关于线粒体膜电位变化的检测

在凋亡研究的早期,从形态学观测上线粒体没有明显的变化。随着凋亡机制研究的深入,发现线粒体凋亡也是细胞凋亡的重要组成部分,发生很多生理生化变化。例如,在受到凋亡诱导后线粒体转膜电位会发生变化,导致膜穿透性的改变。MitoSensorTM,一个阳离子性的染色剂,对此改变非常敏感,呈现出不同的荧光染色。正常细胞中,它在线粒体中形成聚集体,发出强烈的红色荧光。凋亡细胞中,因线粒体穿膜电位的改变,它以单体形式存在于细胞液中,发出绿色荧光。用荧光显微镜或流式细胞仪可清楚地分辨这两种不同的荧光信号。CLONTECH公司的ApoAlert Mitochondrial Membrane Sensor Kit就采用这种原理来检测线粒体膜电位的变化。但是,这种方法不能区分细胞凋亡或其他原因导致的线粒体膜电位的变化。......阅读全文

膜电位是如何产生的?

一些关键离子在细胞内外的不均等分布及选择性的透膜移动,是形成膜电位的基础。每种离子的跨膜渗透都是相对独立的,这种现象又叫做离子运动的独立性法则。产生膜电位的重要离子主要有Na+,K+和A-(带负电荷的细胞内的大蛋白质分子,仅存在细胞内,且膜对它无通透性)。其他离子,如Ca2+、Cl-、Mg2+等在大

膜电位是如何产生的?

一些关键离子在细胞内外的不均等分布及选择性的透膜移动,是形成膜电位的基础。每种离子的跨膜渗透都是相对独立的,这种现象又叫做离子运动的独立性法则。产生膜电位的重要离子主要有Na+,K+和A-(带负电荷的细胞内的大蛋白质分子,仅存在细胞内,且膜对它无通透性)。其他离子,如Ca2+、Cl-、Mg2+等在大

膜电位的研究与发现

1791年意大利解剖学家加伐尼(L.Galvani)偶然发现,如果将蛙腿的肌肉置于铁板上再用铜钩钩住蛙的脊髓,当铜钩与铁板接触时肌肉就会发生收缩,他把这种现象归因于动物电。1902年德国生理学家伯恩斯坦(Julius Bernstein)接受了德国化学家奥斯特瓦尔德(W.Ostwald)的膜通透性理

膜电位的概念和起源

膜电位(Membrane Potential)通常是指以膜相隔的两溶液之间产生的电位差。一般是指细胞生命活动过程中伴随的电现象,存在于细胞膜两侧的电位差。膜电位在神经细胞通讯的过程中起着重要的作用。1791年意大利解剖学家加伐尼(L.Galvani)偶然发现,如果将蛙腿的肌肉置于铁板上再用铜钩钩住蛙

膜电位的定义和作用

膜电位(Membrane Potential)通常是指以膜相隔的两溶液之间产生的电位差。一般是指细胞生命活动过程中伴随的电现象,存在于细胞膜两侧的电位差。膜电位在神经细胞通讯的过程中起着重要的作用。1791年意大利解剖学家加伐尼(L.Galvani)偶然发现,如果将蛙腿的肌肉置于铁板上再用铜钩钩住蛙

线粒体损伤与检测方法研究进展

作者:左钱飞,张海献,鲁鹏飞  摘 要:线粒体是细胞活动的“能源工厂”,在各种致病因素作用下线粒体极易出现各种结构和功能损伤,这在疾病的发展中起着十分重要的影响,文章就线粒体结构和功能损伤及其检测方法作一综述。   关键词:线粒体损伤;mtDNA;凋亡   Abstract:Mitochondria

关于细胞凋亡检测—若丹明(-Rh123)-染色法的基本介绍

  细胞生活状态下,胞膜上的钠 -钾泵、钙泵等的作用,使细胞膜内外维持着不同离子的浓度梯度,包括Na + , K+ ,Cl  -,Ca2 + 等,形成细胞膜电位。FCM 可以检测亲脂性离子荧光染料在胞膜内外的分布,来测量膜电位的高低,以评价细胞的活力。Rh123 是一种亲脂性阳离子荧光染料,对细胞膜

