基因测定方法同线法
同线法表2如果一个细胞得到或丢失一条染色体则将同时得到或失去这条染色体上的全部基因。如果其中某些基因是已知的,而另一连锁关系未知的基因恰恰和上述基因同时得到或失去,便可以判定后一基因和前一基因属于同一连锁群(表2)。这一原理曾广泛应用于人的基因定位。仙台病毒或聚乙二醇能促使人的体细胞和啮齿类动物的体细胞相融合(见体细胞遗传学),融合细胞在有丝分裂过程中随机地丢失人的染色体。通过细胞学观察,特别是应用显带染色(见核型)方法,可以选出具有某个或某几个人染色体的融合细胞株,再经组织培养并测定其中是否出现待测基因的表型就可以判断待测基因所属的染色体。假定有五个人-鼠融合细胞株 A、B、C、D、E,它们分别保留有人染色体1、2、3中的这一个或那一个,例如细胞株A保留染色体2,细胞株D保留1、2、3这三个染色体等。分别测定甲、乙、丙、丁四种表型,如某种酶的活性或某种抗原的存在与否等。已经知道这些特性都是小鼠细胞所没有的,从表2的结果可以看到......阅读全文
脂肪的测定方法盖勃法
吸收10ml硫酸(90%),注入盖勃氏乳脂汁内,用1lml的特别牛乳吸管吸取牛乳样品至刻度并注入乳脂汁内,再加入1ml异戊醇,塞紧橡皮塞,充分摇动,使牛乳凝块溶解。将乳脂计放入65~70℃的水浴锅中5min,再以1000r/min旋转5min后,放置65~70℃水浴锅中;5min后取出擦干,按脂肪柱
叶片水势测定方法小叶流法
Ⅰ、小液流法一、目的通过实验,掌握用小液流法测定植物组织水势的原理和方法。二、原理水势代表水的能量水平,水总是从水势高处流向低处。水进入植物体内并分布到各组织器官中的快慢或难易由水势差来决定,水势越高,植物组织的吸水能力越差,而供给水能力越强。当植物组织与一系列浓度递增的溶液接触后,如果植物组织水势
氯气测定方法介绍碘量法
一、原理氯被氢氧化钠溶液吸收,生成次氯酸钠,用盐酸酸化,释放出游离氯。反应式如下: 游离氯再氧化碘化钾生成碘,用硫代硫酸钠标准溶液滴定,计算出氯的量。测定范围:35mg/m3以上。二、仪器①多孔玻板吸收瓶:125ml。②碘量瓶:250ml。③棕色酸式滴定管:10或25ml。④烟气采样器。三、试剂①吸
石油产品残炭测定仪测定方法微量法
石油产品残炭测定仪测定方法微量法 石油产品的残炭值是指将油品放入残炭测定仪中,在不通入空气的条件下,加热至特定温度条件下,使其蒸发及热解后,排出燃烧的气体,所剩余的焦黑色残余物占油品的质量百分数。 残炭值可以间接表明基础油的精制程度。深度精制的基础油,重芳香烃和胶质的含量较低,残炭值也低。人
溶出度测定法第三法(小杯法)测定方法
测定方法:测定前,应对仪器装置进行必要的调试,使桨叶底部距溶出杯的内底部(15±2)mm。分别量取经脱气处理的溶出介质,置各溶出杯内,实际量取的体积与规定体积的偏差应不超过1%(当品种项下规定需要使用沉降装置时,可将片剂或胶囊剂先装入规定的沉降装置内)。以下操作同第二法。取样位置应在桨叶顶端至液面的
寻找差异表达基因方法——简化SSH法
无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官,或者是从正常的组织突变为肿瘤组织,都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞分化的机制或者肿瘤的成因,因而也就成为一项热门的技术。 寻找差异表达的基因有不少方法,抑制消减杂交(SSH)是比较有效的一种方法
基因转移的物理方法转移法介绍
包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原生质膜发生融合,使外源DNA通过细膜上出现的瞬间小孔而进入细胞。
基因定位方法介绍直接观察法
易位(见染色体畸变)使染色体上的基因改变连锁关系,所以易位可以用来进行基因定位。如果易位所涉及的染色体是可以被识别的,那就更有利于定位工作。如果在遗传学分析中发现某两个连锁群的连锁关系都发生了改变,同时在显微镜下又可以辨认出有两个染色体发生了相互易位,那么就可以知道两个连锁群和两个染色体的对应关系。
基因定位方法介绍单元化定位法
