细胞融合技术聚乙二醇(PEG)法

聚乙二醇(PEG)结构为:HOH2C(CH20CH2)nCH2OH,分子量大于200小于6000者均可用作细胞融合剂。PEG经高压灭菌后,与温热的Engle氏液混合。一般选用分子量为4,000,常用浓度为50%,pH8.0~pH8.2(用10%NaHCO3调整),分子量小的PEG,融合效应差,又有毒性,分子量过大,则粘性太大,不易操作。......阅读全文

细胞融合技术聚乙二醇(PEG)法

聚乙二醇(PEG)结构为:HOH2C(CH20CH2)nCH2OH,分子量大于200小于6000者均可用作细胞融合剂。PEG经高压灭菌后,与温热的Engle氏液混合。一般选用分子量为4,000,常用浓度为50%,pH8.0~pH8.2(用10%NaHCO3调整),分子量小的PEG,融合效应差,又有毒

细胞融合技术聚乙二醇(PEG)法

聚乙二醇(PEG)结构为:HOH2C(CH20CH2)nCH2OH,分子量大于200小于6000者均可用作细胞融合剂。PEG经高压灭菌后,与温热的Engle氏液混合。一般选用分子量为4,000,常用浓度为50%,pH8.0~pH8.2(用10%NaHCO3调整),分子量小的PEG,融合效应差,又有毒

细胞融合实验——聚乙二醇法

实验方法原理细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有灭活的仙台病毒(Sendai virus),聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和电脉冲。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结构重

多肽PEG聚乙二醇修饰

PEG修饰,即聚乙二醇修饰,又称聚环氧乙烷修饰,是将PEG通过化学方法偶联到蛋白质或多肽分子上,从而提升多肽活性的一种方法。自Davies 1977年用PEG 修饰牛血清白蛋白以来, PEG修饰技术广泛应用于多种蛋白质和多肽的化学修饰。 PEG修饰具有延长半衰期、降低或消失免疫原性、减少毒副作用以及

聚乙二醇(PEG)修饰剂简介

聚乙二醇(PEG)具有良好的生物、血液相容性,亲水性,且无免疫原性,而分子量大于1000 Da的PEG经过多年应用于食品业、化妆品业和制药业证明没有毒性。常用来修饰蛋白质、多肽、酶等生化药物和生物医用材料。修饰后的蛋白质和多肽等药物主要的生物学功能保持不变,并且获得很多有利的性质。化学药物或蛋白

聚乙二醇(PEG)修饰剂简介

   聚乙二醇(PEG)具有良好的生物、血液相容性,亲水性,且无免疫原性,而分子量大于1000 Da的PEG经过多年应用于食品业、化妆品业和制药业证明没有毒性。常用来修饰蛋白质、多肽、酶等生化药物和生物医用材料。修饰后的蛋白质和多肽等药物主要的生物学功能保持不变,并且获得很多有利的性质。    化

聚乙二醇(PEG)修饰剂简介

   聚乙二醇(PEG)具有良好的生物、血液相容性,亲水性,且无免疫原性,而分子量大于1000 Da的PEG经过多年应用于食品业、化妆品业和制药业证明没有毒性。常用来修饰蛋白质、多肽、酶等生化药物和生物医用材料。修饰后的蛋白质和多肽等药物主要的生物学功能保持不变,并且获得很多有利的性质。    化

PEG聚乙二醇浓缩的原理

蛋白质浓缩浓缩  生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀,为了保存和鉴定的目的,往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的:减压加温蒸发浓缩通过降低液面压力使液体沸点降低,减压的真空度愈高,液体沸点降得愈低,蒸发愈快,此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。空气流动蒸发浓缩 空气的流动可使液体加速

聚乙二醇(PEG)修饰剂简介

   聚乙二醇(PEG)具有良好的生物、血液相容性,亲水性,且无免疫原性,而分子量大于1000 Da的PEG经过多年应用于食品业、化妆品业和制药业证明没有毒性。常用来修饰蛋白质、多肽、酶等生化药物和生物医用材料。修饰后的蛋白质和多肽等药物主要的生物学功能保持不变,并且获得很多有利的性质。    化

PEG介导的动物细胞融合(cell-fusion)技术

细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization)是指真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。人工的细胞融合开始于20世纪50年代, 60年代到70代作为一门新兴的技术, 发展非常快, 应用范围也极为广泛, 除了同种类细胞间可以融合,

聚乙二醇-(PEG)-浓缩法及超过滤法纯化病毒实验

实验方法原理 这一方法是浓缩大量病毒悬液和初步纯化病毒的常用方法之一。 PEG 是环氧乙烷和水缩合而成的水溶性非离子型聚合物,相对分子质量为 2 000-6 000 的 PEG 多用于浓缩病毒,其中以 PEG6 000 效果最好。 PEG 浓缩法能成百倍的浓缩病毒,而且对病毒的结构和抗原性有

