荧光抗体技术的原理和使方法
荧光抗体技术，用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术。荧光物种类一般有异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素等。一般是将待测标本固定于玻片表面，滴加已知荧光抗体后再以缓冲液冲洗，干燥后于荧光显微镜下观察阳性是可见带荧光的抗原抗体复合物; 阴性无荧光(因为带荧光的抗体不能与抗原结合，被冲冼掉)。该技术具有简单、特异性高、敏感性低、同时检测多种抗原时较复杂等特点。......阅读全文
荧光光谱仪的原理和应用
目前荧光分析法已经发展成为一种重要且有效的光谱化学分析手段。在我国，50年代初期仅有极少数的分析化学工作者从事荧光分析方面的研究工作，但到了70年代后期，荧光分析法已引起国内分析界的广泛重视，在全国众多的分析化学工作者中，已逐步形成一支从事这一领域工作的队伍。 一、荧光分析特点 （1）荧光分
双荧光素酶检测的原理和应用
一、荧光素酶报告基因的检测原理荧光素酶（Luciferase）是生物体内催化荧光素(luciferin)或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化发光的一类酶的总称，来自于自然界能够发光的生物。自然界存在的荧光素酶来自萤火虫、发光细菌、发光海星、发光节虫、发光鱼、发光甲虫等。细菌荧光素酶对热敏
病毒免疫荧光实验_荧光抗体染色
实验材料细胞小玻片标本试剂、试剂盒荧光抗体实验步骤荧光抗体染色按不同反应机制，可有以下几种：1.直接法 用已知特异性病毒抗体与荧光素结合，制成荧光特异性抗体，直接与细胞或组织中相应病毒抗原结合，在荧光显微镜下即可见病毒或病毒抗原存在部位呈现特异性荧光。此法特异简便，但一种荧光抗体只能检查一种抗原，特
抗体酶的特点和制备方法
抗体酶具有典型的酶反应特性；与配体(底物)结合的专一性，包括立体专一性，抗体酶催化反应的专一性可以达到甚至超过天然酶的专一性；具有高效催化性，一般抗体酶催化反应速度比非催化反应快104～108倍，有的反应速度已接近于天然酶促反应速度；抗体酶还具有与天然酶相近的米氏方程动力学及pH依赖性等。将抗体转变
生物学家利用荧光寿命成像显微镜技术使活精子发光
雌性昆虫如何在交配后的几个月内保持精子的活性？这是由应用动物学系主席Klaus Reinhardt教授领导的精子生物学家们关心的一个中心问题。现在科学家们在《Scientific Reports》杂志上发表了他们的第一个有希望的结果。 Cornelia Wetzker博士从癌症研究中借用了一种
简述免疫荧光的技术的间接法测抗体的实验步骤
1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于已知抗原标本片，10min后弃去，使标本片保持一定湿度。 2）滴加以0.01mol/L，pH7.4的PBS适当稀释的待检抗体标本，覆盖已知抗原标本片。将玻片置于有盖搪瓷盒内，37℃保温30min。 3）取出玻片，置于玻片架上，先用0.01mol
酶免疫电镜技术原理、材料和操作方法
（一）原理酶免疫电镜技术是利用酶的高效率的催化作用对其底物的反应形成不同的电子密度，借助于电子显微镜观察，证明酶的存在，从而对抗原进行定位。（二）材料与试剂1．PBS液取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。2．DAB溶液取5mgDAB(3、
免疫电泳实验技术原理和操作方法
（一）原理免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两种方法的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行电泳，使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此分开，然后加入抗体做双相免疫扩散，把已分离的各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇，在二者比例适当的地方，形成肉眼可见的沉淀弧。该方法可以用来研究：①抗原和抗体的相对应
实时荧光定量PCR技术的基本原理
在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光基团，这些荧光物质有其特定的波长。仪器可以自动检出，利用荧光信号积累，实时监测整个PCR进程，在PCR循环中，测量的信号将作为荧光阈值的坐标。并且引入一个——Ct值（Threshold cycle）概念，Ct值是指产生可被检测到得荧光信号所需的最小循环数，是
解离增强镧系元素荧光免疫分析技术的原理
解离增强镧系元素荧光免疫分析（DELFIA）是时间分辨荧光免疫分析中的一种。它用具有双功能基团结构的螯合剂，使其一端与铕（Eu）连接，另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接，形成EU标记的抗体/抗原，经过免疫反应之后生成免疫复合物。由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱，因此加入一种增强剂，使Eu从复
X荧光分析仪的应用及技术原理
X荧光光谱仪（XRF）由激发源（X射线管）和探测系统构成。X射线管产生入射X射线（一次X射线），激发被测样品，产生X荧光（二次X射线），探测器对X荧光进行检测。 一、XRF在物质成分分析上的应用 XRF应用主要取决于仪器技术和理论方法的发展。X射线荧光分析仪器有三种主要类型：实验室用
X射线荧光光谱仪的技术原理
X射线荧光光谱仪是利用初级X射线光子或其他微观离子激发待测物质中的原子，使之产生荧光（次级X射线）而进行物质成分分析和化学态研究的方法。按激发、色散和探测方法的不同，分为X射线光谱法（波长色散）和X射线能谱法（能量色散）。具有重现性好，测量速度快，灵敏度高的特点。能分析F(9)～U(92)之间所有元
免疫荧光技术应用食品检测的原理
将抗体球蛋白稀释成2mg/mL,和2%绵羊红细胞1∶1混合(混合后血球成1%),再加依文斯兰2滴(0.1%)。这样的悬液里和血球表面带有沙门氏菌的抗体,加上增菌液,在湿的环境下使抗原和抗体结合,其余的杂质和非特异的物质不与抗体结合,不易固定在玻片上,易被水冲击。因此,有特异性的抗原就能滞留在玻璃片上
RACE技术的原理和操作
