关于微卫星标记的实验的步骤介绍
1. 客户收集标本(血液或组织等标本)并提取DNA。 2. 设计引物序列并扩增,琼脂糖电泳检测结果。 3. 合成荧光标记引物。 4. 进行PCR扩增,产物通过测序仪器电泳检测, 获得扩增片段大小。 5. 分析测序仪器读出的数据,给结果图谱。......阅读全文
关于微卫星标记的实验的步骤介绍
1. 客户收集标本(血液或组织等标本)并提取DNA。 2. 设计引物序列并扩增,琼脂糖电泳检测结果。 3. 合成荧光标记引物。 4. 进行PCR扩增,产物通过测序仪器电泳检测, 获得扩增片段大小。 5. 分析测序仪器读出的数据,给结果图谱。
微卫星标记的实验步骤
1. 客户收集标本(血液或组织等标本)并提取DNA。2. 设计引物序列并扩增,琼脂糖电泳检测结果。3. 合成荧光标记引物。4. 进行PCR扩增,产物通过测序仪器电泳检测, 获得扩增片段大小。5. 分析测序仪器读出的数据,给结果图谱。
关于微卫星标记的相关特点介绍
SSR 操作简单,仅需微量组织,即可使DNA 降解,进行有效地分析鉴定。其标记带型简单,记录条带一致,客观明确,PCR 技术的利用,使微卫星标记技术实现操作自动化。 与其它标记技术相比,具有以下特点:首先,在每个微卫星DNA 两端的序列多是相对保守的单拷贝序列,尤其在亲缘关系相近的物种间是保守
关于微卫星标记的基本信息介绍
微卫星标记(microsatellite),又被称为短串联重复序列(short tandem repeats,STRs)或简单重复序列(simple sequence repeats,SSR),是均匀分布于真核生物基因组中的简单重复序列,由2~6个核苷酸的串联重复片段构成,由于重复单位的重复次数
关于微卫星标记的基本简介
微卫星DNA 是真核生物基因组重复序列中的主要组成部分,主要由串联重复单元组成,每单元长度在1-10bp 之间,1 个SSR 的总长度可达几十到几百个bp。每个微卫星DNA 都由核心序列和侧翼序列组成,其核心序列呈串联重复排列。侧翼DNA 序列位于核心序列的两端,为保守的特异单拷贝序列,能使微卫
微卫星标记的分类
Weber 将微卫星分为3 类:单纯(pure) SSR、复合(compound) SSR,和间隔(interrupted) SSR。所谓单纯SSR 是指由单一的重复单元所组成的序列,如(AT) n;复合SSR 则是由2 个或多个重复单元组成的序列,如(GT)n(AT)m;间隔SSR 在重复序列中有
微卫星标记的概念
微卫星标记(microsatellite),又被称为短串联重复序列(short tandem repeats,STRs)或简单重复序列(simple sequence repeats,SSR),是均匀分布于真核生物基因组中的简单重复序列,由2~6个核苷酸的串联重复片段构成,由于重复单位的重复次数在个
微卫星标记法的特点
与其它标记技术相比,具有以下特点:首先,在每个微卫星DNA 两端的序列多是相对保守的单拷贝序列,尤其在亲缘关系相近的物种间是保守的,而且在一些紧密相关的物种中其重复单位和重复次数具有一定的相似性。其次,这些小的、串联排列的重复序列经常是通过核苷酸链的滑动错配或者其它未知的过程来改变它们的长度,从而导
序列标记微卫星的定义
中文名称序列标记微卫星英文名称sequence tagged microsatellite;SIMS定 义染色体上已定位的、核苷酸序列已知的微卫星重复序列。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)
微卫星标记的概念和应用
微卫星DNA 是真核生物基因组重复序列中的主要组成部分,主要由串联重复单元组成,每单元长度在1-10bp 之间,1 个SSR 的总长度可达几十到几百个bp。每个微卫星DNA 都由核心序列和侧翼序列组成,其核心序列呈串联重复排列。侧翼DNA 序列位于核心序列的两端,为保守的特异单拷贝序列,能使微卫星特
