微卫星标记的实验步骤

1. 客户收集标本(血液或组织等标本)并提取DNA。2. 设计引物序列并扩增,琼脂糖电泳检测结果。3. 合成荧光标记引物。4. 进行PCR扩增,产物通过测序仪器电泳检测, 获得扩增片段大小。5. 分析测序仪器读出的数据,给结果图谱。......阅读全文

微卫星标记的实验步骤

1. 客户收集标本(血液或组织等标本)并提取DNA。2. 设计引物序列并扩增,琼脂糖电泳检测结果。3. 合成荧光标记引物。4. 进行PCR扩增,产物通过测序仪器电泳检测, 获得扩增片段大小。5. 分析测序仪器读出的数据,给结果图谱。

关于微卫星标记的实验的步骤介绍

  1. 客户收集标本(血液或组织等标本)并提取DNA。  2. 设计引物序列并扩增,琼脂糖电泳检测结果。  3. 合成荧光标记引物。  4. 进行PCR扩增,产物通过测序仪器电泳检测, 获得扩增片段大小。  5. 分析测序仪器读出的数据,给结果图谱。

微卫星标记的分类

Weber 将微卫星分为3 类:单纯(pure) SSR、复合(compound) SSR,和间隔(interrupted) SSR。所谓单纯SSR 是指由单一的重复单元所组成的序列,如(AT) n;复合SSR 则是由2 个或多个重复单元组成的序列,如(GT)n(AT)m;间隔SSR 在重复序列中有

微卫星标记的概念

微卫星标记(microsatellite),又被称为短串联重复序列(short tandem repeats,STRs)或简单重复序列(simple sequence repeats,SSR),是均匀分布于真核生物基因组中的简单重复序列,由2~6个核苷酸的串联重复片段构成,由于重复单位的重复次数在个

序列标记微卫星的定义

中文名称序列标记微卫星英文名称sequence tagged microsatellite;SIMS定  义染色体上已定位的、核苷酸序列已知的微卫星重复序列。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)

微卫星标记法的特点

与其它标记技术相比,具有以下特点:首先,在每个微卫星DNA 两端的序列多是相对保守的单拷贝序列,尤其在亲缘关系相近的物种间是保守的,而且在一些紧密相关的物种中其重复单位和重复次数具有一定的相似性。其次,这些小的、串联排列的重复序列经常是通过核苷酸链的滑动错配或者其它未知的过程来改变它们的长度,从而导

关于微卫星标记的基本简介

  微卫星DNA 是真核生物基因组重复序列中的主要组成部分,主要由串联重复单元组成,每单元长度在1-10bp 之间,1 个SSR 的总长度可达几十到几百个bp。每个微卫星DNA 都由核心序列和侧翼序列组成,其核心序列呈串联重复排列。侧翼DNA 序列位于核心序列的两端,为保守的特异单拷贝序列,能使微卫

微卫星标记的概念和应用

微卫星DNA 是真核生物基因组重复序列中的主要组成部分,主要由串联重复单元组成,每单元长度在1-10bp 之间,1 个SSR 的总长度可达几十到几百个bp。每个微卫星DNA 都由核心序列和侧翼序列组成,其核心序列呈串联重复排列。侧翼DNA 序列位于核心序列的两端,为保守的特异单拷贝序列,能使微卫星特

微卫星DNA分子标记及其应用

  微卫星(Microsatellite,MS)又称短串联重复(Short Tandem Repeats,STR)或简单序列重复(Simple Sequnce Repeat,SSR),是指基因组中以少数几个核苷酸(多数为2-4个)为单位多次串联重复组成的长达几十个核苷酸的序列。其中最常见的是双核苷酸

关于微卫星标记的相关特点介绍

  SSR 操作简单,仅需微量组织,即可使DNA 降解,进行有效地分析鉴定。其标记带型简单,记录条带一致,客观明确,PCR 技术的利用,使微卫星标记技术实现操作自动化。  与其它标记技术相比,具有以下特点:首先,在每个微卫星DNA 两端的序列多是相对保守的单拷贝序列,尤其在亲缘关系相近的物种间是保守

SSR标记实验步骤

一、简介:SSR简单序列重复标记(Simple sequence repeat, 简称SSR标记),也叫微卫星序列重复,是由一类由几个核苷酸(1-5个)为重复单位组成的长达几十个核苷酸的重复序列,长度较短,广泛分布在染色体上。由于重复单位的次数的不同或重复程度的不完全相同,造成了SSR长度的高度变异

SSR标记实验步骤

SSR简单序列重复标记可以用于:用微卫星区域特定顺序设计成对引物,通过PCR技术,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,即可显示SSR位点在不同个体间的多态性。实验方法原理与其它分子标记相比,SSR标记具有以下优点:(1)数量丰富,覆盖整个基因组,揭示的多态性高;(2)具有多等位基因的特性,提供的信息量高;(3)以

SSR标记实验步骤

            实验方法原理 与其它分子标记相比,SSR标记具有以下优点:(1)数量丰富,覆盖整个基因组,揭示的多态性高;(2)具有多等位基因的特性,提供的信息量高;(3)以 孟德尔方式遗传,呈共显性;(4)每个位点由设计的引物顺序决定,便于不同的实

