基于膜透过荧光蛋白的邻近细胞标记技术获进展

1月3日,国际学术期刊PNAS发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)周斌组和复旦大学附属中山医院王立新教授合作的研究成果“Genetic dissection of intercellular interactions in vivo by membrane-permeable protein”。该研究利用表达膜透过性荧光蛋白的遗传工具小鼠,建立了体内邻近细胞标记技术,并利用该技术揭示了肝脏不同区域中内皮细胞的异质性。 细胞之间的相互作用对于多细胞生物体生长发育、稳态维持以及损伤修复等过程至关重要,但是监测体内细胞互作的遗传学技术鲜有报道。当前的遗传学手段基本上是针对特定细胞自身进行操作,无法深入研究细胞之间的互作。因此,建立新型邻近细胞标记技术对了解生物体内细胞间互作及其功能具有重要意义。 sLP-mCh是脂溶性标签连接mCherry的融合荧光蛋白(Ombrato et al., Nat......阅读全文

癌细胞产生更多的Win并让邻近的健康细胞产生更多的Lose

  癌细胞对人体的自然防御产生如此强大抵抗力的原因之一是它们实际上是人体细胞,因此它们具有先天的机制,不仅可以欺骗人体的防御和维护系统,而且甚至可以劫持它们。因此,发现癌细胞的全部伎俩是对抗癌症的关键。  在一项新的研究中,来自葡萄牙尚帕利莫未知技术研究中心的Eduardo Moreno、Rajan

新型探针可高效监控细胞内生命活动

  记者3月17日从香港大学获悉,该校化学系教授孙红哲领导的跨学科研究团队研发出了可在活体细胞内标记标签蛋白的最新荧光探针。相关研究成果日前刊登于美国《国家科学院院刊》,新技术已申请了美国及欧洲的ZL。  多年来,科学家致力于开发荧光标记技术来监测细胞内的标签蛋白。孙红哲团队研发的新荧光探

邻近相互作用的概念

中文名称邻近相互作用英文名称proximate interaction定  义在器官形成过程中,一组细胞与其邻近细胞相互作用,导致邻近细胞改变其形态、分裂速度或分化的现象。应用学科遗传学(一级学科),发育遗传学(二级学科)

什么是酶的邻近效应

酶的邻近效应:酶是由活细胞产生的、对其底物具有高度特异性和高度催化效能的蛋白质或RNA。酶的催化作用有赖于酶分子的一级结构及空间结构的完整。若酶分子变性或亚基解聚均可导致酶活性丧失。酶属生物大分子,分子质量至少在1万以上,大的可达百万。在酶促反应中,由于酶和底物分子之间的亲和性,底物分子有向酶的活性

RFLP标记技术

实验概要DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction  Fragment Length  Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切酶的酶

AFLP标记技术

实验概要AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来(附图)。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的

RAPD标记技术

实验概要运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly  amplifiled polymorphic  DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上,它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体)

髌骨骨巨细胞瘤并邻近部位复发病例分析

病例简介男,49岁,主诉:左膝肿痛,活动受限半年。现病史:半年前无明显诱因出现左膝剧烈疼痛,逐渐肿胀,休息后好转,活动后加重。体格检查:浮髌试验阳性,无关节皮肤发红,其余无异常。实验室检查无异常。患者于术后3.5年再次入院。主诉:左膝肿块伴活动困难16个月。现病史:患者入院前于外院诊断为左膝囊肿。3

原位末端标记技术检测细胞凋亡的介绍

  细胞凋亡时,DNA 断裂早于形态学改变及DNA 含量减少,原位末端标记( ISEL) 是将渗入到凋亡细胞中的外源性核苷酸在酶和DNA 的催化下与凋亡细胞因内源性核酸酶的激活而产生的单股或双股断裂相结合,较前述方面具更高灵敏性。通常有两种方法:  ①DNA 聚合酶I 或klenow 大片段介导的单

细胞核蛋白的免疫荧光染色方法

细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,P

细胞核蛋白的免疫荧光染色方法

细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,P

无需分离细胞器,新技术可定量解析亚细胞脂质合成与运输途径

中国科学院上海有机化学研究所研究员朱正江团队、陈以昀团队合作,开发了亚细胞定位邻近标记脂质组学技术,首次系统性定量解析了多种脂质合成通路与运输途径对细胞器脂质组成贡献,为深入探索亚细胞层次的脂质代谢规律及相关疾病机制提供了技术支撑。相关研究8月6日发表于《自然-化学》。作为生命活动的核心物质之一,脂

Nature子刊发布突破性单细胞标记技术

  加拿大蒙特利尔大学和麦吉尔大学的研究团队在Nature Communications杂志上发布了一种强大的单细胞标记技术。这种光漂白细胞标记法(CLaP)将成为研究者们的宝贵工具,广泛用于各个领域的科学研究,特别是基因组学研究。  “我们把激光当作画笔,一个一个地标记细胞,”蒙特利尔大学副教授S

邻近依赖性调节的定义

中文名称邻近依赖性调节英文名称context-dependent regulation定  义转录因子对转录的调节受到其同启动子上结合的其他转录因子的相对位置的影响或受共同参与的转录因子丰度的影响。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),总论(二级学科)

