反相与正相色谱法有何区别

反相还是正相,是根据流动相相对于固定相的极性而言的。 流动相极性强于固定相的,称作反相色谱;流动相极性弱于固定相的,称作正相色谱。反相色谱流动相的极性强,容易带着极性分子走,而留下非极性分子。这主要用于非极性样品的分离。常用的高压液相色谱都是这种,也有人喜欢说反相液相色谱,其实是一个意思,就是显得博学一点。正相色谱固定相极性强,容易把极性分子留下,故主要用于极性样品的分离。如离子色谱。实际应用好像没有太注意正相还是反相,倒是都很注意柱子能承受什么样极性的物质。反相液相色谱柱不可以用强极性的纯水,都是要加入至少5%的有机溶剂来弱化水的极性。 正相的离子色谱柱则坚决不可以进入有机物质。但是气相色谱实际也是一种正相色谱,却往往要求不可以有水进入。高效液相色谱的正相与反相区分方式如下:正相色谱:固定相极性大于流动相极性;反相色谱:固定相极性小于流动相极性。高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatog......阅读全文

反相色谱的反相介质是什么?

反相色谱(RPC)是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与HIC一样,RPC中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,RPC固定相表面完全被非极性基团所覆盖,表现出强烈的疏水性。因此,必须用极性有机溶剂(如

反相色谱

根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。

反相色谱柱

 反相色谱柱

反相色谱RPC

  反相色谱( RPC)是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用,尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系,一般不可能在洗脱时间(体积)的基础上识别被分离的样品。通常,每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析,才能得到蛋白质分子的分子行为表征。在 HPLC系统的基础

反相色谱介绍

反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚,是液相色谱分离模式中使用zui为广泛的一种,对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析,反相液相色谱正受到越来越多的关.反相色语法是以表面非极性载体为固定相,面以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式.反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团,基于

反相色谱RPC

   反相色谱( RPC)是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用,尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系,一般不可能在洗脱时间(体积)的基础上识别被分离的样品。通常,每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析,才能得到蛋白质分子的分子行为表征。   在 HPLC系统

反相色谱RPC

   反相色谱( RPC)是高效液相色谱HPLC最受欢迎的一个应用,尤其对蛋白的表征非常有用。因为样品的洗脱与其增水性有很大关系,一般不可能在洗脱时间(体积)的基础上识别被分离的样品。通常,每一洗脱片段都必须用其它技术进行进一步的分离和分析,才能得到蛋白质分子的分子行为表征。   在 HPLC系统

反相渗透的概念

中文名称反相渗透英文名称reverse osmosis定  义溶液中小分子溶质在压力驱动下从半透膜低浓度侧向高浓度侧的转移。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

反相介质性能特点

反相介质性能稳定。分离效率高,可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱等含有非极性基团的各种物质。

反相色谱法

反相色谱法应用中性、非极性大孔的填充材料和极性流动相。分离基于被分析物质与固定相之间的相互作用,换句话说,也就是样品的疏水性。

反相渗透的定义

中文名称反相渗透英文名称reverse osmosis定  义溶液中小分子溶质在压力驱动下从半透膜低浓度侧向高浓度侧的转移。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

反相色谱的概念

反相液相色谱柱效高、分离能力强、保留机理清楚,是液相色谱分离模式中使用最为广泛的一种,对于生物大分子、蛋白质及酶的分离分析,反相液相色谱正受到越来越多的关.反相色语法是以表面非极性载体为固定相,面以比固定相极性强的溶剂为流动相的—种液相色谱分离模式.反相色谱固定相大多是硅胶表面键合疏水基团,基于样品

反相层析的相关介绍

  在吸附层析中,高极性物质在层析柱上吸附较牢,洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,最先洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析。用

反相层析技术介绍

在吸附层析中,高极性物质在层析柱上吸附较牢,洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,最先洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析。用HP

反相色谱仪分类

反相色谱仪分类有多种。1、按分离目的可分:化验室反相色谱仪和工业反相色谱仪。2、按功能可分:分析型反相色谱仪和生产型反相色谱仪。3、按分离规模可分:小型反相色谱仪和大型反相色谱仪。4、按结构可分:台式反相色谱仪和落地式反相色谱仪。5、按用途可分:反相生物色谱仪、反相制药色谱仪、反相化工色谱仪、反相食