动物细胞融合——聚乙二醇人工诱导法

实验材料龄公鸡静脉血试剂、试剂盒聚乙二醇 Alsver 液 GKN 液 葡萄糖 柠檬酸钠 蒸馏水 酚红仪器、耗材显微镜 离心机 天平 离心管 注射器 细滴管 载玻片盖玻片细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的过程。在自然情况下,体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象。人工方法诱导细胞融

聚乙二醇(PEG)沉淀补体消耗试验

实验概要本实验用低浓度PEG将IC沉淀,沉淀物中加入补体,以溶血反应检测了补体消耗率。主要试剂1. 热聚合人ISC:制备方法同PEG沉淀试验。 2. 硼酸缓冲盐水(朋S) 含硼酸0.1mol/L,硼砂25mmol/L,NaCl 75mmol/L,调整为pH8.4 3. PEG 用BBS将PEG配成1

聚乙二醇(PEG)沉淀补体消耗试验

实验概要本实验用低浓度PEG将IC沉淀,沉淀物中加入补体,以溶血反应检测了补体消耗率。主要试剂1. 热聚合人ISC:制备方法同PEG沉淀试验。 2. 硼酸缓冲盐水(朋S) 含硼酸0.1mol/L,硼砂25mmol/L,NaCl 75mmol/L,调整为pH8.4 3. PEG 用BBS将PEG配成1

聚乙二醇-(PEG)-浓缩法及超过滤法纯化病毒实验1

聚乙二醇 (PEG) 浓缩法实验方法原理这一方法是浓缩大量病毒悬液和初步纯化病毒的常用方法之一。 PEG 是环氧乙烷和水缩合而成的水溶性非离子型聚合物,相对分子质量为 2 000-6 000 的 PEG 多用于浓缩病毒,其中以 PEG6 000 效果最好。 PEG 浓缩法能成百倍的浓缩病毒,而且对病

技术讲解:细胞融合的方法及诱导物

同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。仙台病毒法融合①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和Mg2+,zui适PH为8

聚乙二醇-(PEG)-浓缩法及超过滤法纯化病毒实验_超过滤法

实验方法原理超过滤法是利用超滤膜将水、盐及小分子滤过,将一定大小的大分子或病毒等颗粒截住从而使后者得到浓缩的一种方法。超过滤法是浓缩大容量的病毒样品的一种非常有效的方法,浓缩的同时可达到部分纯化。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒PBS仪器、耗材超滤膜实验步骤该法通常将孔径比病毒颗粒小的硝酸纤维素滤膜

动物细胞融合的主要方法

动物细胞融合的主要方法病毒法;聚乙二醇法;电融合法。相关内容:诱导动物细胞融合的方法有:物理法(离心、振动)、化学法(聚乙二醇)、生物法(灭活的病毒)。诱导植物原生质体融合的方法可分为物理法和化学法。(1)植物体细胞杂交技术中,诱导原生质体融合的方法基本分为两类,物理法和化学法,物理法包括离心、振动

细胞融合的方法有哪些

一、细胞融合的方法有三种:生物方法、化学方法、物理方法。二、细胞融合也称细胞杂交 , 是指细胞通过介导和培养, 在离体条件下用人工方法将不同种的细胞通过无性方式融合( 合并) 成一个核或多核的杂合细胞的过程。体细胞融合后可形成四倍体或多倍体细胞,由此形成的杂交细胞,其特性会有很大的变化。三、化学诱导

聚乙二醇(polyethylene-glycol,PEG)沉淀实验检测CIC

聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)是一种无电荷的直链大分子多糖,可非特异性地引起蛋白质沉淀。沉淀具有可逆性,被沉淀的蛋白质生物活性亦不受影响。不同浓度的 PEG可沉淀分子量不同的蛋白质,在pH值、离子浓度等条件固定时,蛋白质分子量越大,用以沉淀的PEG浓度越小。由于P

不同动物细胞融合的特点和诱导因素

1、病毒诱导融合病毒是最早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用。用作融合剂的病毒必须事先用紫外线或β-丙内酯灭活,使病毒的感染活性丧失而保留病毒的融合活性。优点:融合率较高,对各种动物细胞都适宜,且仙台病毒能在鸡胚中大量繁殖,容易培养;缺

细胞融合技术物理振动法

离心振动物理方法之一,使用离心机等机器实现细胞之间的融合。

细胞融合技术离心振动法

物理方法之一,使用离心机等机器实现细胞之间的融合。

细胞融合的诱导物分类

细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜

关于细胞融合的诱导物的介绍

  细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细

细胞融合的诱导物介绍

细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜

细胞融合的诱导物种类有哪些?

细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜

细胞融合的诱导物介绍

细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜

细胞融合技术的诱导物介绍

细胞融合的诱导物种类很多.常用的主要有生物法用灭活的仙台病毒(Sendai virus),化学法如用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)和物理法如电脉冲,振动、离心、电激。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得、简便,且融合效果稳定。PEG的促融机制尚不完全清楚,它可能引起细胞膜

诱导动物细胞融合的方法

  在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采用电融合技术,人为地促进细胞融合。   病毒诱导融合   病毒是最早采用的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用