免疫组化实验所用的组织和细胞标本

实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。......阅读全文

免疫组化--病理诊断-(一)

在临床病理诊断中,免疫组织化学(IHC)是一种很重要的技术和手段,从20个世纪70年代开始,免疫组化技术就应用于病理诊断,对于诊断肿瘤、肿瘤分类、判断预后产生了巨大的影响,同时也扩展了人们对于各种疾病及肿瘤形成过程的认识,提高了病理诊断与研究水平。但是,随着免疫组化的广泛应用,发现免疫组化技术存在一

血液标本的采集实验

仪器、耗材采血针带刃的三枝针注射器止血带实验步骤1、毛细血管采血法采血部位:WHO推荐采取末梢血以手中指或无名指尖内侧为宜。我国有的地方仍采耳垂血、但其血循环较差。受气温影响较大。采血条件不及手指恒定。因此,采耳垂时要注意局部按摩、改善血循环。半岁以下婴幼儿耳垂和手指太小,通常向拇趾或足根采取。一、

Western-Blot的原理和所用试剂汇总

  Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。   一、原理   与Southern或Northern杂交方法类似,但Western   Blo

Western-Blot的原理和所用试剂汇总

  Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。   一、原理   与Southern或Northern杂交方法类似,但Western   Blo

Western-Blot的原理和所用试剂汇总

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。 原理 与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被

Western-Blot的原理和所用试剂汇总

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。原理与Southern或Northern杂交方法类似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物

小鼠脑片免疫组织化学(ABC法)实验——免疫组化法

实验方法原理通过特异的抗原抗体反应标记上可见的显示物系统来检查细胞及组织上原位抗原或抗体成分的方法。在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下观察其性质定位,还可以利用细胞分光光度计、图像分析仪、共聚焦显微镜等进行细胞原位半定量测定。免疫组织化学的显著特点是特异性强。实验材料冷冻切片试剂、试剂盒一抗;二

肌组织细胞培养实验

骨骼肌细胞培养实验 心肌细胞培养实验 神经组织细胞培养实验             实验材料 肌组织

肌组织细胞培养实验

实验材料 肌组织试剂、试剂盒 Hanks胰蛋白酶血清胎汁仪器、耗材 纱布实验步骤 动物胚或幼体的大腿肌组织为最好的培养材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠(Wistar 大鼠更好)。1.  杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5 厘米小块;2.  用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25 %胰

组织切片标本制作的基本原理

最为广泛应用的方法:石蜡切片 不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺

脱落细胞检查技术/标本采集/标本制作

脱落细胞检查技术: 一、标本采集 正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部位,尽可能在病变区直接采集细胞。采集的标本必须保持新鲜,尽快制得,以免细胞自溶或腐败。尽可能避免血液、粘液等混入标本内,采集方法应简便,操作轻柔,避免病人痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散,下面介绐几种

芹菜叶柄的薄壁组织和厚角组织观察实验

取芹菜(Apium graveolens)叶柄,用解剖刀或刀片切成小段,并将所要切的面削平。然后取锋利的剃刀或新的刀片,进行徒手切片。将切下的切片自切片刀上移到盛有水的培养皿中,也可以直接放在载玻片上的水滴中,加盖玻片即可进行观察。 芹菜叶柄中的薄壁组织细胞体积比其它细胞大,细胞壁薄,并有发

免疫组化实验原理

    首先来谈一下免疫组织化学(IHC, Immunohistochemistry)、免疫细胞化学(ICC, Immunocytochemistry)和免疫荧光(IF, immunofluorescence technic )的共通之处和区别。    平常说的 免疫组化 就是用石蜡切片做的免疫组织

ELISA试剂盒实验各类标本的收集和保存

临床检验常见的ELISA试剂盒标本一般包括血液(指血,静脉血),尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等,这些标本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。一、尿液标本同血标本一样,尿液标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大,特别是饮食的影响,故一般来说晨尿优于随机尿。晨尿是指清晨起床

模板-DNA-的准备、实验的组织和-PCR-扩增实验

            试剂、试剂盒 PCR 缓冲液 ddH20 基因组 DNA dNTP 寡核苷酸引物 仪器、耗材

模板-DNA-的准备、实验的组织和-PCR-扩增实验

试剂、试剂盒 PCR 缓冲液ddH20基因组 DNAdNTP寡核苷酸引物仪器、耗材 离心机和转子丙烯酸防护板过滤阻挡吸头多道移液器PCR 仪托盘 固定器装置底座管盖小管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂含 15 mmol/LMgCl2 的 10XPCR 缓冲液 (GeneAmpPCR 缓冲液

