his蛋白分离纯化时用咪唑的原因

是因为his含有咪唑基团,咪唑环可以与二价金属阳性子结合。呃,完整的解释是这样的: his含有咪唑基团,可以与二价金属阳性子结合,当带His标签的蛋白质结合在特殊的阳离子柱上的时候,可以被咪唑竞争下来。。。......阅读全文

轻松纯化His标签胞外分泌蛋白

从真核细胞上清液中纯化蛋白是一项繁琐的工作。通常情况下胞外分泌蛋白的浓度很低,且蛋白很容易被细胞上清液中的蛋白酶降解。当然,Cube Biotech实验室也面临同样的问题。然而一天,Cube Biotech的科学家想到是否我们可以把磁珠直接加入溶液,从平衡体系中分离出带His标签的蛋白?通过

Histag蛋白纯化技术解读(二)

实验流程对比展示通过实验流程的对比发现,可以看出BeaverBeads™与金属传统离子鳌和琼脂糖预装柱纯化组氨酸标签蛋白操作流程的优化与效率的提升。图:磁性分离器图:BeaverBeads™ IDA-Nickel产品包装形式Cat. 70501-K10产品包含实验过程及磁珠再生所需要的各种试剂,更方

Histag蛋白纯化技术解读(一)

随着基因组学和基因工程技术的发展,快速获得目标蛋白的基因已相对容易。将目标基因构建到原核或真核细胞系统中进行蛋白质的重组表达是获得目的蛋白的有效方法。今天,小海狸就为大家来详细说一说。His-tag蛋白纯化技术在进行基因重组时,通常将目的蛋白和一个亲和纯化标签进行融合表达,然后借助亲和层析方法实现蛋

his蛋白分离纯化时用咪唑的原因

是因为his含有咪唑基团,咪唑环可以与二价金属阳性子结合。呃,完整的解释是这样的: his含有咪唑基团,可以与二价金属阳性子结合,当带His标签的蛋白质结合在特殊的阳离子柱上的时候,可以被咪唑竞争下来。。。

His抗体推荐—Abbkine全系列His标签抗体

His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标

带HIS蛋白用镍柱纯化后的保存问题

1.蛋白的保存很大程度上依赖于蛋白本身的结构稳定性,其次和保存条件优化有关;2.尽量避免蛋白的反复冻融,这会对蛋白的结构和活性造成破坏;像你说到的第二天就要用,根本没必要放在-70℃低温,一般来讲,尽量安排好实验周期,在3天内用完蛋白(4℃保存)是理想条件;3.如果不得不保存,要分装,留下马上就用的

带HIS蛋白用镍柱纯化后的保存问题

蛋白的保存很大程度上依赖于蛋白本身的结构稳定性,其次和保存条件优化有关;尽量避免蛋白的反复冻融,这会对蛋白的结构和活性造成破坏;像你说到的第二天就要用,根本没必要放在-70℃低温,一般来讲,尽量安排好实验周期,在3天内用完蛋白(4℃保存)是理想条件;如果不得不保存,要分装,留下马上就用的放在4℃,其

His抗体的简介

  His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标签融

蛋白纯化的首选标签Histag的优势及应用

His标签蛋白纯化工具-蛋白纯化必备在大肠杆菌和别的原核系统中表达的多组氨酸标签重组蛋白一般运用固定的金属离子亲和色谱来纯化或称为 IMAC. 在这个进程中,支撑物 (一般是珠状琼脂糖凝胶或磁珠颗粒) 用适宜的耦合试剂来进行衍生,比方氨三乙酸 nitrilotriacetic acid (NTA

基因带六个his标签,蛋白纯化时为何挂不上镍柱

。。。等待高人回答txstbbm(站内联系TA)可能情况:1,ORF不完整或者不是预期的ORF,His没表达出来2,His被空间结构所掩盖,建议变性后再过柱cloudy3197(站内联系TA)同一ls,可能跟蛋白空间结构有关,变性后再上柱。2. 柱子是新的还是以前用过的,旧的应该很好的处理一下,3.

His标签蛋白纯化试剂盒操作步骤(以大肠杆菌为例)

使用说明:对于用镍柱纯化大肠杆菌中His标签蛋白比较熟悉的使用者可以直接参考“4. 简化的操作流程”。否则请参考如下详细内容:如下以最常见的大肠杆菌中表达纯化His标签重组蛋白为例,说明本产品的使用方法。在其它体系中表达时,请参考该表达体系的相关使用说明,并借鉴大肠杆菌中纯化His标签重组蛋白的使用

如何选择合适的His标签抗体?

His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His-tag 融合标签与其他标签相比有很多明显优势, 是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His抗体可以用于检测和His标

大鼠组胺(HIS)酶联免疫分析

大鼠组胺(HIS)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中组胺(HIS)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠组胺(HIS)水平。用纯化的大鼠组胺(HIS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中

亲和偶联--组氨酸标签(Histag)

亲和层析法(IMAC)是目前最广泛使用的纯化技术,该技术是基于蛋白表面残基(组氨酸、半胱氨酸和一些少量的色氨酸等)与过渡金属阳离子的相互作用而形成螯合,该过渡金属 / 蛋白络合物再与螯功能基团链接到琼脂糖微球上,通常通过降低 pH值或添加咪唑的方式来洗脱目标蛋白。 低耐压ABT 提供两种螯合微球,使

pEXCHis载体的基本信息和质粒图谱

pEX-C-His载体载体基本信息载体名称pEX-C-His载体抗性Ampicillin载体长度4583 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源OriGene拷贝数High copy numberpEX-C-His载体质粒图谱

pEXNHis载体的基本信息和质粒图谱

pEX-N-His载体载体基本信息载体名称pEX-N-His载体抗性Ampicillin载体长度4539 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源OriGene拷贝数High copy numberpEX-N-His载体质粒图谱

