亚克隆的定义

从一个克隆的DNA片段上分割几个区域,分别将之克隆到新的载体上,获得一系列新的重组子。......阅读全文

亚克隆的定义

从一个克隆的DNA片段上分割几个区域,分别将之克隆到新的载体上,获得一系列新的重组子。

目的基因的亚克隆

            实验方法原理 亚克隆的基本过程包括:(1)目的DNA片段和载体的制备;(2)目的DNA片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。 实验材料

亚克隆的技术特点

亚克隆技术:限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的DNA水解酶,该类酶是体外剪切基因片段的重要工具。

目的基因的亚克隆

实验材料 E.coli JM109试剂、试剂盒 牛肉膏胰蛋白胨NaCl微量细菌基因组抽提试剂盒BamH IXho1 核酸内切酶凝胶电泳回收试剂盒仪器、耗材 高速台式冷冻离心机水平电泳仪漩涡混合仪紫外检测仪凝胶成像分析系统微量移液器及吸头

目的基因的亚克隆

目的基因的亚克隆可应用于:(1)进一步分析目的基因;(2)基因重组。实验方法原理亚克隆的基本过程包括:(1)目的DNA片段和载体的制备;(2)目的DNA片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。实验材料E.coli JM109试剂、试剂盒牛肉膏胰蛋白胨NaCl微量细菌基因组抽提试剂盒

目的基因的亚克隆

实验题目 :目的基因的亚克隆一、实验目的1、掌握细菌基因组提取的方法和原理。2、掌握限制性核酸内切酶处理基因组及其结果分析。3、掌握基因片段回收的方法。二、实验原理细菌基因组的提取:通过碱法或者酶法裂解细菌之后,可以将胞内的核酸和蛋白质全释放出来。DNA溶于1mol/L的NaCl中,不溶于 0.

目的基因的亚克隆

目的基因的亚克隆所谓亚克隆就是对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆,其目的在于对目的DNA进行进一步分析,或者进行重组改造等。    亚克隆的基本过程包括:(1)目的DNA片段和载体的制备;(2)目的DNA片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。 一、试剂准备1.LB液体培养基:

亚克隆的基本过程

亚克隆的基本过程包括:(1)目的DNA片段和载体的制备;(2)目的DNA片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。

亚克隆技术

一、目的与原理限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的DNA水解酶,该类酶是体外剪切基因片段的重要工具。实验主要通过EcoR Ⅰ,Hind Ⅲ两种限制性内切酶对λ DNA的单切酶、双切酶及部分酶切的操作,掌握内切酶的实验操作技术。二、材料与试剂1.材料:λDNA2.仪器:离心机,恒温

同源克隆的定义

中文名称同源克隆英文名称homologous cloning定  义将一个个体的细胞核植入同一个体的去核的卵母细胞中以此获得遗传性质与亲本一致的胚胎的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

cDNA克隆的定义

中文名称cDNA克隆英文名称cDNA cloning定  义从基因的转录产物(如mRNA)开始,逆转录合成互补DNA(cDNA),然后重组入载体,经过复制,筛选得到单一种cDNA分子的技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

亚家族的定义

中文名称亚家族英文名称subfamily定  义基因或蛋白质家族中具有序列相似性较高的一组基因或蛋白质。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),总论(二级学科)

DNA片段的亚克隆实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 CIPdNTPDNA聚合酶T4聚合酶DTTATP仪器、耗材 水浴锅电泳仪培养箱实验步骤 1.  在20 μl 反应体积内用合适的酶完全消化DNA。75℃加热15 min,灭活酶。如若无需进一步的酶促处理,接歩骤6。2.  如果5’磷酸需要去除,加入2 μl 10×CIP

DNA片段的亚克隆实验

基本方案 凝胶块中DNA连接             实验材料 DNA 试剂、试剂盒

目的基因的亚克隆2

2. 连接产物的转化⑴ 取100μl贮存于-70℃钙化菌,冰浴化开;⑵ 加入适量连接产物(一般不超过10μl,轻轻混匀,冰浴20min;⑶ 于42℃热休克90s,迅速转移至冰浴中,继续冰浴2-3min;⑷ 加入LB液体培养基200μl,于37℃缓摇孵育45min;⑸ 将培养物适量涂于1.5%琼脂LB