微卫星DNA分子标记及其应用
微卫星(Microsatellite,MS)又称短串联重复(Short Tandem Repeats,STR)或简单序列重复(Simple Sequnce Repeat,SSR),是指基因组中以少数几个核苷酸(多数为2-4个)为单位多次串联重复组成的长达几十个核苷酸的序列。其中最常见的是双核苷酸
SSR标记实验步骤
SSR简单序列重复标记可以用于:用微卫星区域特定顺序设计成对引物,通过PCR技术,经聚丙烯酰胺凝胶电泳,即可显示SSR位点在不同个体间的多态性。实验方法原理与其它分子标记相比,SSR标记具有以下优点:(1)数量丰富,覆盖整个基因组,揭示的多态性高;(2)具有多等位基因的特性,提供的信息量高;(3)以
SSR标记实验步骤
实验方法原理 与其它分子标记相比,SSR标记具有以下优点:(1)数量丰富,覆盖整个基因组,揭示的多态性高;(2)具有多等位基因的特性,提供的信息量高;(3)以 孟德尔方式遗传,呈共显性;(4)每个位点由设计的引物顺序决定,便于不同的实
SSR标记实验步骤
一、简介:SSR简单序列重复标记(Simple sequence repeat, 简称SSR标记),也叫微卫星序列重复,是由一类由几个核苷酸(1-5个)为重复单位组成的长达几十个核苷酸的重复序列,长度较短,广泛分布在染色体上。由于重复单位的次数的不同或重复程度的不完全相同,造成了SSR长度的高度变异
微卫星DNA分子标记及其应用(二)
3. 微卫星分子标记技术的应用 微卫星DNA 作为遗传标记具有很大的优越性。近年来随着研究的不断深入,对微卫星标记的研究不仅具有重要的理论意义, 而且还具有较好的应用前景。3.1 微卫星多态性分析在自然界中,生物个体表现出来的各种遗传变异,在本质上就是DNA 的差异,因此通过研究DNA的变异来分
微卫星DNA分子标记及其应用(一)
微卫星(Microsatellite,MS)又称短串联重复(Short Tandem Repeats,STR)或简单序列重复(Simple Sequnce Repeat,SSR),是指基因组中以少数几个核苷酸(多数为2-4个)为单位多次串联重复组成的长达几十个核苷酸的序列。其中最常见的是双核
关于酶标记抗体实验的结果判定介绍
(1)定性及效价滴定:用特异性抗原(或抗体)同酶标记抗体(或抗免疫球蛋白抗体)作双向琼脂扩散试验或免疫电泳试验。然后用酶的底物使沉淀弧显色,可初步鉴定其活性。最后以直接ELISA法(或在正式实验系统里)对酶结合物进行滴定( 见本节 (三)工作浓度的选择)。 (2)定量和克分子比值测定:可用分光
胶体金标记实验步骤
1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。(1)待标记蛋白溶液
关于蓝瓶子实验的实验步骤介绍
1 、锥形瓶中加50mL水,1.5克葡萄糖,逐滴滴入8~10滴0.1%亚甲基蓝,振荡至溶液呈蓝色。 2 、加入2mL30%NaOH溶液,振荡并静置锥形瓶,观察并记录现象。再振荡锥形瓶至溶液变蓝,又静置锥形瓶,连续记录两次振荡周期(NaOH的用量不能太多)。 3 、将溶液分装在两个小试管中,1
微卫星DNA的基本介绍
微卫星DNA,重复单位序列最短,只有1~6bp,串联成簇,长度50~100bp,又称为短串联重复序列(Short Tandem Repeat STR)。广泛分布于基因组中。 其中富含A-T碱基对,是在研究DNA多态性标记过程中发现的。1981年Miesfeld等首次发现微卫星DNA,其重复单位长
荧光素酶基因标记肿瘤细胞的实验步骤
哺乳动物生物发光,一般是将Firefly luciferase基因(由554个氨基酸构成,约50KD)即荧光素酶基因整合到预期观察的细胞染色体DNA上以表达荧光素酶,培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株,当细胞分裂、转移、分化时, 荧光素酶也会得到持续稳定的表达。将标记好的细胞接种到实验动物
