离子交换层析的原理和过程

离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有负电荷的称之阳离子交换树脂;而带有正电荷的称之阴离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。......阅读全文

离子交换层析法提取IgG简介

  常用的离子交换剂有DEAE纤维素或QAE纤维素,以QAE-Sephadex最为理想,DE22、32、52也可应用。取QAE-SephadexA25或A50经酸处理并在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸盐缓冲液中平衡,将水分抽干,称湿重Ig加于10ml血清中,在室温30min后,离心或过滤

免疫层析技术原理和应用

  免疫层析检测技术是20世纪90年代出现的新兴免疫检测技术,其特点是应用抗原-抗体免疫学反应和层析反应,并以干片法试纸的形式,达到快速、准确地显色以检测待测物之目的。  在医用临床检测技术发展过程中,放射免疫方法是第一代,酶联免疫方法是第二代,而金标单克隆抗体快速检测试纸是正在发展的第三代。如今,

升华的过程和原理

升华是吸热过程,升华所吸收的焓叫升华焓(enthalpy of sublimation)或升华热(heat of sublimation)。同一物质的升华热永远比蒸发热的数值要大。在一定的大气压强下,固体物质的蒸气压与外压相等时的温度,称为该物质在这个压强下的升华点。在升华点时,不但在固体表面,而且

离子交换层析是DNA浓缩的方法吗

离子交换层析常用来分离浓缩蛋白质。是利用离子交换剂作为基质,使蛋白质依据其所带电荷不同被分离的一种柱层析技术

离子交换层析介质的技术数据

关于离子交换层析实验的介绍,对于常用到的层析介质的一些基本技术数据罗列如下: 离子交换介质名称

关于离子交换层析的基本信息介绍

  离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。  离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素) 和弱碱型的二乙基

关于离子交换层析法提取IgG的介绍

  常用的离子交换剂有DEAE纤维素或QAE纤维素,以QAE-Sephadex最为理想,DE22、32、52也可应用。取QAE-SephadexA25或A50经酸处理并在0.05mol/LpH7.5~8.6的磷酸盐缓冲液中平衡,将水分抽干,称湿重Ig加于10ml血清中,在室温30min后,离心或过滤

离子交换层析的洗脱操作注意事项

洗脱时应满足以下要求:①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不至于太拥挤。②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。洗脱馏份的分析按一定

关于离子交换层析的加样相关介绍

  层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度,所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围,同时要注意离子强度应低,可用透析、凝胶过滤或稀释法达此目的。样品中的不溶物应在透析后或凝胶过滤前,以离心法除去。为了达到满意的分离效果,上样量要适当,不要超过柱的负荷能力。柱的负荷能力可用交

关于薄层层析法的简介和制备过程介绍

  一、简介  薄层层析法以吸附层析使用最为普遍。常用的吸附剂为硅胶、氧化铝等。薄层层析和其他层析法一样,除吸附法外,也可进行分配、离子交换、分子排阻等机理的层析,即将铺制薄层的材料相应换为涂以固定相的载体、离子交换剂、凝胶等,其操作与吸附法基本相同。  二、过程  制板  铺制薄层板时,要求基底板

对角线层析的概念和原理

中文名称对角线层析英文名称diagonal chromatography定  义一种用于确定某一混合物中特定组分对光或某些化学处理(如氧化)等敏感性的双向层析技术。样品加样后先从一个方向进行层析分离,经光或化学等处理后,再以与第一次层析垂直方向进行第二次层析分离,则经过处理未被修饰的组分皆位于层析图

离子交换器的检测和控制原理

  强酸性阳树脂对水中各种阳离子的吸附顺序为:Fe3+>Al3+>Ca2+>Mg2+>Na+>H+;由此可知,水中金属离子Na+被吸附的能力最弱,所以当离子交换时树脂层的各种离子吸附层逐渐下移,H+.最后被其他阳离子置换下来,当保护层穿透时,首先泄漏的是最下层的Na+;因此监督阳离子交换器失效是以漏

离子交换色谱柱的原理和再生方法

离子交换色谱柱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团, 这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。如果流动相中存在其他带相反电荷的离子,按照质量作用定律,这些离子将与结合在固定相上的反离子进行交换。离子交换色谱柱基本原理: 离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法,其原理是指

离子交换色谱柱的原理和再生方法

  离子交换色谱柱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团,这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。如果流动相中存在其他带相反电荷的离子,按照质量作用定律,这些离子将与结合在固定相上的反离子进行交换。   离子交换色谱柱基本原理:   离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化

离子交换层析(Ion-Exchange-Chromatography-,IEC)(1)

简介离子交换层析(Ion Exchange Chromatography 简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。 1848年,Thompson 等人在研究土壤碱性物质交换过程中发现离子交换