邻近非共振线校正背景法

背景吸收随波长而改变,因此,非共振线校正背景法的准确度较差。这种方法只适用于分析线附近背景分布比较均匀的场合。有些元素的分析线和非共振线由同一支空心阴极灯产生,有些元素由于在分析线附近找不到合适的非共振线,需要借助其他元素的空心阴极灯产生。

酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白

在过去的五年中,荧光蛋白在监测体内生物学研究中,起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是zui早被我们应 用的荧光蛋白,但是随着时间的推移,现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富,包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋 白。它们都可以

免疫标记技术介绍

免疫标记技术是指将抗原抗体反应与标记技术相结合,将已知的抗体或抗原标记上示踪物质,通过检测标记物,间接测定抗原-抗体复合物的一类实验方法。常用的标记物有酶,荧光素,放射性核素,化学发光物质及胶体金等。

我所发展聚集态蛋白质组邻近标记分析新方法

原文地址:http://www.dicp.cas.cn/xwdt/kyjz/202403/t20240311_7022478.html近日,我所精细化工研究室蛋白质折叠与聚集研究组(212组)刘宇研究员和生物技术研究部生物分子高效分离与表征研究组(1810组)张丽华研究员团队合作,通过对有机小分子光

研究通过光催化叠氮邻近标记实现亚细胞脂质动态追踪

近日,中国科学院上海有机化学研究所朱正江团队与陈以昀团队,攻克了生理状态下亚细胞脂质动态监测的领域挑战,首创了亚细胞光催化叠氮邻近标记脂质组学技术。这一技术通过高分辨质谱驱动的原位脂质组学分析,实现了线粒体、细胞核和溶酶体等关键细胞器的脂质组成解析;发展了稳定同位素示踪-光催化邻近标记联用技术,完成

研究通过光催化叠氮邻近标记实现亚细胞脂质动态追踪

近日,中国科学院上海有机化学研究所朱正江团队与陈以昀团队,攻克了生理状态下亚细胞脂质动态监测的领域挑战,首创了亚细胞光催化叠氮邻近标记脂质组学技术。这一技术通过高分辨质谱驱动的原位脂质组学分析,实现了线粒体、细胞核和溶酶体等关键细胞器的脂质组成解析;发展了稳定同位素示踪-光催化邻近标记联用技术,完成

我国学者在生物正交光催化驱动的多组学研究技术方面取得进展

图 转录组光催化标记技术CAT-seq及同步多组学光催化标记技术CAT-ortho  在国家自然科学基金项目(批准号:22222701、92478119、22321005、92253301)等资助下,北京大学樊新元、刘君、陈鹏等在化学技术服务于活细胞多组学研究方面取得进展。他们成功开发了活细胞转录组

光学磁扭仪和荧光诱导活细胞细胞核蛋白的分解

实验概要机械力在生物过程中发挥着显著作用。这些机械力可以通过骨架长丝网络传送到细胞,诱导胞浆内不同的生化反应。虽然已经有充足的报告显示,细胞质酶可被细胞表面的局部应力直接激活,但一直没有证据表明,机械力可以直接改变核功能,包括卡哈尔体蛋白质复合物的结构变化。本实验描述了通过利用磁场扭曲力改变,流式细

关于细胞凋亡检测—原位末端标记技术的基本介绍

  细胞凋亡时,DNA 断裂早于形态学改变及DNA 含量减少,原位末端标记( ISEL) 是将渗入到凋亡细胞中的外源性核苷酸在酶和DNA 的催化下与凋亡细胞因内源性核酸酶的激活而产生的单股或双股断裂相结合,较前述方面具更高灵敏性。通常有两种方法: ①DNA 聚合酶I 或klenow 大片段介导的单位

酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白(二)

下一步就是要结合信号/背景优化结果确定最佳激发和发射波长。因为初步检测结果的斯托克顿位移偏小(22nm),显然是要通过降低激发波长和增大发射波长来扩大两者之间的差异,其次还需要找到合适的发射光阻隔滤片优化最佳灵敏度。最终,我们使用5 5 0nm的激发波长来激发, 同时使用570nm的发射光阻

酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白(三)

在本次实验中,ZsGreen和DsRed细胞系在底读模式都有着相似的检测限,而且两者都比AcGFP细胞系的检测下限低3到4倍。本次实验一共重复了三次,但是DsRed实验结果并不是每次都能表现的足够好。在一次实验中,它的检测下限近似于AcGFP,但是在另一次实验中,它的检测下限又会很高。我们将这些区别

酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白(一)

简介在过去的五年中,荧光蛋白在监测体内生物学研究中,起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是最早被我们应用的荧光蛋白,但是随着时间的推移,现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富,包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋白。它们都可以在众

固相时间分辨荧光免疫分析的标记技术及标记过程中...

本研究利用BCPDA进行固相TRF IA研究,它克服了解离增强体系需增强溶液、易受环境铕离子污染、只能液相测量等缺点,简化了测量步骤。结合BCPDA标记BSA,研究标记过程中的蛋白质含量测定。为TRF IA体系提供理论依据和实验技术 。材料和方法1 材料1. 1 仪器 分光光度计,核酸蛋白检测仪,

什么是干式免疫荧光定量法

免疫荧光法(Immunofluorescence method)是将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(

什么是干式免疫荧光定量法

免疫荧光法(Immunofluorescence method)是将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(