在构窠曲霉这一类真菌的准性生殖过程中,杂合二倍体细胞在有丝分裂时常随机地丢失它的染色体。染色体在多次有丝分裂过程中逐条丢失而使二倍体细胞终于转变为单倍体细胞的过程称为单元化。如果一对染色体中带有显性的野生型基因的染色体丢失了,那么同源染色体上隐性基因的性状便得以表现。此外,通过体细胞交换也可以从杂合
酸值的测定方法介绍色谱法
该法首先利用乙醇等溶剂分析油脂中的游离脂肪酸,由于脂肪酸一般极性较强,挥发性低,热稳定性差,所以一般先用KOH/甲醇将其转化成相应的衍生物脂肪酸甲酯,从而降低其极性,增加其热稳定性,然后用Agilent 4890D气相色谱仪进行分析,使用FID检测器,其回收率在89%一109%。该法试剂用量少,适合
阿法骨化醇的含量测定方法
照髙效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1g的溶液对照品溶液取阿法骨化醇对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含1pg的溶液。系统适用性溶液(1)、系统适用性溶液(2)、色谱条件与系统适用性要求见有关物质项下
吸光光度法的测定方法
1、单一组分的测定①比较法。比较法是先配制与被测试液浓度相近的标准溶液c(S)、被测试液c(X),在相同条件下显色、定容后,测其相应的吸光度为A和A(X),根据朗伯一比耳定律:A(S)=ε(S)b(S)c(S) A(X)=ε(X)b(X)c(X)由于同一物质,用同一波长及相同厚度的吸收皿测定ε(X)
吸光光度法的测定方法
1、单一组分的测定①比较法。比较法是先配制与被测试液浓度相近的标准溶液c(S)、被测试液c(X),在相同条件下显色、定容后,测其相应的吸光度为A和A(X),根据朗伯一比耳定律:A(S)=ε(S)b(S)c(S) A(X)=ε(X)b(X)c(X)由于同一物质,用同一波长及相同厚度的吸收皿测定ε(X)
吸光光度法的测定方法
1、单一组分的测定①比较法。比较法是先配制与被测试液浓度相近的标准溶液c(S)、被测试液c(X),在相同条件下显色、定容后,测其相应的吸光度为A和A(X),根据朗伯一比耳定律:A(S)=ε(S)b(S)c(S) A(X)=ε(X)b(X)c(X)由于同一物质,用同一波长及相同厚度的吸收皿测定ε(X)
PH值的测定方法介绍电极法
空气中CO2溶解于降水和从降水中逸出达到动态平衡时的pH约有5.60,因此通常称pH
华法林钠的含量测定方法
照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含50g的溶液对照品溶液取华法林钠对照品,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含50g的溶液系统适用性溶液、色谱条件与系统适用性要求见有关物质项下测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液,
还原糖的测定方法——高锰酸钾法
1.原理,还原糖在碱性溶液中使铜盐还原成氧化亚铜,在酸性条件下,氧化亚铜能使硫酸铁还原为硫酸亚铁,再用KMNO4溶液滴定硫酸亚铁,即可标出还原糖的量。 2. 操作方法 (1)样品处理 a. 乳糖:包括乳制品以及含蛋白质的冷食类 称样2-5g(液体样25~50ml)→于250ml容量瓶→
环氧树脂软化点测定方法——环球法
本标准参照采用国际标准ISO 4625—1980《涂料与清漆粘结剂——软化点的测定——环球法》。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了在常温下固体环氧树脂软化点的测定方法。 本标准适用于测定软化点高于60℃的固体环氧树脂。 2 方法提要 测定水平铜环中的树脂,在钢球作用下,
甲醛测定方法介绍离子色谱法
一、原理空气中的甲醛经活性炭富集后,在碱性介质中用过氧化氢氧化成甲酸。用具有电导检测器的离子色谱仪测定甲酸的峰高,以保留时间定性,峰高定量,间接测定甲醛浓度。二、方法的适用范围及干扰当乙酸的浓度为甲酸浓度的5倍、可溶性氯化物为甲酸浓度的200倍时,对甲酸测定有影响,改变淋洗液的浓度,可增加甲酸和乙酸
环氧树脂颜色测定方法——加德纳色度法
1 主题内容与适用范围 本标准规定了用加德纳色度标准(色标)测定环氧树脂颜色的方法。 本标准适用于环氧树脂颜色的测定。也适用于透明液体或颜色与加德纳色标相近的液体颜色的测定。 2 方法提要 将试样的溶液与加德纳色标进行目测比较,以与试样颜色最接近的某色标号,表示试样的颜色。
