卵黄抗体制备的实验材料
1.健康产蛋鸡(最好是SPF鸡)、免疫抗原(如鸡新城疫灭活疫苗)、弗氏佐剂。 2.灭菌生理盐水或0.01mol/L pH7.2 PBS、海藻酸钠、饱和硫酸铵等。 3.毛细滴管、注射器、碘酊棉、酒精棉、烧杯、玻璃棒、离心管、pH试纸等。 4.微量振荡器、离心机、分光光度计等。......阅读全文
卵黄抗体制备的实验材料
1.健康产蛋鸡(最好是SPF鸡)、免疫抗原(如鸡新城疫灭活疫苗)、弗氏佐剂。 2.灭菌生理盐水或0.01mol/L pH7.2 PBS、海藻酸钠、饱和硫酸铵等。 3.毛细滴管、注射器、碘酊棉、酒精棉、烧杯、玻璃棒、离心管、pH试纸等。 4.微量振荡器、离心机、分光光度计等。
卵黄抗体制备的所需实验材料介绍
1.健康产蛋鸡(最好是SPF鸡)、免疫抗原(如鸡新城疫灭活疫苗)、弗氏佐剂。 [3] 2.灭菌生理盐水或0.01mol/L pH7.2 PBS、海藻酸钠、饱和硫酸铵等。 [3] 3.毛细滴管、注射器、碘酊棉、酒精棉、烧杯、玻璃棒、离心管、pH试纸等。 [3] 4.微量振荡器、离心机、分光光度计等。
卵黄抗体制备的实验原理
通过免疫注射产蛋鸡,即可由其生产的蛋黄中提取相应的抗体,并可用于相应疾病的预防和治疗,这类制剂称为卵黄抗体。卵黄抗体在临床上应用较为广泛,其优点是鸡蛋比动物血清更容易获得,且卵黄中抗体含量较高。禽类的免疫器官法氏囊主要控制机体的体液免疫,机体的免疫应答发生后,体液中成熟的骨髓依赖性淋巴细胞受相关免疫
卵黄抗体制备的实验原理
通过免疫注射产蛋鸡,即可由其生产的蛋黄中提取相应的抗体,并可用于相应疾病的预防和治疗,这类制剂称为卵黄抗体。卵黄抗体在临床上应用较为广泛,其优点是鸡蛋比动物血清更容易获得,且卵黄中抗体含量较高。禽类的免疫器官法氏囊主要控制机体的体液免疫,机体的免疫应答发生后,体液中成熟的骨髓依赖性淋巴细胞受相关免疫
卵黄抗体制备的结果判定
对获得的卵黄抗体进行的效价及活性测定,可采用免疫电泳实验、琼脂免疫扩散实验、血凝抑制实验、酶联免疫吸附实验等多种抗体检测方法。
卵黄抗体制备的结果判定
对获得的卵黄抗体进行的效价及活性测定,可采用免疫电泳实验、琼脂免疫扩散实验、血凝抑制实验、酶联免疫吸附实验等多种抗体检测方法。
卵黄抗体制备的操作方法
1.实验动物的选择:选择健康、产蛋率高的蛋鸡,购进后饲养1周左右,观察其健康情况。 2.抗原的准备:免疫抗原有多种选择,一般采用灭活的病原体,也可以选择激素类、蛋白类物质,使用前可以选用弗氏完全佐剂乳化抗原。 3.动物免疫:免疫方式主要有口鼻接种、皮内接种、皮下接种、肌肉注射、腹腔注射以及静脉注射。
卵黄抗体制备的操作方法
1.实验动物的选择:选择健康、产蛋率高的蛋鸡,购进后饲养1周左右,观察其健康情况。2.抗原的准备:免疫抗原有多种选择,一般采用灭活的病原体,也可以选择激素类、蛋白类物质,使用前可以选用弗氏完全佐剂乳化抗原。 3.动物免疫:免疫方式主要有口鼻接种、皮内接种、皮下接种、肌肉注射、腹腔注射以及静脉注射。禽
卵黄抗体的概述
卵黄抗体(yolk antibody, IgY):通过免疫注射产蛋鸡,即可由其生产的蛋黄中提取相应的抗体,并可用于相应疾病的预防和治疗,这类制剂称为卵黄抗体。
如何提取卵黄抗体?