关于微卫星标记的基本信息介绍

  微卫星标记(microsatellite),又被称为短串联重复序列(short tandem repeats,STRs)或简单重复序列(simple sequence repeats,SSR),是均匀分布于真核生物基因组中的简单重复序列,由2~6个核苷酸的串联重复片段构成,由于重复单位的重复次数

微卫星DNA分子标记及其应用(一)

微卫星(Microsatellite,MS)又称短串联重复(Short Tandem Repeats,STR)或简单序列重复(Simple Sequnce Repeat,SSR),是指基因组中以少数几个核苷酸(多数为2-4个)为单位多次串联重复组成的长达几十个核苷酸的序列。其中最常见的是双核

微卫星DNA分子标记及其应用(二)

3. 微卫星分子标记技术的应用 微卫星DNA 作为遗传标记具有很大的优越性。近年来随着研究的不断深入,对微卫星标记的研究不仅具有重要的理论意义, 而且还具有较好的应用前景。3.1 微卫星多态性分析在自然界中,生物个体表现出来的各种遗传变异,在本质上就是DNA 的差异,因此通过研究DNA的变异来分

胶体金标记实验步骤

1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。(1)待标记蛋白溶液

胶体金标记实验操作步骤

1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备 胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。 (

荧光素酶基因标记肿瘤细胞的实验步骤

哺乳动物生物发光,一般是将Firefly luciferase基因(由554个氨基酸构成,约50KD)即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株,当细胞分裂、转移、分化时, 荧光素酶也会得到持续稳定的表达。将标记好的细胞接种到实验动物

胶体金标记实验的操作方法与步骤

胶体金标记实验的实验过程主要包含以下步骤:胶体金标记蛋白的制备及其与胶体金之间的用量比例的确定、胶体金和蛋白的结合、胶体金标记蛋白的纯化与质量检测等。1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的p

放射免疫技术(RIA)标记抗原实验的原理和步骤

原理当抗原遇到相应的抗体便形成抗原抗体复合物(Ag+Ab↔Ag-Ab),当用放射性同位素标记抗原再与相应的抗体结合便形成标记抗原和抗体复合物。即:*Ag+Ab↔*Ag-Ab。当标记抗原和未标记抗原一起加入相应的抗体时则两种抗原产生相互的竞争,而生成有标记抗原和抗体复合物以及非标记抗原和抗体复合物。生

荧光素标记抗体的操作步骤

           FITC荧光素标记抗体的操作步骤      www.runwelltac.com当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖

简述酶标记抗体的方法步骤

  1、HRP标记抗体的方法  酶与抗体交联的方法有许多种,根据酶的结构不同可采用不同的方法。对于制备HRP结合物,可用戊二醛二步法和过碘酸钠法。尤以简易过碘酸钠法更为常用。  戊二醛二步法  原理  戊二醛为一种双功能试剂,通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白

切口平移法标记探针的步骤

(1)模板 DNA 的制备用限制性内切酶将载体上的外源 DNA 酶切并进行琼脂糖凝胶电泳回收纯化,琼脂糖残留可抑制切口平移反应,因此彻底清除琼脂糖至关重要。也可以用带有外源 DNA 克隆片段的重组载体为模板来切口平移制备探针。(2)切口平移标记将模板 DNA 水溶液、DNase Ⅰ、未标记的三磷酸单

微卫星DNA的特点

⑴种类多、分布广,并按孟德尔共显性方式在人群中世代相传。在基因组中平均50kb就有一个重复序列,突变率低(< 0.04%)。⑵在人群中高度多态,其多态信息含量容量超过70%。其多态性表现为正常人群的不同个体某一基因位点重复序列的重复次数可不一样,同一个体的两个同源染色体上重复次数也可以不一样,即微卫

微卫星DNA的特点

⑴种类多、分布广,并按孟德尔共显性方式在人群中世代相传。在基因组中平均50kb就有一个重复序列,突变率低(< 0.04%)。⑵在人群中高度多态,其多态信息含量容量超过70%。其多态性表现为正常人群的不同个体某一基因位点重复序列的重复次数可不一样,同一个体的两个同源染色体上重复次数也可以不一样,即微卫

微卫星DNA的特点

⑴种类多、分布广,并按孟德尔共显性方式在人群中世代相传。在基因组中平均50kb就有一个重复序列,突变率低(< 0.04%)。⑵在人群中高度多态,其多态信息含量容量超过70%。其多态性表现为正常人群的不同个体某一基因位点重复序列的重复次数可不一样,同一个体的两个同源染色体上重复次数也可以不一样,即微卫

非标记抗体免疫电镜的操作步骤

1.经典法 (1)将被检病毒材料0.9ml,加1︰5~1︰10稀释的特异性免疫 血清0.1ml充分混合。(2)置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃过夜。(3)以17 000r/min~23 000r/min离心90min。(4)吸去上清,将离心管口倒置于滤纸上,吸去残留液体。(5)沉淀物中加少量H

FITC荧光素标记抗体的操作步骤

当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般zui多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下:F

实验动物标记实验

实验材料 兔子 小鼠试剂、试剂盒 3%~5%苦味酸 0.5%中性品红 2%硝酸银实验步骤 1. 染色法 适用于小动物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是将化学药品涂在动物的被毛上,以不同颜色来区分动物。常用的化学药品有:3%~5%苦味酸溶液(黄色)、0.5%中性品红(红色)、2%硝酸银(咖啡色)