重组蛋白的定义
其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的 宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前重组蛋白的生产主要有四大系统;1.原核表达系统:最常用的大肠杆菌蛋白表达,真核表达系统如酵母,哺乳动物细胞蛋白表达(常用的细胞CHO,HEK293)及、昆虫细胞蛋白表达系统。重组蛋白的产生尚可利用 转基因动物的 乳腺或者植物产生,产生的重组蛋白作为生物制药的产物,在医学中作用显著。利用基因工程技术,可以使细胞或者动物本身变成“批量生产药物的工厂”。 以利用转基因动物的乳腺表达重组蛋白为例:其方法是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的 启动子等调控组件重组在一起,通过 显微注射等方法,导入哺乳动物(哺乳动物才会 泌乳)的受精卵中,然后,将受精卵送入母体内,使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋......阅读全文
关于转座重组的基本介绍
1944年,McClintock(1983年诺贝尔生理学或医学奖获得者)在研究玉米基因时发现:有些DNA片段可以在染色体DNA中移动位置。现已阐明:基因组DNA巾存在一些非游离的、能自复制或自剪切、并能以相同或不同拷贝在基因组中或基因组间移动位置的功能性片段,被称为转座元件( transposa
关于重组子筛选的介绍
根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。至今使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β -半乳糖苷酶的氨基
重组DNA技术的基本定义
重组DNA技术是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。
重组载体疫苗的功能特点
将编码某一蛋白抗原的基因转入减毒的病毒或细菌而制成的疫苗。
重组乙肝疫苗的定义
重组乙肝疫苗:是以基因工程技术研制的第二代乙型肝炎疫苗(HB),是基因工程疫苗中最成功的例子。
重组体的应用领域
重组体可以用于导入合适的宿主细胞,在宿主细胞内可随宿主细胞的繁殖而扩增或表达,产生所需要的目的基因产物。
菌落PCR,快速鉴定重组质粒
质粒快速鉴定 试剂: Protoplasting buffer: 30mM Tris-HCl, pH8.0 0.33ml/1.0M 5mM EDTA 0.1ml/0.5M
重组毕赤酵母的表达
实验概要本文介绍了重组毕赤酵母目的基因表达的方法及条件,为毕赤酵母表达因素给予指导,但对于任何表达系统,最优化条件因表达蛋白的特征而不同。实验步骤1. Mut 胞内或分泌表达:为检测表达条件是否有效,可培养GS115β-gal (Mut )(胞内表达-半乳糖苷酶)。亲代载体转化GS115 或KM71
重组克隆筛选(酶切鉴定)
【实验目的】1.掌握质粒提取的基本方法的原理;2.学习和掌握限制性内切酶的使用方法。【实验原理】重组克隆的筛选和鉴定是基因工程中的重要环节之一。不同的克隆载体和相应的宿主系统,其重组克隆的筛选和鉴定方法不尽相同。从理论上说,重组克隆的筛选是排除自身环化的载体、未酶解完全的载体以及非目的DNA片断插入
重组DNA技术的基本定义
重组DNA技术是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序,也称为分子克隆技术。因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。
简述DNA重组的机制内容
遗传重组由许多不同的酶催化。重组酶是DNA重组过程中催化链转移步骤的关键酶。 RecA是在大肠杆菌中发现的主要重组酶,负责修复DNA双链断裂(DSBs)。在酵母和其它真核生物中,修复DSB需要两种重组酶。 RAD51蛋白是有丝分裂和减数分裂重组所必需的,而DNA修复蛋白DMC1对减数分裂重组具有
DNA重组疫苗的功能特点
用基因工程新技术把控制抗原合成的基因插入到某种微生物细胞内的基因中,使该微生物产生抗原而制成疫苗。例如把乙型肝炎病毒的抗原基因插入酵母菌中,让酵母菌生产能预防肝炎的乙型肝炎疫苗。
基因重组的应用——基因诊断
通过使用基因芯片分析人类基因组,可找出致病的遗传基因。癌症、糖尿病等,都是遗传基因缺陷引起的疾病。医学和生物学研究人员将能在数秒钟内鉴定出Z终会导致癌症等的突变基因。借助一小滴测试液,医生们能预测药物对病人的功效,可诊断出药物在ZL过程中的不良反应,还能当场鉴别出病人受到了何种细菌、病毒或其他微生物
DNA重组修复的相关介绍
此过程也叫复制后修复。对于DNA双链断裂损伤,细胞必须利用双链断裂修复,即重组修复,通过与姐妹染色单体正常拷贝的同源重组来恢复正确的遗传信息。 [1] 人重组修复中原损伤没有除去,但若干代后可逐渐稀释,消除其影响。所需要的酶包括与重组及修复合成有关的酶,如重组蛋白A、B、C及DNA聚合酶、连接酶
基因的转移与重组(一)
遗传型变异还可通过两个不同性质细菌之间发生遗传物质的转移和重组而实现。在基因转移中,提供DNA的细菌为供体,而接受DNA的细菌是受体。基因转移后获得重组的子代,即具有供体与受体菌二者的主要特性。实现基因转移需要两个基本条件:一是全部或部分供体菌的基因相应进入受体菌;二是在受体菌中形成重组(杂交)
基因重组应用——转基因技术
基因重组中转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因,也可以是人工合成指定序列的DNA片段。基因重组DNA片段被转入特定生物中,与其本身的基因组进行重组,再从重组体中进行数代的人工选育,从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。该技
