干细胞有限细胞系的结果和结论介绍
结果:①人工分离培养出的骨髓间充质干细胞,形态、大小一致,呈长梭型或长多边形,从P0至P20基本保持一致,P2代骨髓间充质干细胞表达基质细胞表面标志CD44,不表达造血系细胞表面标志CD34、CD45。②反转录病毒感染骨髓间充质干细胞的感染效率约为10%,修饰后形成的脑源性神经营养因子-骨髓间充质干细胞在形态上始终保持一致,与骨髓间充质干细胞几乎完全一样,生长速率与未经基因修饰的骨髓间充质干细胞基本相同,培养10代后细胞停止分裂,免疫细胞化学染色显示脑源性神经营养因子-骨髓间充质干细胞的脑源性神经营养因子阳性率超过98%,培养72h后培养基中脑源性神经营养因子的含量较之骨髓间充质干细胞提高约20000倍。③PCR对脑源性神经营养因子-骨髓间充质干细胞基因组DNA进行扩增,得到外源性脑源性神经营养因子条带。结论:利用反转录病毒载体进行基因修饰得到了稳定的脑源性神经营养因子基因修饰的人骨髓间充质干细胞有限细胞系,为基因治疗提供了一种......阅读全文
干细胞有限细胞系的结果和结论介绍
结果:①人工分离培养出的骨髓间充质干细胞,形态、大小一致,呈长梭型或长多边形,从P0至P20基本保持一致,P2代骨髓间充质干细胞表达基质细胞表面标志CD44,不表达造血系细胞表面标志CD34、CD45。②反转录病毒感染骨髓间充质干细胞的感染效率约为10%,修饰后形成的脑源性神经营养因子-骨髓间充质干
干细胞有限细胞系的建立方法介绍
方法:常规分离培养人骨髓间充质干细胞,流式细胞术检测骨髓间充质干细胞表面分子CD34、CD44、CD45,采用重组逆转录病毒载体将脑源性神经营养因子基因转入人骨髓间充质干细胞。检测脑源性神经营养因子基因修饰的骨髓间充质干细胞的增殖特性,细胞内脑源性神经营养因子的蛋白表达,细胞培养液中脑源性神经营养因
干细胞有限细胞系的建立目的
目的:建立脑源性神经营养因子基因修饰的人骨髓间充质干细胞系。
毛冠鹿胚胎有限细胞系的建立的方法和意义
鹿科动物具有较高的经济价值,毛冠鹿属是鹿科麂亚科的2个属之一,仅有毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)一种动物,为我国特有的二类保护动物。近年来,由于生态环境恶化,食物链遭到破坏,该动物日趋减少。1983年张锡然等首次报道了毛冠鹿2种核型,王宗仁又发现了第3种核型。3种核型差异较大,
细胞系的-DNA-STR-谱_细胞系结果分析
实验材料GeneScan®和Genotyper®软件PowerMac计算机实验步骤本节包括 2 个主要领域:分析利用GeneScan®分析软件中 DNA 程序收集软件收集到的原始数据,和利用Genotype®软件为前面用GeneScan®软件分析过的 DNA 谱中的指定等位基因名称。1. 打开凝胶图
毛冠鹿胚胎有限细胞系的细胞遗传学分析介绍
染色体分析参照张锡然等方法进行。选取图像清晰的10张中期照片,测量并统计相对长度、臂比和着丝粒指数,表示并绘制核型模式图。毛冠鹿胚肺和胚肾有限细胞系的建立:组织块贴壁5d后,细胞逐渐从组织边缘生出,7d后形成生长晕,10d后长成致密单层。开始传代培养,并获成功,有限细胞系建立。毛冠鹿胚肺和胚肾原代细
毛冠鹿胚胎有限细胞系的传代培养细胞方法介绍
长成致密单层后,弃去培养液,加入0.25%胰酶2~3mL,37℃消化约1min,弃去胰酶,加入培养液,用吸管反复吹吸至细胞脱落,以1∶2(按原代培养的细胞数)传代。将胚肺细胞按5.1万个/mL,胚肾细胞按2.1万个/mL的浓度分别接种在同一规格的20只培养瓶中,每天取3只培养瓶,胰酶处理,使细胞脱落
人胚胎干细胞系:衍生与培养实验—人胚胎干细胞系的建立
实验步骤方 案 2. 6 人 胚 胎 干 细 胞 系 的 建 立试剂与材料无菌或无菌制备□ 5〜6 天的人胚泡,经 H F E A 允许,并且像先前讨论的完全经病人同意。 HFEA所要求的全部细节能够在 H E F A 的网站找到(http//:www.hfea.g0v.uk)。□链霉蛋白酶, 0
毛冠鹿胚胎有限细胞系的原代培养方法
