cDNA克隆的定义
中文名称cDNA克隆英文名称cDNA cloning定 义从基因的转录产物(如mRNA)开始,逆转录合成互补DNA(cDNA),然后重组入载体,经过复制,筛选得到单一种cDNA分子的技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文
cDNA克隆的定义
中文名称cDNA克隆英文名称cDNA cloning定 义从基因的转录产物(如mRNA)开始,逆转录合成互补DNA(cDNA),然后重组入载体,经过复制,筛选得到单一种cDNA分子的技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
cDNA克隆的方法
cDNA克隆( cDNA cloing)与RNA互补的双链DNA片段,而且它能携在克隆载体中。通常用于克隆真核生物mRNA的DNA拷贝。由于cDNA持贝是一个成熟的信息分子拷贝,因此,无内含子顺序。如果在其克隆的藏体中连上一个适当的活动子序,它可在任何宿主体内得以迅速表达 。
cDNA克隆的概念
cDNA克隆( cDNA cloing)与RNA互补的双链DNA片段,而且它能携在克隆载体中。通常用于克隆真核生物mRNA的DNA拷贝。由于cDNA持贝是一个成熟的信息分子拷贝,因此,无内含子顺序。如果在其克隆的藏体中连上一个适当的活动子序,它可在任何宿主体内得以迅速表达
cDNA克隆技术的特点
①有些生物,如RNA病毒没有DNA,只能用cDNA克隆;②cDNA克隆易筛选,因为cDNA库中不包含非结构基因的克隆,而且每一cDNA克隆只含一个mRNA的信息;③cDNA能在细菌中表达。cDNA仅代表某一发育阶段表达出来的遗传信息,只有基因文库才包含一个生物的完整遗传信息。
功能基因-cDNA-3’末端的克隆
一.原理 (1) 以目的mRNA 为模板,使用Oligo dT-3sites Adaptor Primer 进行反转录反应,合成1st Strand cDNA。 (2) 使用含有KpnI、XbaI、BamH I 酶切位点的上游特异性引物和3sites Adaptor Primer进行PCR反应。 (
功能基因cDNA-5’末端的克隆
一.原理⑴ 5’-RACE法① 以目的mRNA 为模板,使用5’末端P 标记的RT 引物进行反转录反应,合成1ststrand cDNA。② 使用RNase H 分解 Hybrid DNA-RNA中的RNA链。③ 使用T4 RNA Ligase 使单链cDNA进行环化或形成首尾连接物。④ 进行PCR
PK120-cDNA-克隆实验
实验方法原理 实验材料 cDNA试剂、试剂盒 Ready-To-Go DNA 标记试剂盒人肝脏 λgt11 cDNA 文库人肝脏 λgt10 cDNA 文库杂交溶液SSC 溶液pBluescript II SK 载体仪器、耗材 PCR 扩增仪实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」1. 杂交反应抽提
PK120-cDNA-克隆实验
实验材料cDNA试剂、试剂盒Ready-To-Go DNA 标记试剂盒人肝脏 λgt11 cDNA 文库人肝脏 λgt10 cDNA 文库杂交溶液SSC 溶液pBluescript II SK 载体仪器、耗材PCR 扩增仪实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」1. 杂交反应抽提出的 50bp 的 P
PK120-cDNA-克隆实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 cDNA
基于-PCR-的差减-cDNA-克隆实验
实验方法原理 实验材料 A 和 B 类细胞的双链 cDNA (ds cDNA) 试剂、试剂盒
基于-PCR-的差减-cDNA-克隆实验
实验方法原理 实验材料 A 和 B 类细胞的双链 cDNA (ds cDNA)试剂、试剂盒 ALuIRsaIATPT4 多聚核苷酸激酶及其缓冲液DNA连接酶和及其缓冲液Taq DNA聚合酶及其缓冲液寡核苷酸引物4dNTP 混合物驱动 dNTP 混合物转化感受态菌株HEPES缓冲液链霉亲和素溶
基于-PCR-的差减-cDNA-克隆实验
差减克隆是分离和鉴定两个细胞群中差异表达的 mRNA 的有效技术。相比较的细胞类型是[+](或 测 试)细胞和[-](或驱动)细胞,在测试细胞中表达而不在驱动细胞中表达的 mRNA 将被分离出来。必需的差减次数主要取决于 cDNA 的多样性。多样性是指每一个细胞类型中不同的cDNA 或 cDNA 片
同源克隆的定义
中文名称同源克隆英文名称homologous cloning定 义将一个个体的细胞核植入同一个体的去核的卵母细胞中以此获得遗传性质与亲本一致的胚胎的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
亚克隆的定义
从一个克隆的DNA片段上分割几个区域,分别将之克隆到新的载体上,获得一系列新的重组子。
cDNA末端快速扩增技术的定义