卵黄的收集:首先需要从鸡蛋中收集卵黄。 卵黄的破碎和匀浆:将收集到的卵黄通过机械或化学方法破碎,形成均一的悬浮液。 初步分离:通过离心等物理方法,将卵黄中的大颗粒物质分离出来,留下上清液。 蛋白质纯化:利用离子交换层析、凝胶过滤层析或亲和层析等技术,根据卵黄抗体与其他蛋白质不同的物理化学性
卵黄抗体有何作用?
提供营养:卵黄中含有脂肪、蛋白质、糖类等营养物质,可以为胎儿提供必需的营养,帮助胎儿正常生长发育。 进行气体交换:在胚胎发育的早期阶段,卵黄囊充当胎盘的功能之一,允许胎儿通过卵黄囊吸入氧气,同时排出二氧化碳。 判断妊娠状态:卵黄囊的存在是判断宫内妊娠的重要标志之一。通过B超检查可以观察到卵黄
卵黄琼脂培养基的制备
成分1 基础培养基肉浸液 1000mL蛋白胨 15g 氯化钠 5g 琼脂 25~30g pH7.5 2 50%葡萄糖水溶液 3 50%卵黄盐水悬液 制法 制备基础培养基,分装每瓶100mL。121℃高压灭菌1
抗肽抗体的制备实验
提高免疫原性肽的抗血清,是最简单的方法,获得非隔离的蛋白质的抗体,例如,对来自DNA序列信息的推定蛋白质序列。 这种方法也是有用的,当隔离的抗原是困难或费时,或当抗原是一个大的蛋白家族的成员。实验步骤: 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠
单克隆抗体的制备实验
单克隆抗体的制备实验可以用于:(1)将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓肿瘤细胞杂交, 获得既能产生抗体, 又能无限增殖的杂种细胞,并以此生产抗体;(2)该技术是仅由一种类型的细胞制造出来的抗体,对应于多克隆抗体、多株抗体——由多种类型的细胞制造出来的一种抗体。实验方法原理单克隆抗体技术(monoclo
抗肽抗体的制备实验1
实验材料抗体试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液中,置于一个2 ml 的玻璃试管,加50 μl MBS/DMF溶液,于室温下温和搅拌30 min。 2. 加
抗肽抗体的制备实验2
实验材料抗体试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 将10 mg 的血蓝蛋白溶于2 ml pH10的硼酸缓冲液中,置于15 ml 的玻璃试管中,温和振摇。2. 加10 μmol 的合成肽。3. 缓慢加入1 ml 的0.3%戊二醛溶液,于室温
单克隆抗体上清制备实验——大量制备
实验材料目的杂交瘤试剂、试剂盒完全 DMEM-10 培养液(含 5~10 mmol/L HEPES pH 7.2~7.4)仪器、耗材250 ml 无菌锥形离心管转瓶培养装置850 cm2 旋转培养瓶175 cm2 组织培养瓶实验步骤1. 重复基本方案 1 步骤 1,并按 1:10 分传到终体积为 1
单克隆抗体上清的制备实验
实验材料 杂交瘤试剂、试剂盒 完全培养基仪器、耗材 培养箱转子离心机实验步骤 1. 将杂文瘤置于一个盛有完全DMEM-10培养基的175 cm2组织培养瓶中,置37 ℃CO2培养箱中,直至生长旺盛适于分传。2. 按1:10的比例将细胞分传到一个新的175 cm2的培养瓶中,加入完全DMEM-10
单克隆抗体的腹水制备实验
实验材料 杂交瘤细胞试剂、试剂盒 完全DMEM-10HEPES丙酮酸钠PBS仪器、耗材 注射针头离心管转子离心机实验步骤 1. 用20G或22G的注射针,小鼠腹膜内注射降植烷,每只鼠0.5 ~ 1 ml,1周后接种细胞。 2. 在175 cm2培养瓶中加完全DMEM-10/HEPES/丙酮酸钠培
单克隆抗体的腹水制备实验
