免疫组化实验所用的组织和细胞标本
实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理大片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。......阅读全文
免疫组化实验原理和步骤（二）
免疫组化问题解答1、染色过强 a 抗体浓度过高戒孵育时间过长 。降低抗体滴度、抗体孵育时间：室温1小时、或4度过夜 b 孵育温度过高超过37度。 一般在室温20-28度 c DAB显色时间过长戒浓度过高 显色时间不超过5-12分钟，以显微镜下观察为准。2、非特异性背景染色a 操作过程中冲洗不充分 ：
免疫组化实验原理和步骤（三）
免疫组化技术的关键问题1.组织处理恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件，也是决定染色成败的内部因素，在组织细胞材料准备过程中，不仅要求保持组织细胞形态完整，更要保持组织细胞的抗原性不受损戒弥漫，防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织，抗原已经丢失，即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术，也很难检出所
免疫组化实验原理和步骤（四）
免疫组化染色注意事项免疫组化染色方法已不是什么很难的问题，操作步骤简单也易掌握，但要染好免疫组化，其中方法的技巧将是每位操作者在实际工作中不断摸索和探讨的事，但最基本的应从以下方面加以注意：（1）去除内源酶及内源性生物素一般我们进行免疫组化标记的都是一些生物体组织，其中自身含有一定量的内源酶和内源性
免疫组化实验原理和步骤（五）
（6）结果判断免疫组化的结果判断有两种方法：一是对以检测结果阳性细胞指数来定性(如核抗原的标记)，判断方法是以一个规野中阳性细胞数不总细胞癿百分比，再取10个相同视野算取平均指数。另一种方法以染色阳性强度和阳性检出率相结合而定，一般阳性细胞数在0-25为阴性，25-50为十，50-75为十十，75以
免疫组化实验原理和步骤（一）
实验原理：抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部
ELISA－实验标本采集、处理和保存
一、ELISA 实验中血清的采集、处理和保存1、 真空采血针采集 2 ml 新鲜血液，加入无菌试管中2、 采血后室温静置 1 小时3、 将采集血液用离心机 4℃，2500rpm 离心 10 min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉 淀。4、 取上清。 分装冻存备用， 2-8℃ 下，可放置保存 24-
植物标本的采集和制作实验——腊叶标本的采集与制作
实验材料植物枝条仪器、耗材报纸标本夹采集袋枝剪和高枝剪小铲子手锯号牌野外记录签和定名签放大镜海拔表（或 GPS 定位仪）实验步骤(1) 根据采集目的和要求，确定采集时间和地点如各种植物的生长发育时期有长有短，因此必须在不同季节、不同时间采集，才能得到各类不同时期的标本。如木兰科的玉兰，在早春开花，花
肌组织细胞培养实验——神经组织细胞培养实验
实验方法原理神经组织主要由两种神经细胞（神经元）和神经胶质细胞组成。神经元为高度分化的细胞，在组织发生晚期已失掉增殖能力，对生存条件要求高，只有在适宜情况下，如接种在胶原底层上，或在加入神经生长因子（NGF）和胶质细胞因子时，才能生存，并可能出现一定程度的分化现象，如长出突起等，但却难使之增殖；即使
组织和细胞RNA的制备
一、 组织和细胞总RNA提取：异硫氰酸胍法（一）试剂准备1．CSB缓冲液：42mM柠檬酸钠；0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基，N甲基甘氨酸钠)；0.2 mM β-巯基乙醇。2．变性液：异硫氰酸胍（终浓度 4 M）25g、CSB缓冲液 33ml，混合直至完全溶解，可在65℃助
组织和细胞的固定方法
组织和细胞的固定方法 固定 的目的是用人为的方法尽可能使组织细胞的形态结构和化学成分保持生活状态，防止组织细胞死后发生自溶和组织腐败。固定还能增加组织块硬度，使其更容易切片，使不同的结构更容易染色。 固定方法有物理固定和化学固定两类，物理固定可采用空气干燥（血涂片）、骤冷（在液氮中迅速冷冻）或微波固
植物细胞和组织的类型
植物细胞与未分化的分生组织细胞（类似于动物的干细胞）分化、形成根、茎、叶、花和生殖结构的主要细胞和组织类别，每种细胞和组织可能由几种细胞类型组成。薄壁组织薄壁细胞是活细胞，其功能范围从储存和支持到光合作用（叶肉细胞）和韧皮部负载（转移细胞）。除了木质部和韧皮部的维管束外，叶片主要由薄壁组织组成。某些
组织和细胞的固定方法
组织和细胞的固定方法 固定 的目的是用人为的方法尽可能使组织细胞的形态结构和化学成分保持生活状态，防止组织细胞死后发生自溶和组织腐败。固定还能增加组织块硬度，使其更容易切片，使不同的结构更容易染色。 固定方法有物理固定和化学固定两类，物理固定可采用空气干燥（血涂片）、骤冷（在液氮中迅速冷冻）或微波
植物标本的采集和制作实验——孢子植物标本采集与制作
实验材料孢子植物试剂、试剂盒防腐剂仪器、耗材广口瓶实验步骤（一）藻类植物1 栖地：湖沼池塘、小溪、水田、水洼、土壤、水草上、树皮上、岩石上和墙壁上。2. 采集方法(1)若为浮游种类，将水的有色部分置广口瓶中带回室内检查。(2)若为附着种类，需连同附着物一部分和藻体一并采集置于广口瓶中。广口瓶内只装
体细胞杂交的所用方法
所用方法是：①根据双亲细胞的形态特征，用不同荧光染料标记，人工挑选或用荧光激活细胞分拣机分离。或通过显微操作直接挑选。②在合适的选择压下，只允许杂种细胞生长，淘汰双亲和同源融合细胞。如生长激素自主选择、代谢互补选择、白化互补选择、营养缺陷型互补选择、药物抗性互补选择等。
免疫组化实验和elisa实验有什么区别