重组表达载体pET32aHisAPC10的序列测定

通过上述实验所构建的表达质粒pET-32a-His-APC10经限制性内切酶分析正确后,必须进行DNA序列测定,以获得序列完全正确的克隆。1. 基本原理目前应用的DNA序列测定方法有双脱氧法(Sanger法)和化学测序法(Maxam-Gilbert法),在变性聚丙稀酰胺凝胶(测序胶)上进行高分离度的

pEXNHisGST载体的基本信息和质粒图谱

pEX-N-His-GST载体载体基本信息载体名称pEX-N-His-GST载体抗性Ampicillin载体长度5227 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源OriGene拷贝数High copy numberpEX-N-His-GST载体质粒图谱

人组胺(HIS)酶联免疫分析试剂盒使用说明

人组胺(HIS)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围: 96T0.5μg/L - 18μg/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中组胺(HIS)含量。 实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人组胺(HIS)水平。用纯化的人组胺(HIS)抗体包被微孔板,制成

pMALc5XHis载体的基本信息和质粒图谱

pMAL-c5X-His载体载体基本信息载体名称pMAL-c5X-His载体抗性Ampicillin载体长度5695 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Riggs P.拷贝数High copy numberpMAL-c5X-His载体质粒图谱

「云住养」用“移动SaaS+简易版HIS”切入智慧养老

  医护人员可以随时随地对老人进行管理。  中国已进入老龄社会,养老成为大家普遍关注的社会问题。今年10月,党的十九大报告中提出,要构建养老、孝老、敬老政策体系和社会环境,推进医养结合,加快老龄事业和产业发展。在社会需求和国家政策的双重激励下,养老市场发展进入黄金期。  数据显示,2016 国内养老

超视计亮相-CSCB2025:HISSIM-开启细胞观察新纪元

  4 月9 日,中国细胞生物学学会2025 年全国学术大会在广东珠海隆重开幕,吸引了10 余名院士及近2500 名专家学者参与。广州超视计生物科技有限公司(以下简称“超视计科技”)携其革命性的超分辨显微成像系统——HIS-SIM 系列产品闪耀登场,引发广泛关注。  超视计科技的旗舰产品 HIS-S

瞄准百亿基层信息化市场-腾讯参与云HIS还有机会么?

  近日,腾讯云与东华股份(002065.SZ)旗下全资子公司东华医为科技有限公司(以下简称“东华医为”)联合发布了大健康医疗服务互联网云生态平台iMedical Cloud暨云HIS产品。  云HIS全称为基于云计算的医疗卫生信息系统(Cloud-Based Healthcare Informat

培养基细胞计数与活力测定操作步骤

(一)细胞计数  1、将血球计数板及盖片用擦试干净,并将盖片盖在计数板上。  2、将细胞培养基悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液充满盖片和计数板之间。  3、静置3分钟。  4、镜下观察,计算计数板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算:  细胞数/ml=4大格细胞总数/ 4×1

通过相互作用交配确定识别特异性实验

实验方法原理 实验材料 质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒 10 cm 完全极限(CM) 缺失成分培养基平板YPD 平板 X-gal 平板仪器、耗材 30℃ 培养箱实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 用乙酸锂转化法将单个肽适配体捕获质粒与对照质粒(pJG4-5)转化人 EG

通过相互作用交配确定识别特异性实验

实验材料质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒10 cm 完全极限(CM) 缺失成分培养基平板YPD 平板 X-gal 平板仪器、耗材30℃ 培养箱实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 用乙酸锂转化法将单个肽适配体捕获质粒与对照质粒(pJG4-5)转化人 EGY48 (Mata)。

肠激酶的分离纯化特点

与大多蛋白的分离纯化方法类似, rEK可通过硫酸铵沉淀、DEAE柱、凝胶层析和透析等方法得到纯品, 另外, 运用组氨酸 (Histidine, His) 在蛋白末端进行标记, Nickel金属螯合柱亲和纯化这种低成本高效率一步分离蛋白的方法, 也正广泛地运用到rEK的分离纯化, 其收率可达50%以上

肠激酶的分离纯化方法

与大多蛋白的分离纯化方法类似, rEK可通过硫酸铵沉淀、DEAE柱、凝胶层析和透析等方法得到纯品, 另外, 运用组氨酸 (Histidine, His) 在蛋白末端进行标记, Nickel金属螯合柱亲和纯化这种低成本高效率一步分离蛋白的方法, 也正广泛地运用到rEK的分离纯化, 其收率可达50%以上

Nature子刊:发现组氨酸调控蛋白多肽淀粉样组装并赋予其纳米酶活性

  生物大分子自组装成超分子结构后会产生重要功能,这与生命系统中的生理或病理状态相关。蛋白质和多肽组装成淀粉样纤维的行为已被认为与神经退行性疾病密切联系。淀粉样蛋白组装体具有相似的交叉β结构,其中β链片段垂直于长纤维排列。这种类型的组装是由主链氢键和侧链相互作用(如π-π堆积、疏水相互作用和范德华)

利用双杂交系统相互作用阱/筛选特定蛋白的肽适配体...

利用双杂交系统相互作用阱/筛选特定蛋白的肽适配体实验实验方法原理 实验材料 DNA酵母株试剂、试剂盒 PCR 引物聚乙二醇甘油存储液Tris·ClX-gal 平板完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板仪器、耗材 30℃ 和 42℃ 培养箱或水浴实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其