离子交换层析的原理和过程
离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有负电荷的称之阳离子交换树脂;而带有正电荷的称之阴离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。......阅读全文
用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭实验
实验方法原理 经过氯化铯梯度离心所纯化的 DNA 中的溴化乙锭可以通过离子交换层析法去除,随后则用乙醇沉淀去除氯化铯。实验材料 DNA 样品试剂、试剂盒 乙醇HClNaCl酚氯仿TETEN 缓冲液仪器、耗材 Dowex AG50W-X8实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液乙醇,HCl (1 mol/
用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭实验
经过氯化铯梯度离心所纯化的 DNA 中的溴化乙锭可以通过离子交换层析法去除,随后则用乙醇沉淀去除氯化铯。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理经过氯化铯梯度离心所纯化的 DNA 中的溴化乙锭可以通过离子交换层析法去除,随后则用乙醇沉淀去除氯化铯。实验材料DNA 样品试剂、试剂盒
用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭实验
实验方法原理 经过氯化铯梯度离心所纯化的 DNA 中的溴化乙锭可以通过离子交换层析法去除,随后则用乙醇沉淀去除氯化铯。 实验材料 DNA 样品
离子交换层析法(ion-exchange-chromatography)分离氨基酸
实验原理离子交换层析法主要是根据物质的解离性质的差异而选用不同的离子交换剂进行分离的方法。各种氨基酸分子的结构不同,在同一pH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依据亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效果。试剂和器材一、试剂与材料苯乙烯磺酸钠型树脂(强酸1×8,100—200目);2
软脂酸的生成的原理和过程
在原核生物(如大肠杆菌中)催化脂肪酸生成的酶是一个由7种不同功能的酶与一种酰基载体蛋白(acyl carrier protein,ACP)聚合成的复合体。在真核生物催化此反应是一种含有双亚基的酶,每个亚基有7个不同催化功能的结构区和一个相当于ACP的结构区,因此这是一种具有多种功能的酶。不同的生物此
离子交换色谱柱原理
离子交换色谱柱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团,这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。 如果流动相中存在其他带相反电荷的离子,按照质量作用定律,这些离子将与结合在固定相上的反离子进行交换。 离子交换色谱柱基本原理: 离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化
薄层层析法原理
薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又可用来精制样品,此法特别适用于挥发性较小或较高温度
薄层层析法原理
层析须在两相系统间进行。一相是固定相,需支持物,是固体或液体。另一相为流动相,是液体或气体。当流动相流经固定相时,被分离物质在两相间的分配,由平衡状态到失去平衡到又恢复平衡,即不断经历吸附和解吸的过程。随着流动相不断向前流动,被分离物质间出现向前移动的速率差异,由开始的单一区带逐渐分离出许多区带
薄层层析法原理
层析须在两相系统间进行。一相是固定相,需支持物,是固体或液体。另一相为流动相,是液体或气体。当流动相流经固定相时,被分离物质在两相间的分配,由平衡状态到失去平衡到又恢复平衡,即不断经历吸附和解吸的过程。随着流动相不断向前流动,被分离物质间出现向前移动的速率差异,由开始的单一区带逐渐分离出许多区带,这
纸层析分离原理
纸层析分离是以滤纸为介质,滤纸纤维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有机溶剂作为流动相。展开时,有机溶剂在滤纸上流动,样品中各物质在两相之间不断地进行分配,由于各物质的分配系数不同,移动速度不同,从而达到分离的目的。纸层析分离常与离心机分离技术结合使用。
硅胶柱层析原理
硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离,一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。[编辑本段]硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系
斑点免疫层析试验原理
原理 斑点免疫层析试验(dotimmunochromatographicassay,DICA)简称免疫层析试验(ICA),也以硝酸纤维素膜为载体,但利用了微孔膜的毛细血管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移,犹如层析一般
纸层析分离原理
纸层析分离是以滤纸为介质,滤纸纤维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有机溶剂作为流动相。展开时,有机溶剂在滤纸上流动,样品中各物质在两相之间不断地进行分配,由于各物质的分配系数不同,移动速度不同,从而达到分离的目的。纸层析分离常与离心机分离技术结合使用。
层析技术概念原理
层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成:一是固定相,另一是流动相。当待分离的混合物随流动相通过固定相时,由于各组分的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配(含量比)不同,且随流动相向前移动,各组分不断地在两相
柱层析硅胶原理