两者都是基于抗原与抗体之间能发生特异性结合这一基本原理。 免疫组化是对组织标本或细胞标本中的抗原类物质如细胞中的病原体、蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、酶、激素、核酸等进行定位或定量检测，检测材料是石蜡切片或细胞涂片，检测时用到的抗体可以用酶标记，也可以用荧光素标记。酶联免疫吸附试验既可以检测抗原
羊水标本的制备、培养和分析实验
实验材料羊水试剂、试剂盒乙醇chang 培养基秋水仙胺低渗液甲醛 冰乙酸固定剂Permount 封固剂仪器、耗材用于细胞培养的20ml 注射器或试管15ml 离心管离心机盖玻片巴氏吸管倒置显微镜精细镊蓝垫或纸巾玻片加热器实验步骤展
ELISA实验所用试剂详解
在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂：免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分：（1）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）；（2）酶标记的抗原或抗体（结合物）；（3）酶的底物；（4）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），参考标准品和控制
植物细胞分裂和植物分生组织实验（一）
实验方法原理 1. 了解植物细胞分裂的三种方式；认识分生组织在植物体上的位置及其类型。2. 掌握植物细胞有丝分裂和减数分裂各时期的特征；掌握分生组织的结构特点。实验材料 洋葱根尖鸭跖草大蒜苗永久制片油菜茎尖新鲜茎段胡桃刺槐枝条小麦幼茎试剂、试剂盒 冰醋酸醋酸洋红龙胆紫醋酸碘化钾番红水仪器、耗材
植物细胞分裂和植物分生组织实验（二）
观察植物细胞减数分裂时二分体和四分体时期的永久装片，了解植物细胞减数分裂的现象。二、植物分生组织分生组织是由具有旺盛的分裂机能的细胞所组成的，见于植物体生长的幼嫩部位。依其在植物体中的位置不同可分为顶端分生组织、侧生分生组织和居间分生组织三种类型。1. 顶端分生组织的观察剪取2 mm长的一段洋葱根
免疫组化的经验总结（1）－常见问题
免疫组织化学的概念： 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。免疫组化实验所用的组织和细胞
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料 细胞实验步骤 1． 体外培养的细胞，在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞（传代后24h，圆形发亮的细胞）时，加入秋水仙素溶液，终浓度为0.3μg/ml培养液； 2． 继续培养3h； 3． 胰酶消化收集细胞至离心管； 4． 离心1000转/min，离心10min，去上清； 5． Hanks液洗，
体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料细胞实验步骤1． 体外培养的细胞，在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞（传代后24h，圆形发亮的细胞）时，加入秋水仙素溶液，终浓度为0.3μg/ml培养液； 2． 继续培养3h； 3． 胰酶消化收集细胞至离心管； 4． 离心1000转/min，离心10min，去上清； 5． Hanks液洗，离心
免疫组化基础知识1
免疫组织化学的概念： 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学。 免疫组化实验所用的抗体有哪些？ 免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆
免疫组化实验
实验方法原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水
实验动物实验标本的采集实验
(1) 大鼠、小鼠的采血方法：①剪尾采血：适用于少量采血，如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后，将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉，让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。②眼眶后静脉丛采血：一手拇指及食指抓住鼠两耳之
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1．固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1．固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好
核酸的定量测定实验中所用到的公式和计算过程
定磷法是一经典的但至今仍被经常采用的方法，它具有灵敏、简便的特点。各种含磷有机物经硫酸或过氯酸水解，使有机磷消化成为无机磷。无机磷在酸性条件下，与钼酸盐（常用钼酸铵或钼酸钠）反应生成磷钼酸盐络合物。用还原剂处理，磷钼酸盐络合物被还原生成钼蓝，在660nm处有最大光吸收峰。在一定浓度范围内，颜色的深浅
免疫组化病理诊断（一）
在临床病理诊断中，免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段，从20世纪70年代开始，免疫组化技术就应用于病理诊断，对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响，同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识，提高了病理诊断与研究水平。但是，随着免疫组化的广泛应用，发现免疫组化技术存在一些
恶性组织细胞病的实验诊断
1. 血象：全血细胞减少是本病的典型血象表现。贫血进行性加重，严重者血红蛋白可低于20g/L，网织红细胞计数正常或轻度增高。白细胞计数早期高低不一，中、晚期多有减少，甚至低于1.0×109/L.血小板多数减少。白细胞分类中少数病例可见中、晚幼粒细胞，部分病例可在涂片尾部找到异常组织细胞和不典型的单核