)Hemo-De清理试剂蛋白酶溶液仪器、耗材 水浴锅增湿器玻片实验步骤 一、制备培养的中期细胞标本1.在一个独立小室里放置一个水浴锅和一台增湿器。湿度应大约50%,如果房间湿度计显示低于45%,则应使用加湿器。2.预热水浴锅至67℃±
FISH-技术基本实验
基本方案 实验方法原理 试剂、试剂盒 70%乙醇 SSC
分离的细胞核的染色质的微球菌核酸酶消化实验
实验材料动物组织 [如肝、肾和(或)脾]试剂、试剂盒核缓冲液 A、B、C无 Ca 和 Mg 离子(CMF) 的 PBSNaOH2×TNESK 溶液CaCl2微球菌核酸酶(MNase) 储液仪器、耗材剃刀刀片或解剖刀培养皿带有聚四氟乙烯包被的磨棒的组织匀浆器电动组织磨碎机相差显微镜轻薄棉布玻璃离心管(
分离的细胞核的染色质的微球菌核酸酶消化实验
实验方法原理 实验材料 动物组织 [如肝、肾和(或)脾]试剂、试剂盒 核缓冲液 A、B、C 无 Ca 和 Mg 离子(CMF) 的 PBSNaOH 2×TNESK 溶液CaCl2微球菌核酸酶(MNase) 储液仪器、耗材 剃刀刀片或解剖刀培养皿带有聚四氟乙烯包被的磨棒的组织匀浆器电动组织磨碎机 相差
小鼠脑微血管内皮细胞的体外培养
摘要: 目的 探讨脑微血管内皮细胞的体外培养方法并进行细胞超微结构研究及组织型纤溶酶原激活物(TPA ) 活性测定。 方法 取新生小鼠脑组织, 通过匀浆、过筛、胶原酶消化、差速粘附等技术对鼠脑微血管内皮细胞进行原代培养, 待细胞铺满瓶底时, 用01125%胰酶20102%EDTA 消化, 离心收集
ATCC细胞注意事项方法
ATCC细胞注意事项:1、首先肉眼观察细胞培养基颜色,然后再借助显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张),这样做可方便后期的对比。2、一定要用75%的酒精消毒(75%的酒精的水要经过杀菌处理)。3、严格按照在无菌环
超600万!重大疫情救治基地P3实验室设备采购拒绝进口
近日,2022年重大疫情救治基地P3实验室设备采购项目项目公布,总采购预算超600万元人民币,采购仪器设备包括多重呼吸道病原体快速核酸检测系统、研究级生物显微镜、NGS测序仪平台、核酸定量仪、荧光定量PCR仪、核酸提取仪、荧光酶标仪、细菌鉴定仪、荧光显微镜、倒置相差显微镜、光学显微镜、离心机、移
细胞成活率形态学观察法及检测法
细胞成活率形态学观察法及检测法:细胞成活率,判断之形态学观察法:细胞内出现颗粒或空泡。细胞内如果出现颗粒物质,表明细胞处于非健康状态。同样,细胞内出现空泡也说明细胞处于非健康状态。 细胞丧失双折射性:如果发生在单层细胞:一个具有双折射性的正常细胞逐步失去这一特征(相差显微镜下细胞边缘成晕环),则提示
细胞生长曲线实验
实验方法原理 细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,是判定细胞活力的重要指标。一般细胞传代之后,经过短暂的悬浮然后贴壁,随后度过长短不同的潜伏期,即进入大量分裂的指数生长期。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化,典型的生长曲线可分为
培养箱在实验室设备中的用途
培养箱在实验室设备中的用途 细胞培养箱所需的实验室设备的种类和使用建议,也有一定的标准和规范:细胞培养主要重点在于保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。1、显微镜:倒置式显微镜是细胞培养实验室日常工作常规必备设备,主要用于日常了解细胞的生长情况并观察有无污染发生。如资金允许,建议选用
细胞生长曲线实验
实验方法原理 细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,是判定细胞活力的重要指标。一般细胞传代之后,经过短暂的悬浮然后贴壁,随后度过长短不同的潜伏期,即进入大量分裂的指数生长期。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化,典型的生长曲线可分为
细胞破碎和蛋白质溶解实验
匀浆法 超声法 高压匀浆法 研磨法 (高速)珠磨法 酶溶法 化学渗透法 实验方法原理 通过固体剪切
细胞成活率形态学观察法及检测法
细胞成活率,判断之形态学观察法:1、细胞内出现颗粒或空泡。2、细胞内如果出现颗粒物质,表明细胞处于非健康状态。3、同样,细胞内出现空泡也说明细胞处于非健康状态。 细胞丧失双折射性: 如果发生在单层细胞:一个具有双折射性的正常细胞逐步失去这一特征(相差显微镜下细胞边缘成晕环),则提示该细胞已经死
1826万!中国医学科学院医学实验动物研究所计划采购MALDITOFMS等
中国医学科学院医学实验动物研究所改善科研条件专项(呼吸疾病与共病动物模型研究设备购置) 项目所在采购意向: 中国医学科学院医学实验动物研究所2025年3至5月政府采购意向 采购单位: 中国医学科学院医学实验动物研究所 采购项目名称: 中国医学科学院医学实验动物研究所改善科研条件专项(呼吸
显微镜选购分类及相关依据
显微镜分类一、 按使用目镜的数目可分为单目、双目和三目显微镜。单目价格比较便宜,可以作为初学爱好者或者学生的选择,双目稍贵点,观察的时候两眼可以同时观察,观察得舒适些,三目又多了一目,它的作用主要是连接数码相机或电脑用,比较适合长时间工作的人员选用。 二、显微镜分类根据其观察对像可分为生物显微镜、
平滑肌细胞培养方法
贴壁法原代培养1.1 细胞培养1.1.1 培养液配制 DMEM(美国Gibco公司),Hepes(15mmol/L),青霉素(100u/ml),链霉素(100mg/ml),优质胎牛血清(原代培养浓度20%,传代培养浓度10%,美国Hyclone)。1.1.2 培养器皿 25cm2塑料培养瓶(Cost
细胞凋亡的形态学观察
细胞凋亡(apoptosis)的命名主要是根据某些单个细胞死亡时细胞碎裂如花瓣或树叶散落般的形态学特征。目前对细胞凋亡的认识正不断得到深化,检测凋亡细胞的方法也逐渐增多,但形态改变仍是确定细胞凋亡的最可靠的方法。一、光学显微镜观察凋亡细胞的主要特征为核染色质致密深染,形成致密质块,有时可碎裂。在HE
细胞凋亡的形态学观察
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