模板-DNA-的准备、实验的组织和-PCR-扩增实验

可以用各种方法分离基因组 DNA, 主要决定于初始材料的种类(血液还是组织)和数量。所有制备的 DNA 都应该储存于 pH8.0 的 TE 缓冲液中并装在灭菌的 Eppendorf 管内。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒PCR 缓冲液ddH20基因组 DNA

细胞传代消化时所用胰酶的浓度

细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要

尿液标本接种实验

1、涂片检查:一般细菌涂片:以无菌操作取尿 5-10 ml 放入无菌管中,经 3000 r/min 离心 30 min 后,倾去上清液,取沉渣,涂片,革兰氏染色,镜检。如发现有革兰氏阴性或阳性细菌,即可做出报告。2、尿细菌培养:临床多采用中段尿做细菌培养,应做菌落计数,培养结果才有诊断价值。(1)平

尿液标本接种实验

实验方法原理尿路感染是一种比较常见的疾病,是大量微生物在尿道生长繁殖而引起的炎性病变,尤其在妇女及儿童中更为常见,临床上常采用尿细菌培养鉴定及药敏检测的方式对尿路感染进行诊断,但治疗时间长,不利于患者及时接受治疗。而尿液细菌直接涂片镜检的检测时间短且简单可行,得出结果迅速准确,根据菌体形态、染色等对

检测Rh血型所用试剂和材料

(1)Rh抗血清:常用的为IgG抗D、抗C、抗E、抗c、抗e。其效价标准大致如:抗D不低于64,抗E不低于16,抗C不低于16,抗c不低于16。(2)5%受检者红细胞盐水悬液。(3)1%木瓜酶(或菠萝酶〕溶液:称取木瓜酶1.0克溶解于100毫升pH5.5的磷酸盐缓冲液内。(4)pH5.5磷酸盐缓冲液

免疫组化试验抗体选择及常用染色方法

一、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)免疫组织化学是利用抗原抗体的特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组织化学染色技术不仅有较高的敏感性

免疫组化的实验试剂及实验步骤

一、试剂(1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L。(2)0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠 3g,柠檬酸 0.4g。(3)0.

做免疫组化需要哪些实验仪器和设备

免疫组化,是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。

做免疫组化需要哪些实验仪器和设备

免疫组化要求的设备不多,而且都很常用。首先要一个透明门的4度冰箱来存放稀释后的抗体,最好带-20度的可以用来保存暂时不用抗体。湿盒若干个,微波炉(用于修复)一台,37度温箱一台,高压锅一只(用于修复),用于加热的电炉或电磁炉一只,再加上一些常用的瓶瓶罐罐就可以了。

脱落细胞标本采集

正确地采集标本是细胞学诊断的基础和关键之一,故要准确地选择部位,尽可能在病变区直接采集细胞。采集的标本必须保持新鲜,尽快制得,以免细胞自溶或腐败。尽可能避免血液、粘液等混入标本内,采集方法应简便,操作轻柔,避免病人痛苦和引起严重并发症及促进肿瘤扩散,下面介绐几种常用的标本采集方法。  (一)直视采集

正常细胞常规核型的标本制备实验_微量全血培养

正常细胞常规核型的标本制备可应用于:(1)进行核型分析;(2)与肿瘤核型进行对比研究。实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的

组织和胚胎固定及包埋实验

实验材料器官试剂、试剂盒多聚甲醛石蜡已传二甲苯仪器、耗材玻璃瓶培养箱巴斯德吸管包埋提环包埋模具实验步骤1.  将已解剖的器官或胚胎置于写有标签的20 ml 螺口玻璃小瓶中(经硅烷化处理的玻璃瓶专用于小量样品的处理),如入4℃新鲜配制的4%PFA,置4℃固定至所需时间止。 2.  于60℃烘箱中熔化石

组织和胚胎固定及包埋实验

实验材料 器官试剂、试剂盒 多聚甲醛石蜡已传二甲苯仪器、耗材 玻璃瓶培养箱巴斯德吸管包埋提环包埋模具实验步骤   将已解剖的器官或胚胎置于写有标签的20 ml 螺口玻璃小瓶中(经硅烷化处理的玻璃瓶专用于小量样品的处理),如入4℃新鲜配制的4%PFA,置4℃固定至所需时间止。2.  于60℃烘箱中熔化

正常细胞常规核型的标本制备_肿瘤细胞染色体标本制备

实验方法原理利用肿瘤细胞无限繁殖的特点,掌握其体外生长动态,取处于对数生长期的细胞便可获得丰富的分裂相。肿瘤细胞染色体异常包括两个方面:1.  结构异常  即在肿瘤细胞常出现的染色体畸变,包括双着丝点染色体、环状染色体、断裂的染色体、染色体裂隙及微小体等。2.  数目异常  由于肿瘤细胞分裂失去应有