实验材料杂交瘤细胞试剂、试剂盒完全DMEM-10HEPES丙酮酸钠PBS仪器、耗材注射针头离心管转子离心机实验步骤1. 用20G或22G的注射针,小鼠腹膜内注射降植烷,每只鼠0.5 ~ 1 ml,1周后接种细胞。 2. 在175 cm2培养瓶中加完全DMEM-10/HEPES/丙酮酸钠培养液,进
单克隆抗体上清制备实验
实验方法原理 实验材料 目的杂交瘤试剂、试剂盒 完全 DMEM-10 培养液(含 5~10 mmol/L HEPES pH 7.2~7.4)仪器、耗材 50 ml 无菌锥形离心管175 cm2 组织培养瓶实验步骤 1. 将杂交瘤置于一个盛有完全 DMEM-10 培养基的 175 cm2 组织培养瓶中
单克隆抗体上清制备实验
与多克隆抗血清相比,采用单克隆抗体(MAb)的最主要的优势就是有可能得到大量的特异性单克隆抗体可供应用。MAb 制剂通常包括杂交瘤上清、由接种了杂交瘤的小鼠制备的腹水,以及纯化的 MAb。杂交瘤上清容易制备,特别是用于制备大量不同的 MAb , 但其中 MAb 的浓度则相对较低。为得到纯化的制剂,可
单克隆抗体腹水制备实验
实验方法原理 高滴度的单克隆抗体的制备可以通过在小鼠的腹腔内接种能产生 MAb 的杂交瘤细胞,从而产生腹水来获得。腹水可收集几次,经热灭活、滴定后储存。实验材料 裸鼠(6~8 周龄 无特定病原体/注射了鼠鼠杂交瘤细胞的同系宿主)目的杂交瘤试剂、试剂盒 完全DMEM-10培养液(含10mmol/L H
抗体的制备
为了研究抗体的理化性质、分子结构与功能,以及应用抗体于临床疾病的诊断、治疗及预防都需要人工制备抗体。目前,根据制备的原理和方法可分为多克隆抗体、单克隆抗体及基因工程抗体三类。 一、多克隆抗体 大多数抗原是由大分子蛋白质组成,但只是抗原上有限部位的特殊分子结构能与其相应抗体结合,称此部位为抗原
单克隆抗体上清的制备实验1
实验材料杂交瘤试剂、试剂盒完全培养基仪器、耗材培养箱转子离心机实验步骤1. 将杂文瘤置于一个盛有完全DMEM-10培养基的175 cm2组织培养瓶中,置37 ℃CO2培养箱中,直至生长旺盛适于分传。2. 按1:10的比例将细胞分传到一个新的175 cm2的培养瓶中,加入完全DMEM-10培养液到
单克隆抗体上清的制备实验2
实验材料抗体试剂、试剂盒PBS仪器、耗材离心机离心管实验步骤1. 同备择方案1中大规模制备MAb上清的步骤1~4,但等细胞长到合适的密度时就应收获细胞,或者是在细胞生长的平台期收获。 2. 将细胞倒入无菌的250 ml 锥形离心管中,于4℃ 250 g 离心15 min,弃上清。 3. 置细胞
病毒免疫荧光实验_荧光抗体的制备
实验材料荧光色素试剂、试剂盒抗体实验步骤荧光色素的选择 可以产生明亮荧光的染料物质,称荧光色素 (fluorochrome) 。目前常用的荧光色素有以下几种:(1) 异硫氰酸荧光素 (Fluorescein isothiocyanate, FITC): 在碱性条件下, FITC 的异硫氰酸基在水溶液
单克隆抗体上清的制备实验——单抗上清大量制备
实验材料抗体试剂、试剂盒DMEM-10乙醇仪器、耗材离心机培养瓶转子实验步骤1. 重复基本方案1步骤1,按1:10分传到终体积100 ml 的完全DMEM-10/HEPES中。 2. 准备传代细胞时,应将175 cm2培养瓶中的内容物(100 ml)转移到—个850 cm2旋转培养瓶中,另加15
抗原和免疫血清的制备实验——抗人血清抗体的制备
实验材料家兔试剂、试剂盒羊毛脂石蜡油卡介苗生理盐水仪器、耗材研钵离心机培养箱实验步骤1. 弗氏佐剂的制备将羊毛脂与石蜡油按1:5比例混合,高压灭菌。2. 人血清—弗氏完全的制备将灭菌佐剂一份置研钵中,边研磨边滴加等量的含卡介苗3—4毫克/毫升的抗原液,使成油色水乳剂,研磨要充分,使乳剂滴入冰水中
荧光抗体的制备
1 荧光素与抗体结合(标记) 2 荧光抗体的纯化 3 荧光抗体的鉴定 1.荧光素与抗体结合方法: ⑴ 透析法:①适用于蛋白质含量低、样品体 积小的抗体溶液的标记 ②标记较均匀,非特异荧光较低 ⑵ 搅