定义:cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3’末端的有效方法。
cDNA末端快速扩增技术的定义
⑴.5’ RACE-PCR:利用mRNA的3‘末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点,以连有SMART寡核营酸序列通 用接头引物的Oligo(dT)30MN作为锁定引物反转录合成标准第一链cDNA。然后用一个基因特异引物GSP2 (gene specific primer,GSP)作为上游引物
ORF克隆和cDNA克隆在操作技术上的区别(一)
最近天气炎热,在实验室的童孩估计有点冒火,本来在这夏困秋乏的季节,每天都昏昏欲睡,还没个假期(这也没办法,疫情嘛),还要一天天围着实验转,做的出来还好,做不出来头大心塞啊。尤其是新进实验室的小白,对于实验的方方面面更是一头雾水,面对导师的“期待与厚望”,怀着一腔热血,踌躇满志,踏上了科研的不归路。话
ORF克隆和cDNA克隆在操作技术上的区别(二)
二、 相关产品 看到这里,相信大家对cDNA克隆和ORF克隆有了一定的了解,那接下来就来聊聊相关的产品吧! 1.全长cDNA克隆产品 cDNA克隆(长度是指编码区) FL / MFL开头的cDNA克隆现在基本不销售,主卖表达克隆 0-100
功能基因cDNA3#39;末端的克隆
一.原理(1) 以目的mRNA 为模板,使用Oligo dT-3sites Adaptor Primer 进行反转录反应,合成1st Strand cDNA。(2) 使用含有KpnI、XbaI、BamH I 酶切位点的上游特异性引物和3sites Adaptor Primer进行PCR反应。(3)
PCR技术在cDNA的克隆方面应用介绍
利用PCR技术,只需增加一步逆转录反应,便可从少数mRNA的构建cDNA文库,以mRNA为模板,以oligo(dT)为引物,在依赖于RNA 的DNA聚合酶催化下体外合成cDNA第一链之后,可通过PCR扩增此链。 如在此链的3'端再加上一段鸟苷酸残基同聚物,则可以使用oligo(dT)和
cDNA感染性克隆的概念和原理
cDNA克隆是以mRNA为原材料,经体外反转录合成互补的DNA(cDNA),再与载体DNA分子连接引入寄主细胞。每一cDNA反映一种mRNA的结构,cDNA克隆的分布也反映了mRNA的分布。特点是:①有些生物,如RNA病毒没有DNA,只能用cDNA克隆;②cDNA克隆易筛选,因为cDNA库中不包含非
鸟枪克隆法的定义
中文名称鸟枪克隆法英文名称shotgun cloning method定 义用限制性酶或超声波将基因组DNA切成随机性片段,克隆入DNA载体,转化宿主细胞,构建基因组文库,再从基因组文库中筛选得所需要的序列或基因克隆。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
多克隆抗体的定义
多个不同克隆B细胞针对多种抗原表位所产生的多种抗体的混合物称为多克隆抗体。也称第一代人工抗体,如免疫血清。
差异表达-cDNA-的重新扩增、克隆与测序实验
从丙烯酰胺凝胶上切下潜在的差异表达 cDNA 之后,用同一种锚定-任意引物组合重新扩增 cDNA, 反应条件与最初 PCR 相同。重新扩增的产物,可以进行克隆和测序,以供进一步分析。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒琼脂糖凝胶蒸馏水DNA 点样染料甘油蒸馏水溴
差异表达-cDNA-的重新扩增、克隆与测序实验
试剂、试剂盒 琼脂糖凝胶蒸馏水 DNA 点样染料甘油蒸馏水 溴酚蓝 二甲苯腈 FF溴化乙锭溶液任意引物(H-AP)cDNAdNTP 混合液未标记的锚定引物载体特异性引物PCR 缓冲液Tris-HClKClMgCl2明胶 TaqDNA 聚合酶仪器、耗材 电泳装置离心管热循环仪薄壁 PCR 管UV 透射
差异表达-cDNA-的重新扩增、克隆与测序实验
试剂、试剂盒 琼脂糖凝胶 蒸馏水 DNA 点样染料 甘油 蒸馏水 溴酚蓝 二甲苯腈 FF 溴化乙锭
配子克隆变异的定义
中文名称配子克隆变异英文名称gametoclonal variation定 义在花药或其他生殖部分组织培养获得的单倍体植株中出现新性状的现象。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)
单克隆抗体的定义
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针
单克隆抗体的定义
由单一克隆B细胞针对单一抗原表位产生的均一性的高特异性的抗体称为单克隆抗体。
重组表达cDNA克隆的血清学分析技术介绍
中文名称重组表达cDNA克隆的血清学分析技术英文名称serological analysis of recombinantly expressed cDNA clone;SEREX定 义用肿瘤患者血清从肿瘤细胞cDNA表达文库中筛选和寻找肿瘤抗原基因的方法。应用学科免疫学(一级学科),免疫病理、临