电导率测定方法介绍电极法
一、电导率电导率是用数字来表示降水样品传导电流的能力这种能力主要与降水总离子浓度、离子的电荷和水含半径、浓度及测量时的温度有关。降水中含有的无机酸、碱、盐具有良好的导电作用。而有机化合物在降水中离解度低,且浓度也低,对降水电导率影响较小。二、电极法1、原理测定降水电导率的方法是测定降水的电阻率,电阻
色谱法外标法进行含量测定的方法介绍
外标法是《中国药典》(2010版)采用色谱法进行含量测定时最常用的方法。按各品种项下的规定,精密称(量)取对照品和供试品,配制成溶液,分别精密取一定量,注入仪器,记录色谱图,测量对照品和供试品待测成分的峰面积(或峰高),按下式计算含量:【例1】HPLC外标法测定阿司匹林泡腾片含量。色谱条件与系统适用
蛋白的生物活性测定方法(结晶紫法和MTT法)
结晶紫法活性测定1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞,用0.25%胰酶(以无钙镁离子PBS溶液配制,pH7.4)消化后,加入RPMI-1640培养基(10%新生牛血清,100U/ml青霉素,100U/ml链霉素,pH7.2)吹打细胞,使形成细胞悬液。进行细胞计数,使细胞数为2~2.5×105个
饲料中粗蛋白测定方法——粗蛋白测定仪法
饲料的生产过程中,为了保证加工而成的产品的品质,需要对饲料进行相关的检测,其中一项就是使用粗蛋白测定仪测定饲料中的粗蛋白。目前这种方法也是饲料中粗蛋白测定方法中重要的一种方式,我们也可以称其为粗蛋白测定仪法。 粗蛋白测定仪法的原理是凯氏定氮法测定饲料中的含氮量。通过化学试剂破坏
丙烯醛测定测定方法介绍气相色谱法
丙烯(CH2CHCHO)直接进样,在色谱柱中与其他物质分离后,用氢火焰离子化检测器测定,以标准样品色谱峰的保留时间定性、峰高定量。本方法适用于固定污染源有组织排放和无组织排放的丙烯醛测定。本方法的检出限为0.1mg/m3,当进样量为1ml时,定量测定的浓度范围为(0.31~1.0×102)mg/m3
HLA基因分型方法:PCR-SSP法
PCR-SSP法1)提取DNA同前RFLP法 2)PCR扩增操作方法基本同PCR-RFLP,但引物是根据各等位基因的核苷酸序列设计的特异性引物,主要是针对第二外显子区域的多态性,用SSP扩增出来的产物具等位基因特异性。 3)凝胶电泳取PCR扩增的产物与上样缓冲液混合,加入2%琼脂糖凝胶加样孔中,其内
HLA基因分型方法:PCR-SSCP法
PCR-SSCP法1)提取DNA同前RFLP法 2)PCR扩增同前PCR-RFLP,也可加入1μCi32P-dCTP标记产物。 3)非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳1.取PCR的扩增产物,加凝胶加样液3μl,95℃加热变性2min,冰浴骤冷。同位素掺入的DNA取1μl稀释10倍,加样3μl。2.取样品用微量
HLA基因分型方法:PCR-RFLP法
PCR-RFLP法1)提取细胞总DNA方法同前。 2)PCR扩增引物的设计1.引物长度一般为15~30bp,G+C含量应在45%~55%之间。2.应避免连续出现4个以上的单一碱基。3.不能含有自身互补序列。4.两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基,不然会形成引物二聚体。5.与非特异扩增序列的同
缺失定位法进行基因定位的方法介绍
一个细胞中的两个同源染色体中的一个上有一个突变基因,另一染色体上有一小段已知范围的缺失,如果这一突变基因的位置在缺失范围内,便不可能通过重组而得到野生型重组体;如果突变基因不在缺失范围内,那么就可以得到野生型重组体。利用一系列已知缺失位置和范围的缺失突变型,便能测定突变型基因的位置。
转录定位法进行基因定位的方法介绍
许多 RNA病毒的整个基因组往往作为一个单位转录。随着转录的进行,由基因组上各个基因所编码的蛋白质也依序在寄主细胞中出现。当寄主细胞被紫外线照射使本身的蛋白质合成受到抑制时,病毒蛋白的出现更为明显。紫外线照射也起着抑制病毒基因组的转录的作用。紫外线在 RNA分子的某一部位造成损伤后,损伤的部位和它后