反相高效液相色谱

实验材料 蛋白质标样试剂、试剂盒 乙睛(HPLC级)去离子水(HPLC级) 三氟乙酸(TFA)仪器、耗材 HPLC 色谱系统 反相柱实验步骤 1.进行空白或对照层析谱分析(即在步骤①中不加样)。一般这是进行一天层析工作的开始。下面是推荐使用的用于 RP-HPLC 系统评估的标准色谱条件。(1)线性梯

关于反相色谱的介绍

  根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。

高效反相液相色谱

反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反相液

反相色谱柱的选择

1.柱子的PH值使用范围反相柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。一旦发生上述情况,色谱柱人口处会塌陷

反相色谱柱效能评价

一、反相色谱柱评价条件 对于一根填充柱来说,最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系,对于含有酸碱性组份的样品,流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系;检测波长一般在254nm下检测,因为在此波长处,甲醇、乙腈,磷酸缓冲

反相高效液相色谱

方案1 蛋白质 RP-HPLC 的标准色谱条件 方案2 填充 RP-HPLC 毛细管微柱 方案3 不易分离的大分子量多肽的纯化实验 方案4 用 RP-HPLC 对固相合成的多肽进行纯化实验 方案5 用 RP-HPLC 技术对多肽和蛋白质混合

反相层析的应用特点

在吸附层析中,高极性物质在层析柱上吸附较牢,洗脱时发生拖尾现象和保留时间长的问题。如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,最先洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析。用HP

反相色谱柱的选择

 反相色谱柱的选择:   1.柱子的PH值使用范围   反相色谱柱优点是固定相稳定,应用广泛,可使用多种溶剂。但硅胶为基质的填料,使用时一定要注意流动相的PH范围。   一般的C18柱PH值范围都在2-8,流动相的PH值小于2时,会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要

高效反相液相色谱

            实验方法原理 反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高

高效反相液相色谱

实验方法原理反相色谱(reversed phasc chromatography, RPC)是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式,任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分,这部分越大,一般保留值越高,在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式,在生物大分子的反

反相层析的基本定义

如果在支持物上涂上一层高碳原子的疏水性强的烷烃类,洗脱液用极性强的溶剂,如甲醇和水的混合物。则被分离样品中的极性强的物质不被吸附,最先洗下来,得到较好的分离效果。这种层析法与普通的吸附层析法相反,故称为反相层析。目前用HPLC做反相层析常用的ODS柱,即在支持物的表面上连接了C18H37Si—基团。

何谓反相液相色谱

液-液色谱有正相和反相之分。如果采用极性固定相和相对非极性流动相,就称为正相;如果采用相对非极性固定相和极性流动相,则称为反相。由于极性化合物更容易被极性固定相所保留,所以正相液-液色谱系统一般可用于分离极性化合物。相反,反相液-液色谱系统一般可用于分离非极性或弱极性化合物。正相色谱的流出顺序是极性

反相色谱柱效能评价

一、反相色谱柱评价条件对于一根填充柱来说,最基本的柱性能评价指标是柱效和峰对称的测定。反相色谱柱评价所需常用的流动相一般是甲醇或者乙腈与水的体系,对于含有酸碱性组份的样品,流动相为甲醇或者乙腈与缓冲盐的体系;检测波长一般在254nm下检测,因为在此波长处,甲醇、乙腈,磷酸缓冲盐均没有紫外吸收,而且标

什么是反相色谱柱

固定相为非极性的色谱柱。在反相键合相色谱中,溶剂的极性越弱洗脱能力越强,即弱极性溶剂的洗脱强度更大

反相萃取柱操作

反相萃取柱操作从极性基体中提取非极性的样品1、活化:以3-5毫升甲醇淋洗萃取柱;以3-5毫升去离子水(或缓冲液)淋洗萃取柱并保持萃取柱湿润2、上样:以合适的流速使样品均匀通过萃取柱3、清洗:以5毫升适当极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱(常用的有纯水,缓冲液,水/有机溶剂混合液)4、洗脱:将被测样品,用