关于若丹明(-Rh123)-染色法检测细胞凋亡的介绍

  细胞生活状态下,胞膜上的钠 -钾泵、钙泵等的作用,使细胞膜内外维持着不同离子的浓度梯度,包括Na + , K+ ,Cl  -,Ca2 + 等,形成细胞膜电位。FCM 可以检测亲脂性离子荧光染料在胞膜内外的分布,来测量膜电位的高低,以评价细胞的活力。Rh123 是一种亲脂性阳离子荧光染料,对细胞膜

关于抗线粒体2型抗体检测的标本采集介绍

  1.患者准备  检查前一天晚上8点后避免进食和剧烈运动。患者采血前最好休息15分钟以上。  2.标本类型  常规采集患者空腹静脉血液4ml置于无抗凝剂的一次性真空采血管中备用。  3.标本运送  标本采集后应明确标识并由专人及时送检,并注意运送过程中的生物危害性。  4.标本处理  (1)标本置

单个神经元O2消耗量、细胞内Ca2+浓度和线粒体膜电位的...

单个神经元O2消耗量、细胞内Ca2+浓度和线粒体膜电位的同时记录Abstract:In order to determine the sequence of cellular processes in glutamate toxicity, we simultaneously recorded O2

共聚焦激光扫描显微镜的应用

膜电位 以往测定膜电位多用微电极直接插入法测量,不仅操作麻烦,而且对细胞也是一种损伤。共聚焦激光扫描显微镜则可利用荧光探针在细胞膜内外分布的差异测出膜电位,不但可以观察细胞膜电位的变化结果,更重要的是可以用于连续监测膜电位的迅速变化。膜电位荧光探针根据其对膜电位变化反应速度的快慢分为快、慢两类探针,

关于线粒体基质的基本介绍

  线粒体是真核生物具有的用于有氧呼吸的细胞器。  线粒体基质是线粒体中由线粒体内膜包裹的内部空间,其中含有参与三羧酸循环、脂肪酸氧化、氨基酸降解等生化反应的酶等众多蛋白质,所以较细胞质基质黏稠。苹果酸脱氢酶是线粒体基质的标志酶。线粒体基质中一般还含有线粒体自身的DNA(即线粒体DNA)、RNA和核

关于线粒体病的病因分析

  线粒体是细胞内提供能量的细胞器,人类mtDNA是长16569bp的环状双链分子,分轻链和重链,含37个基因,主要编码呼吸链及与能量代谢有关的蛋白。mtDNA缺失或点突变使编码线粒体氧化代谢过程必需的酶或载体发生障碍,糖原和脂肪酸等不能进入线粒体充分利用和产生足够的ATP,导致能量代谢障碍和产生复

关于线粒体疾病的病因分析

  线粒体是细胞内提供能量的细胞器,人类mtDNA是长16569bp的环状双链分子,分轻链和重链,含37个基因,主要编码呼吸链及与能量代谢有关的蛋白。mtDNA缺失或点突变使编码线粒体氧化代谢过程必需的酶或载体发生障碍,糖原和脂肪酸等不能进入线粒体充分利用和产生足够的ATP,导致能量代谢障碍和产生复

关于线粒体基质的结构介绍

  线粒体基质的结构 :线粒体具有内、外两层膜,内膜的某些部位向线粒体的内腔折叠形成嵴,嵴使内膜的表面积大大增加。嵴的周围充满了液态的基质。线粒体的内膜上和基质中含有许多种与有氧呼吸有关的酶。一般的说,线粒体均匀地分布在细胞质中。但是,活细胞中的线粒体往往是可以定向移动到代谢比较旺盛的部位。肌细胞内

关于线粒体病的检查介绍

  (一)实验室检查  1.血生化检查  (1)血乳酸、丙酮酸最小运动量试验:约80%的病人运动后10分钟血乳酸和丙酮酸仍不能恢复正常,为阳性;线粒体脑肌病患者CSF乳酸含量也增高;  (2)线粒体呼吸链复合酶活性降低。  2.mtDNA分析  (1)CPEO和KSS为mtDNA片段缺失,可能发生在

细胞凋亡检测实验——线粒体膜势能的检测

实验方法原理线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA 断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt 崩溃,则细胞凋亡不可逆转。 线粒体跨膜电位的存在,使

综述:细胞凋亡(四)

5 线粒体在细胞凋亡作用中的进一步证据    (1)若将纯化的正常的线粒体与纯化的细胞核在一起保温,并不导致细胞核的变化。但若将诱导生成PT孔道的线粒体与纯化的细胞核一同保温,细胞核即开始凋亡变化。(2)细胞死亡调节蛋白不论是抑制死亡的bcl-2家族还是促进细胞死亡的Bax家族均以线粒体作为靶细胞器