毛冠鹿细胞原代培养参见施立明等的方法,在无菌条件下取出毛冠鹿胚胎的肺和肾组织,用含双抗(青霉素、链霉素各0.1U/mL)的磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤3次,去血污,再用GIBCO199培养液洗1次。在无菌培养皿中剪成1mm×1mm×1mm大小的组织块,置培养瓶中贴壁,翻转180°,CO2培养箱内静置3
人类多能性干细胞系的建立的来源
人类多能性干细胞系的建立有两个来源,其方法与以往在动物模型中建立的方法相同。(1) 在Dr. Thomson进行的工作中,他从人类胚胎的囊胚期内细胞群中直接分离多能干细胞。Dr. Thomson从IVF(体外受精)临床实验室得到胚胎,这些胚胎是不育症临床治疗不需要的,用于繁殖,而非研究目的。从捐献者
骨髓单核细胞系统指标解读结果
正常值: 原单核细胞:0~0.003 (0~0.3%)。 幼单核细胞:0~0.006 (0~0.6%)。 单核细胞: 0.01~0.062 (1.0%~6.2%)。 高于正常值: 增多:急性和慢性单核细胞白血病(急性以原始和幼稚型为主,慢性以成熟型为主),慢性感染。
日本首次建立癌症干细胞稳定细胞系
近年来,干细胞治疗应用研发成热点■李勤 近日,日本中外制药株式会社(Chugai)在世界上首次成功建立具有结肠癌干细胞性质的稳定细胞系。 该研究由新加坡Pharma Logicals Research公司、日本Forerunner Pharma Research公司与中外制药株式
打破干细胞神话:-分化能力有限-人类无法再生
尽管生老病死是自然界的规律,可是作为住在了自然数千年的人类,却似乎并不想屈从于这个无法规避的自然法则,一直在企图寻找让人类永生的“灵药”,古人寻长生不老药,现代人试图利用干细胞再造人类器官,弥补身体受到的损伤。可是,自然规律好像不那么容易被打破,即使在科技发达的今天,人们发明出了多种干细胞技术,
人胚胎干细胞系:衍生与培养实验
细 胞 培 养 基 成 分 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞(MEF) 的 制 备 人 胚 胎 干 细 胞 系 的 建 立 h E S 细 胞 的 手 工 传 代 采 用 玻 璃 化 方 法 冻 存 h E S 细胞 通 过 焚 光
人胚胎干细胞系:衍生与培养实验
细 胞 培 养 基 成 分 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞(MEF) 的 制 备 人 胚 胎 干 细 胞 系 的 建 立 h E S 细 胞 的 手 工 传 代 采 用 玻 璃 化 方 法 冻 存 h E S 细胞 通 过 焚 光
关于去磷酸化的结论的介绍
因为tau蛋白异常过度磷酸化并形成PHF被认为是AD神经原纤维退化的基础,PHF可在体外被蛋白磷酸酯酶去磷酸化的结果提示,AD脑损伤可能是可逆的。 阿尔茨海默(AD)脑中有三种tau蛋白: (1)易溶型非异常磷酸化的tau(C-tau); (2)易溶型异常磷酸化的tau(ADp-tau);
有限稀释法的基本介绍
有限稀释法是一种常用的克隆方法,是指将需要再克隆的细胞株自培养孔内吸出并作细胞计数,计出1mL的细胞数。常用来筛选融合的动物细胞。 用HT培养液稀释, 使细胞浓度为50~60个/mL,于96孔培养板中每孔加0.1mL(5.5个细胞/孔)。接种2排,剩余细胞悬液用HT培养液作倍比稀释,再接种2排
传代细胞系的简介和特点
传代细胞系来源于肿瘤细胞或细胞株传代过程中变异的细胞系称为传代细胞系,它们能在体外无限期地传代。重组蛋白制品哺乳动物传代细胞库建立、鉴别和检定申报资料要求解读之一 。 二倍体细胞在传代繁殖过程中,有些细胞发生改变,不仅形态发生变化,且生长更快,能以少量的细胞起始培养。由一个这样的细胞得到的细胞
细胞系的概念和主要类型
经过40-50次分裂的渡过第二次死亡危机的细胞,称之为细胞系。如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系(FiniteCellLine);已获无限繁殖能力的细胞系,称连续或无限细胞系(InfiniteCellLine)。
连续细胞系的概念和特点
体外培养的细胞群体获得了持久增殖的能力称为无限细胞系(infinite cell line),也称为连续细胞系(continuous cell line)。无限细胞系大多具有异倍体核型,有些无限细胞系只有永生性(immortalization),但仍保留接触抑制,无异体接种致瘤性;有些无限细胞系不仅