胶体金标记实验操作步骤
1、蛋白质的处理:胶体金标记蛋白的制备 胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值,在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下,二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时,则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。 (
关于细胞融合实验的步骤介绍
1. DMEM或1640基础培养基、PEG溶液置于37℃水浴中预温; 2. 将Balb/c小鼠摘眼球处死后,浸入75%洒精; 3. 无菌取免疫小鼠的脾脏; 4. 脾脏用PBS洗涤后,放入无菌过滤的网筛,再把网筛放在盛有完全培养基的玻璃平皿中用研磨棒(或注射器针管)轻轻研磨或挤压,使其通过网
关于基因探针的标记介绍
为了确定探针是否与相应的基因组DNA杂交,有必要对探针加以标记,以便在结合部位获得可识别的信号,通常采用放射性同位素32P标记探针的某种核苷酸α磷酸基。但近年来已发展了一些用非同位素如生物素-亲合素系统 、地高辛配体等作为标记物的方法。非同位素标记的优点是保存时间较长,而且避免了同位素的污染。
关于标记基因的分类介绍
引入“选择基因”和“报告基因”的概念 选择基因和报告基因都可以看做是标记基因,都起着标记目的基因是否成功转化的作用,但是它们又有着各自的特点。 选择基因(又称选择标记基因),主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因,这种基因在执行其选择功能时,通常存在检测慢(蛋白酶作用需要时间)、依
关于标记基因的基本介绍
标记基因,原本是基因工程的专属名词,但是它已经成为一种基本的实验工具,广泛应用于分子生物学、细胞生物学、发育生物学等方面的研究。 标记基因是一种已知功能或已知序列的基因,能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说,它是重组DNA载体的重要标记,通常用来检验转化成功与否;在基因定位意义上来说
关于基因探针的标记介绍
为了确定探针是否与相应的基因组DNA杂交,有必要对探针加以标记,以便在结合部位获得可识别的信号,通常采用放射性同位素32P标记探针的某种核苷酸α磷酸基。但近年来已发展了一些用非同位素如生物素-亲合素系统、地高辛配体等作为标记物的方法。非同位素标记的优点是保存时间较长,而且避免了同位素的污染。最常
关于探针标记方法的介绍
①缺口平移标记法。利用的是DNA聚合酶I能修复DNA链的功能。该法先由DNaseI在DNA双链上随机切出切口,然后DNA聚合酶I沿缺口水解5´;端核苷酸,同时在3´;端修复加入被标记核苷酸,切口平行推移。缺口平移法快速、简便、成本相对较低、比活性相对较高、标记均匀,多用于大分
关于明胶酶谱法的实验步骤介绍
1、明胶酶谱法实验步骤:取对数期的癌细胞在的无血清培养基DMEM中培养24h。 2、明胶酶谱法实验步骤:次日收集上清液,将上清液移入离心管中 2000rpm 离心10min,-70℃储存备用。 3、明胶酶谱法实验步骤:根据细胞计数调整各组细胞培养上清液中的蛋白浓度(或者测定蛋白浓度调整使所上
关于口腔上皮细胞的实验步骤介绍
(一)操作过程 用绸布擦净载玻片,滴一滴生理盐水于载玻片中央。用消毒牙签的钝端,在漱净的口腔任意一侧的颊部,轻轻刮几下,把牙签上附有口腔壁碎屑的一端,放在载玻片上的氯化钠溶液中涂几下,盖上盖玻片。在盖玻片的一侧加染液1~2滴(任一染液均可),用滤纸从盖玻片的另一侧吸引染液,使染液浸润到标本的全