概述噬菌体的基因重组
历史:1936年F. M. Burnet发表了噬菌体能产生突变体,其噬菌斑的外形和野生型的有明显区别,可惜的未能引起重视,以致噬菌体遗传学延迟了十年才得以建立。 1946年第11届冷泉港学术讨论会上,在宣布一基因一酶学说的胜利,及Ledernerg、Tatum细菌杂交实验报告的同时,Hersh
基因的转移与重组(二)
二、转导 以噬菌体为媒介,把供细菌的基因转移到受体菌内,导致后者基因改变的过程称为转导。 当噬菌体在细菌中增殖并裂解细菌时,某些DNA噬菌体(称为普遍性转导噬菌体)可在罕见的情况下(约105~107次包装中发生一次),将细菌的DNA误作为噬菌体本身的DNA包入头部蛋白衣壳内。当裂解细菌后,释
简述重组修复的主要步骤
1.复制 含有TT或其他结构损伤的DNA仍然可以正常的进行复制,但当复制到损伤部位时,子代DNA链中与损伤部位相对应的位置出现切口,新合成的子链比未损伤的DNA链要短。 2.重组 完整的母链与有缺口的子链重组,缺口由母链来的核苷酸片段弥补。 3.再合成 重组后母链中的缺口通过DNA多聚
关于重组修复的基本介绍
重组修复(recombination repairing):复制含有嘧啶二聚体或其它结构损伤的DNA,但当复制到损伤的部位时,子代DNA链中与损伤部位相对应的部位出现缺口,新合成的子链比未损伤的DNA链要短一些。完整的母链与有缺口的子链重组,缺口由母链来的核苷酸片段弥补。合成重组后,母链中的缺口
同源重组的概念和过程
同源重组(Homologous Recombination) 是指发生在非姐妹染色单体(non-sister chromatid) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化,如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、Rec
日本石化业务战略重组提速
日本住友化学公司2月1日表示,由于国内市场需求低迷,业绩持续恶化,公司决定对经营战略进行调整,不再在本土进行乙烯生产。据此,2015年秋季检修之前,住友化学将关闭其位于千叶的41.5万吨/年乙烯工厂,并考虑关闭位于该基地的其他乙烯衍生物装置。 无独有偶,三菱化学公司也表示
重组质粒的电转化法
首先,将0.1cm的电击杯放在冰上进行预冷,冻存的感受态细胞取出冰上溶解。2然后,用100微升的感受态细胞加入1微升纯化的连接液,或者加入0.5微升未纯化的连接液,小心混匀,在冰上放置二十分钟。3然后,将混合液加入预冷的电击杯中,注意擦干杯外的水,防止电火花,放入电转化仪的反应槽内,接上电源。4然后
CreloxP-基因重组技术
re-loxP 是一种位点特异的基因重组技术,被广泛应用于特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位,在真核生物和原核生物中均有广泛应用。Cre-loxP 的基本原理Cre 蛋白是一种重组酶,是causes recombination的缩写,于1981 年从 P1 噬菌体中被发现,属于 λIn
基因重组的定义和原理
基因重组指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。其发生在二倍体生物的每一个世代中。每条染色体的两份拷贝在有些位置可能具有不同的等位基因,通过互换染色体间相应的部分,可产生与亲本不同的重组染色体。重组来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份拷贝紧密
一种基于玉米重组蛋白的实验性阿尔兹海默症疫苗
阿尔茨海默症(AD)是老年痴呆症的最常见形式。根据国际阿尔茨海默症协会的数据显示,每3秒钟,全球就有一位新的AD患者产生。预计到2050年,全世界AD患者将增加至1.5亿以上。我国每年至少有30万新发病例,目前患者数已超过1000万,占世界AD患者总人口的1/4,而这一数字还在随人口老龄化攀升。
我国学者发现噬菌体裂解酶的重组蛋白V12CBD的多重功能
近日,中国科学院武汉病毒研究所的一项研究发现来源于噬菌体裂解酶的重组蛋白V12CBD具有降低金黄色葡萄球菌毒力与增强免疫清除的多重功能,为研究治疗包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)在内的超级耐药细菌感染药物提供了新的思路,研究成果在线发表于《欧洲分子生物学组织杂志》(The EMBO Jo
微生物所等研发出新型“二合一”猴痘病毒重组蛋白疫苗
近日,中国科学院微生物研究所高福团队在《自然-免疫学》(Nature Immunology)上,发表了题为Rational design of a ‘two-in-one’ immunogen DAM drives potent immune response against monkeypox
微生物所等研发出新型“二合一”猴痘病毒重组蛋白疫苗
近日,中国科学院微生物研究所高福团队在《自然-免疫学》(Nature Immunology)上,发表了题为Rational design of a ‘two-in-one’ immunogen DAM drives potent immune response against monkeypox v
生化与细胞所研制出一种新的靶向端粒酶的重组抗癌蛋白
最近,国际学术期刊Gastroenterology在线发表了中科院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所赵慕钧研究组完成的最新研究成果:HIV-Tat–mediated Delivery of an LPTS Functional Fragment Inhibits Telo