细胞系鉴定的办法和依据
细胞系鉴定目前主要基于国际身份认证委员会的标准。依据该标准,可以通过多重荧光PCR技术,对人源8个STR位点以及1个性别决定位点进行检测。
小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞系首次建立
中国科学院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组和徐国良研究组在一项合作研究中,首次建立了来自孤雄囊胚的单倍体胚胎干细胞系,而这些细胞保持了一定水平的雄性印记,并进一步验证这些细胞能够代替精子在注入卵母细胞后产生健康的小鼠。相关研究成果今天在线发表于国际著名学术期刊《细胞》(Cell)
使用液相色谱法检测EDTA的原理和结论
不同介质中EDTA的测定方法不同,如滴定法、比色法、高效液相色谱法等。前两种方法很难将edta配合物与其他配合物区分开来,结果也不令人满意。因此,高效液相色谱法(HPLC)是测定EDTA金属配合物的常用方法。edta-cu和edta-fe配合物的稳定系数远高于edta-cu配合物。在配合物中加入价为
成功建立小鼠孤雌单倍体滋养层干细胞系
真核生物的遗传信息都在细胞核中以染色体的形式存在。二倍体细胞中有两套染色体,这是哺乳动物遗传信息的呈递模式。而单倍体细胞中只具有一套染色体,这降低了其基因组的复杂程度,有利于隐性纯合体的获得,是极具价值的遗传学研究工具。 2011年及2012年,小鼠的孤雌与孤雄单倍体胚胎干细胞系被成功建立。此
用CRISPR构建诱导性基因敲除人类干细胞系
来自威斯康星大学的研究人员报告称,他们开发出了一种新策略来快速构建诱导性基因敲除(iKO)人类多能干细胞(hPSC)系。相关研究论文发布在7月2日的《细胞干细胞》(Cell stem cell)杂志上 威斯康星大学的张素春(Su-Chun Zhang)教授及助理研究员Yuejun Chen是这
食蟹猴孤雌单倍体胚胎干细胞系建立
中科院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组、神经科学研究所孙强领导的非人灵长类研究平台(苏州)和健康科学研究所金颖研究组合作,建立了来自食蟹猴孤雌囊胚的单倍体胚胎干细胞系,为揭示灵长类动物生命规律提供了新的重要的研究工具。相关研究成果日前发表在《细胞研究》。 单倍体细胞为研究重要的生命科
传代细胞系的技术要点介绍
1、取材:材料主要来源于外科手术或活检瘤组织,取材时避免用坏死组织,要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位,瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养,因故不能立即培养者,可冻存。其培养方法及冻存方法同前述正常组织。 2、成纤维细胞排除:在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞,培养时能与瘤细
海拉细胞系的应用介绍
海拉细胞系被George Gey分送给众研究单位(并未通知拉克斯本人也未得到她的许可),并用作癌症模式细胞(model cancer cells)研究。HeLa细胞系也被用作研究细胞信号传导(cellular signal transduction)。1952年研究人员用各种从腮腺炎、麻疹到疱疹疾病
单核巨噬细胞系统的功能介绍
免疫防御功能 MPS细胞具有重要的生物作用,不仅参与非特异性免疫防御,而且是特异性免疫应答中一类关键的细胞,广泛参与免疫应答、免疫效应与免疫调节。 病原微生物侵入机体后,在激发免疫应答以前即可被MPS细胞吞噬并清除,这是机体非特异免疫防御机制的重要环节。由于其吞噬能力较强,故有人将MPS细胞
细胞株和细胞系的差别
原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,这些存活的细胞一般能够传到40--50代,这种传代细胞叫做细胞株。细胞株的遗传物质没有发生改变。当细胞传至50代以后又会出现“危机”,不能再传下去。但是有部分