硅胶层析法分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 极性较大的物质与硅胶作用强,保留时间长,极性弱的物质与硅胶作用弱,保留时间短,物质在固定相与流动相间通过反复的吸附、解吸过程,得以分离。
氨基酸单向纸层析实验原理和步骤(2)
(4)滤纸:层析滤纸由高纯度棉花制成,要求滤纸要清洁,质地均一,厚薄一致,纤维松紧度适中,具有一定的机械强度,要被溶剂所饱和。不同型号的滤纸,其厚薄程度、纤维松紧度各不相同,因此,滤纸纤维结合水的量不一样,两相的体积比也就不同,Rf也不同;另外,滤纸的杂质也会影响Rf,必要时进行预处理(可用0.01
氨基酸单向纸层析实验原理和步骤(1)
一、实验目的:1、通过氨基酸的分离,学习并掌握纸层析的原理和操作技术;2、掌握分配层析法;3、掌握影响分配系数的因素。层析分离技术是利用被分离的混合物中各组分物理化学的性质(分子的形状和大小、分子极性、吸附力、分子亲和力、分配系数等)的不同,使各组分以不同程度分布在两相(流动相和固定相)中,当流动相
纸层析和柱层析薄层层析高效液相层析各有什么特点
纸层析:英文为thin layer chromatography 又称薄层色谱,色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种重要实验技术,属固—液吸附色谱,兼备了柱色谱和纸色谱的优点,一方面适用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离;另一方面在制作薄层板时,把吸附层加厚加大,因此,又
离子交换剂的水处理过程简介
(1)再生过程 在钠离子交换过程中,当软水出现了硬度,且残留硬度超过水质标准规定时,则认为钠离子交换剂已经失效。为了恢复其交换能力,就需要对交换剂进行再生(或还原)。再生过程是使含有大量钠离子的氯化钠(NaCl)溶液通过失效的交换剂层恢复其交换能力的过程。此时,钠离子又被离子交换剂所吸着,而交
关于离子交换树脂的预处理过程
超纯水机新树脂常含有反应溶剂、未参加反应的物质和少量低分子量的聚合物、铁、铅、铜等杂质。当树脂与水、酸、碱或其它溶液相接触时,上述可溶性杂质就会转入溶液中,在使用初期污染出水水质。因此,新树脂在投运前要进行预处理,转换为指定的离子型式。 阴离子交换树脂的预处理步骤,首先用清水对
钙调蛋白的-DEAE-SEPHADEX-A50-阴离子交换层析实验
试剂、试剂盒 DEAE Sephadex* A-50(干粉)浓 NaOH透析存留物缓冲液 B仪器、耗材 超速离心机玻璃层析柱蠕动泵、紫外(UV) 检测器、分部收集器和砌硅玻璃管实验步骤 材料和设备DEAE Sephadex* A-50(干粉)(Pharmacia Biotech,Inc.)浓 NaO
怎样利用离子交换柱层析法分离不同的蛋白质
离子交换柱层析法的核心在于不同的蛋白质的等电点不同所以说,利用离子交换柱层析法分离不同的蛋白质其实就是利用不同蛋白质不同的等电点来分离。比如目的蛋白等电点是5,那么在环境pH为8.0的情况下,目的蛋白可以结合阴离子交换层析,而杂蛋白可能不能结合或者结合能力比目的蛋白弱。通过不同的盐浓度的洗脱让结合能
离子交换层析可用于哪些种类蛋白质的分离
离子交换层析是利用蛋白质在不同PH带不同种电荷的方法,利用离子交换的方法分离蛋白的。离子交换内的介质一般是树脂,阳离子交换型的,使用前树脂先用碱处理成钠型,将氨基酸混合液(pH=2-3)上柱,pH=2-3时,氨基酸主要以阳离子形式存在,与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上,再用洗脱剂洗脱。不同
怎样利用离子交换柱层析法分离不同的蛋白质
离子交换柱层析法的核心在于不同的蛋白质的等电点不同所以说,利用离子交换柱层析法分离不同的蛋白质其实就是利用不同蛋白质不同的等电点来分离。比如目的蛋白等电点是5,那么在环境pH为8.0的情况下,目的蛋白可以结合阴离子交换层析,而杂蛋白可能不能结合或者结合能力比目的蛋白弱。通过不同的盐浓度的洗脱让结合能
钙调蛋白的-DEAE-SEPHADEX-A50-阴离子交换层析实验
纯化钙调蛋白的下一步操作是用 DEAE 树脂进行阴离子交换层析。这步操作利用了以下事实,即钙调蛋内是一种强酸性蛋白因而在中性或微碱性 pH 条件下带有大量的净负电荷。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒DEAE Sephadex* A-50(干粉)浓 NaOH透析存留物缓
关于糖化血红蛋白检测方法—离子交换层析的介绍
分手工和仪器两种。手工微柱操作受到人工因互影响,可能会洗脱不完全或过度洗脱,并受外界环境温度的影响,而某些红蛋白如HbF异常增加时,也会与糖化血红蛋白同时洗脱肉而使结果产生偏差。采用微柱法离子交换层析和梯度洗脱胎技术可分离血红蛋白的变异体与亚型,除可测定糖化血红蛋白外,还可同时检测出HbS与Hb
高频直线振动筛的原理和过程
发展过程 我国筛分机械的发展是本世纪近50年的事情,大体上可分为三个阶段。 (1)自行研制阶段: (2)进步阶段:进入改革开放的80年代,我国筛分机的发展也进入了一个新的发展阶段。 (3)仿制阶段:这期间,仿制了前苏联的ГУП系列圆振动筛、BKT-11、BKT-OMZ型摇动筛;波兰的WK
关于离子交换色谱的原理简介
离子色谱分析法出现在20世纪70年代,80年代迅速发展起来,以无机、特别是无机阴离子混合物为主要分析对象。 离子交换色谱利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。离子交换色谱的固定相一般为离子交换树脂,树脂分子结构中存在许多可以电离的活性中心,待分离组分中的离子会与这些活性中
离子交换器的工作原理
工作原理就是离子的交换。 运行时:阳树脂(H-R)+(M+)→(M-R)+(H+) 阴树脂(OH-R)+(X-)→(X-R)+(OH-) 其中M+为金属离子,X-为阴离子。再生过程为其逆过程。 离子交换器的失效控制 离子交换除盐水处理最简单的流程为阳床-阴床组成的一级复床除盐系统。有的
离子交换的基本原理
离子交换是应用离子交换剂(最常见的是离子交换树脂)分离含电解质的液体混合物的过程。离子交换过程是液固两相间的传质(包括外扩散和内扩散)与化学反应(离子交换反应)过程,通常离子交换反应进行得很快,过程速率主要由传质速率决定。离子交换反应一般是可逆的,在一定条件下被交换的离子可以解吸(逆交换),使离子交