近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多克隆新基因的方法和手段，如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA
RACE技术的原理和操作
近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多克隆新基因的方法和手段，如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA
RACE技术的原理和操作
近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多克隆新基因的方法和手段，如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cD
RACE技术的原理和操作
近年来随着生物技术的不断发展，出现了许多克隆新基因的方法和手段，如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA
实时荧光定量PCR原理和实验（一）
无论是对遗传病(如地中海贫血和血友病)、传染病(如肝炎和艾滋病)或肿瘤进行基因诊断，还是研究药物对基因表达水平的影响，或者监控药物和疗法的治疗效果，定量PCR技术都可以发挥很大作用。定量PCR技术的最新进展是实时荧光定量。该技术借助于荧光信号来检测PCR产物，一方面提高了灵敏度，另一方面还可以做到P
实时荧光定量PCR原理和实验（二）
归一后的荧光信号再扣除本底，就得到DRn：DRn = Rn,样本- Rn,空白。DRn是最后构建PCR实时扩增曲线的纵坐标。 无论绝对定量还是相对定量，在得到实验结果后，还要考虑数据之间的可比性问题。在实验操作中，取样都是以体积或重量为单位的，但是同样体积或重量的样本所来源的细胞数目并不一样
抗体的生产原理
抗体产生于体液免疫过程。首先是体外异物进入体内，穿过机体的前两层防御（非特异性免疫，就是皮肤、黏液，溶菌酶）。然后异物被巨噬细胞的吞噬，并且经巨噬细胞处理在表面暴露出抗原活性物质。经过巨噬细胞的呈递，B细胞与抗原接触并且B细胞表面的抗原受体受到异物表面的抗原活性物质的刺激。B细胞开始大量增殖分化，一
荧光显微技术有哪些检测方法？
1.直接法：用特异荧光抗体直接滴加于标本上，使之与抗原发生特异性结合。本法操作简便，特异性高，非特异荧光染色因素少;缺点是敏感度偏低，且每检查一种抗原需制备相应的特异荧光抗体。2.间接法：可用于检测抗原和抗体。本法有两种抗体相继作用，第一抗体为针对抗原的特异抗体，第二抗体(荧光抗体)为针对第一抗体的
使转氨酶降低的方法有哪些？
使转氨酶降低的方法有很多种，但是不能盲目的使用降酶的手段来达到降低转氨酶的作用。必须根据病人的身体素质以及病情、病种进行诊断，选择最佳的治疗方案和药物，才能达到彻底治愈的目的。 1、治疗谷丙转氨酶高的药物主要选用中药及其有效成分提取物。上述各种中药成分具有益肝滋肾、解毒祛湿的功效，可用于治疗各
流式抗体（荧光抗体）细胞染色步骤与注意
染色缓冲液（BSA）的配制：PBS含有1% FBS和0.09% NaN3，置于冰上或4度冰箱备用。准备单细胞悬液：淋巴组织、骨髓、血液或培养的细胞。用冰染色缓冲液洗细胞2次，离心细胞，用冰染色缓冲液重悬细胞，使终浓度为2×107细胞/ml。各取50ul（106细胞）细胞悬液到2个圆底的Ep管中。根据
简述单克隆抗体技术的基本原理
哺乳类细胞DNA合成可分为两条途径，①从头(de novo)合成途径，利用磷酸核糖焦磷酸和尿嘧啶，可被氨基蝶呤(A)阻断；②补救(salvag-e)合成途径，在次黄嘌呤磷酸核糖转化酶( HGPRT)存在下利用次黄嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T)。 单克隆抗体技术的流程为：脾细胞和骨髓瘤细胞在聚乙二醇
PCR技术的原理与方法
PCR定义PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶链式反应，是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术，能快速特异地在体外扩增任何目的DN
免疫荧光技术简介
免疫荧光技术（Immunofluorescence technique）又称荧光抗体技术，根据抗原抗体反应的原理，将荧光素偶联到已知的抗原或抗体上制成荧光探针，与血清或体液、细胞、组织中存在的相应抗体（或抗原）结合，从而对这些组织中存在的抗原或抗体进行定性、定量和（或）定位的检测。抗体的选择
荧光素标记抗体的操作步骤
FITC荧光素标记抗体的操作步骤 www.runwelltac.com当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键（thiocarbmide）结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖
荧光定量PCR技术特点、原理及其应用2
3 应用由于FQ-PCR具有高灵敏性，高特异性和高精确性的特点，目前，该项技术已被应用于病原体测定、肿瘤基因检测、免疫分析、基因表达、突变及其多态性的研究等多个领域。3.1 病原体测定由于PCR技术的问世，使得病原体检测能够快速而方便的进行。但由于其高灵敏性，实验操作很容易受到污染而出现假阳性。只要
实时荧光定量PCR仪简介及技术原理
实时荧光定量PCR仪适用于临床及科研以聚合酶链式反应为特征的、以实时荧光定量检测分析DNA/RNA为目的的病原体检测及基因分析。临床疾病诊断：各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价；地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测；肿瘤标志物及瘤基因检测实
荧光定量PCR技术特点、原理及其应用1
荧光定量PCR（也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR）是美国PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术，该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的，与变通PCR相比，FQ- PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、原理和方法以及