目的基因的亚克隆3

2. 调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,最后在72℃ 保温7min。3. 结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。4.PC

目的基因的亚克隆1

所谓亚克隆就是对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆,其目的在于对目的DNA进行进一步分析,或者进行重组改造等。亚克隆的基本过程包括:(1)目的DNA片段和载体的制备;(2)目的DNA片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。 一、试剂准备 1.LB液体培养基:胰化蛋白胨(细

多克隆抗体的定义

多个不同克隆B细胞针对多种抗原表位所产生的多种抗体的混合物称为多克隆抗体。也称第一代人工抗体,如免疫血清。

鸟枪克隆法的定义

中文名称鸟枪克隆法英文名称shotgun cloning method定  义用限制性酶或超声波将基因组DNA切成随机性片段,克隆入DNA载体,转化宿主细胞,构建基因组文库,再从基因组文库中筛选得所需要的序列或基因克隆。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

亚致死基因的定义

中文名称亚致死基因英文名称sublethal gene定  义其存在可以妨碍或减弱生物体正常功能发挥的一种基因。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

IgG亚类的定义

中文名称IgG亚类英文名称IgG subclass定  义属抗体同种型之一,主要依γ重链的铰链区、链间二硫键结构差异而区分。人IgG包括IgG1、IgG2、IgG3和IgG4四个亚类。应用学科免疫学(一级学科),免疫系统(二级学科),免疫分子(三级学科)

目的基因的亚克隆(subcloning)2

四、连接产物的转化1.感受态细胞的制备⑴ 保存于-70℃的DH5α(或其他菌种)用接种环划菌于1.5%琼脂平板上,37℃恒温倒置培养至单菌落出现(约14-16 hr)。⑵ 挑取单菌落,接种于2.0ml LB液体培养基中,37℃恒温,250g振荡培养过夜(约12hr)。⑶ 取0.5ml 过夜培养液,接

目的基因的亚克隆(subcloning)1

所谓亚克隆就是对已经获得的目的片段进行重新,其目的在于对目的进行进一步分析,或者进行重组改造等。亚的基本过程包括:(1)目的片段和载体的制备; (2)目的片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。一、试剂准备1.LB液体培养基:胰化蛋白胨(细菌培养用)10g,酵母提取物(细菌培养用)

单克隆抗体的定义

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针

配子克隆变异的定义

中文名称配子克隆变异英文名称gametoclonal variation定  义在花药或其他生殖部分组织培养获得的单倍体植株中出现新性状的现象。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)

单克隆抗体的定义

由单一克隆B细胞针对单一抗原表位产生的均一性的高特异性的抗体称为单克隆抗体。

关于亚病毒的定义介绍

  亚病毒是一类比病毒更为简单,仅具有某种核酸不具有蛋白质,或仅具有蛋白质而不具有核酸,能够侵染动植物的微小病原体亚病毒连细胞结构都没有,所以称为非细胞生物。它是微生物中最小的生命实体,它的组成简单。病毒粒体中仅含有一种核酸(DNA或RNA)及蛋白质。它们只有专性寄生性,必须在活细胞中才能增殖。因此

克隆叠连群图的定义

中文名称克隆叠连群图英文名称overlapping cloning map定  义DNA经部分酶切成小片段后克隆,根据两个克隆片段间的共有序列进行排列,将短片段连接成长片段的图谱。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)

体细胞克隆变异的定义

中文名称体细胞克隆变异英文名称somaclonal variation定  义一个体细胞克隆中个体之间的差异现象。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

关于单克隆抗体的定义

  单克隆抗体是人工制备的杂交瘤细胞生产的,杂交瘤细胞是由一个经抗原激活后的B细胞与一个骨髓瘤细胞融合形成。单克隆抗体优点:纯度高,灵敏度高,特异性强,交叉反应少,制备的成本低。缺点:对技术有一定的要求,而且通过抗原的化学处理很容易丢失表位 。