离子交换层析(Ion-Exchange-Chromatography-,IEC)(3)

其次是对离子交换剂基质的选择。前面已经介绍了,聚苯乙烯离子交换剂等疏水性较强的离子交换剂一般常用于分离小分子物质,如无机离子、氨基酸、核苷酸等。而纤维素、葡聚糖、琼脂糖等离子交换剂亲水性较强,适合于分离蛋白质等大分子物质。一般纤维素离子交换剂价格较低,但分辨率和稳定性都较低,适于初步分离和大量制备。

离子交换层析法分离氨基酸

实验概要本实验介绍了离子交换柱层析法的基本操作技术,采用离子交换树脂分离了氨基酸。实验原理离子交换层析法主要是根据物质的解离性质的差异而选用不同的离子交换剂进行分离的方法。各种氨基酸分子的结构不同,在同一pH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依据亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效

离子交换层析(Ion-Exchange-Chromatography-,IEC)(2)

(2)离子交换剂的电荷基团根据与基质共价结合的电荷基团的性质,可以将离子交换剂分为阳离子交换剂和阴离子交换剂。阳离子交换剂的电荷基团带负电,可以交换阳离子物质。根据电荷基团的解离度不同,又可以分为强酸型、中等酸型和弱酸型三类。它们的区别在于它们电荷基团完全解离的pH 范围,强酸型离子交换剂在较大

离子交换层析(Ion-Exchange-Chromatography-,IEC)(4)

(2)平衡缓冲液离子交换层析的基本反应过程就是离子交换剂平衡离子与待分离物质、缓冲液中离子间的交换,所以在离子交换层析中平衡缓冲液和洗脱缓冲液的离子强度和pH 的选择对于分离效果有很大的影响。平衡缓冲液是指装柱后及上样后用于平衡离子交换柱的缓冲液。平衡缓冲液的离子强度和pH 的选择首先要保证

DNA亲和层析的过程

DNA亲和层析是利用亲和层析的原理与技术分离能与特定DNA序列相互作用的技术方法。总的过程包括两步,即:一、将某一类细胞中所有的蛋白质过含有该类细胞各种片段的DNA层析柱,用低浓度盐溶液洗去不与DNA作用的绝大多数蛋白,用中浓度盐溶液洗脱大部分与能DNA相互作用的蛋白。二、将第一步得到的能与DNA相

层析柱原理和使用方法

柱层析技术(Columnchromatography)又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相

层析柱原理和使用方法

柱层析技术又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中

离子交换色谱仪的离子交换过程

离子交换色谱仪的离子交换过程是离子交换树脂中的活性离子(如A+)与溶液中的样品离子(如B+)进行交换反应的过程。离子交换过程分五步进行:步骤一:B+从溶液扩散到树脂表面。步骤二:B+从树脂表面扩散到树脂内部的交换中心。步骤三:在树脂内部的交换中心处,B+与A+发生交换反应。步骤四:A+从树脂内部的交

反向层析的原理

扩散定律 扩散速度跟分子量的平方根成反比 因为分子量不同 所以扩散速度不通 根据这个可以层析一些物质

离子交换层析的加样与洗脱的介绍

  加样与洗脱  加样:  层析所用的样品应与起始缓冲液有相同的pH和离子强度,所选定的pH值应落在交换剂与被结合物有相反电荷的范围,同时要注意离子强度应低,可用透析、凝胶过滤或稀释法达此目的。样品中的不溶物应在透析后或凝胶过滤前,以离心法除去。为了达到满意的分离效果,上样量要适当,不要超过柱的负荷

PCR的作用原理和过程

 技术原理:DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径.双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝.在 聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链.因此,通过温度变化控制D

western-blotting-的过程和原理

什么理论过程?就是原理呗?WesternBlot原理、显色分类及操作步骤一、原理与Southern或Northern杂交方法类似,但WesternBlot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄

PCR的作用原理和过程

 技术原理:DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径.双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝.在 聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链.因此,通过温度变化控制D

离子交换原理

离子交换原理:离子交换是应用离子交换剂(最常见的是离子交换树脂)分离含电解质的液体混合物的过程。离子交换过程是液固两相间的传质(包括外扩散和内扩散)与化学反应(离子交换反应)过程,通常离子交换反应进行得很快,过程速率主要由传质速率决定。离子交换反应一般是可逆的,在一定条件下被交换的离子可以解吸(逆交

离子交换原理

关于离子交换过程的机理很多,其中,最适于水处理工艺的,是将离子交换树脂看作具有胶体型结构的物质,这种上观点认为,在离子交换树脂的高分子表面上有许多和胶体表面相似的双电层。也就是说这里有两层离子,紧邻高分子表面的一层离子称为内层离子,在其外面是一层符号相反的离子层。与胶体的命名法相似,我们常把和内层离