如何检测线粒体内的ROS

活性氧检测试剂盒是利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测的。DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知

关于抗线粒体2型抗体检测的注意事项介绍

  1.严重溶血、脂血标本,细菌污染标本可对检测结果造成干扰;不采用装有抗凝剂的采血管。  2.标本应及时检测。如有特殊情况,分离血清,并于4℃或-20℃保存,以免影响检测结果。标本中不能混入血细胞、纤维蛋白丝、尘埃和气泡,否则会影响其检测结果。

关于肝细胞的线粒体的介绍

  肝细胞的线粒体很多,每个细胞大约有1000个左右,遍布于胞质内。肝小叶不同部位肝细胞内线粒体的大小和形态不完全一致,在正常生理条件下,多为圆形和卵圆形,直径0.4-0.8μm。线粒体的共同基本形态结构特征是外被双层界膜--外界膜和内界膜,内界膜向线粒体内部伸展转折,形成许多嵴。内界膜将线粒体分隔

细胞凋亡检测技术与方法

细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间,但由于它在保证多细胞

细胞凋亡检测技术与方法

细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间,但由于它在保证多

细胞凋亡检测技术与方法

细胞凋亡(Apoptosis),又称细胞程序性死亡(PCD: Programmed Cell Death),是指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命的过程。它是一个主动的,高度有序的,基因控制的,一系列酶参与的过程。细胞凋亡概念提出至今还不到30年的时间,但由于它在保证多

膜电位与动作电位

静息时,神经元细胞膜使细胞内的电位,比细胞外的电位“负”(内负外正的细胞膜电位常为-58 mV),去极化时细胞膜电位常超过0mV,然后很快恢复;有时细胞膜内电位能比细胞膜外电位低60 mV以上(超极化)。静息电位时,神经元可通过钠—钾- ATP酶等,把细胞外低水平的钾离子逆向摄人、浓集在细胞内,把钠

胚胎线粒体功能检测重要么

  随着三代试管婴儿在我国的不断普及,越来越多的人开始认识这个新技术,很多“久经失败”的生育困难夫妇也开始尝试这种新的试管婴儿技术,我们常说的PGS,中文名字叫“胚胎植入前染色体病筛查”,它是在胚胎移植入子宫前,对胚胎进行全面的染色体检查,然后挑选染色体正常的胚胎植入子宫。PGS技术在国内外很多生殖

关于线粒体疾病的检查方式介绍

  (一)实验室检查  1.血生化检查  (1)血乳酸、丙酮酸最小运动量试验:约80%的病人运动后10分钟血乳酸和丙酮酸仍不能恢复正常,为阳性;线粒体脑肌病患者CSF乳酸含量也增高;  (2)线粒体呼吸链复合酶活性降低。  2.mtDNA分析  (1)CPEO和KSS为mtDNA片段缺失,可能发生在

关于线粒体肌病的基本介绍

  线粒体脑肌病(ME)是一组少见的线粒体结构和(或)功能异常所导致的以脑和肌肉受累为主的多系统疾病。其肌肉损害主要表现为骨骼肌极度不能耐受疲劳,神经系统主要表现有眼外肌麻痹、卒中、癫痫反复发作、肌阵挛、偏头痛、共济失调、智能障碍以及视神经病变等,其他系统表现可有心脏传导阻滞、心肌病、糖尿病、肾功能

关于抗线粒体抗体的基本介绍

  抗线粒体抗体(AMA)由Maokey等于1958年首次于原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者血清发现,是一种无器官特异性也无种属特异性的自身抗体,以后的研究发现,AMA也见于其他自身免疫病患者。AMA的靶抗原是线粒体膜上的多种蛋白,成分复杂,现知有

线粒体基质的线粒体结构

  线粒体基质  线粒体基质是线粒体中由线粒体内膜包裹的内部空间,其中含有参与三羧酸循环、脂肪酸氧化、氨基酸降解等生化反应的酶等众多蛋白质,所以较细胞质基质黏稠。苹果酸脱氢酶是线粒体基质的标志酶。线粒体基质中一般还含有线粒体自身的DNA(即线粒体DNA)、RNA和核糖体(即线粒体核糖体)。  线粒体