噬菌体肽文库的定义

中文名称噬菌体肽文库英文名称phage peptide library定 义将编码多肽的外源基因插入含噬菌体外壳蛋白基因的载体,构建得到能与外壳蛋白融合表达多肽的基因文库。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)......阅读全文

噬菌体中和试验的定义和功能

中文名称噬菌体中和试验英文名称bacteriophage neutralization test;phage neutralization test定  义一种检测低水平抗噬菌体抗体的敏感试验。即将噬菌体与特异性抗体共温育,以抑制该噬菌体感染宿主,通过观察噬菌斑数量变化,可对中和作用进行定量。应用学

噬菌体中和试验的定义和目的

中文名称噬菌体中和试验英文名称bacteriophage neutralization test;phage neutralization test定  义一种检测低水平抗噬菌体抗体的敏感试验。即将噬菌体与特异性抗体共温育,以抑制该噬菌体感染宿主,通过观察噬菌斑数量变化,可对中和作用进行定量。应用学

噬菌体展示技术的原理及应用

将编码多肽的外源DNA片段与噬菌体表面蛋白的编码基因融合(插入信号肽与衣壳蛋白基因间)后,以融合蛋白的形式呈现在噬菌体的表面,每个噬菌体只含1个外源基因,被展示的多肽或蛋白可保持相对的空间结构和生物活性,展示在噬菌体的表面。导入了各种各样外源基因的一群噬菌体,就构成一个展示各种各样外源肽的噬菌体展示

抗蛋白酶肽的定义

中文名称抗蛋白酶肽英文名称antipain定  义学名:N(2)-{[(1-羧基-2-苯乙基)氨基]羰基}-L-精氨酰-N-{4-[(氨基亚氨基甲基)氨基]-1-甲酰丁酰}-L-缬氨酰胺。由多种细菌产生的一种寡肽,能抑制组织蛋白酶Ⅹ。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

用-PCR-来制备编码随机肽的双链-DNA-文库实验

            试剂、试剂盒 限制性内切酶和缓冲液 灭菌双蒸水 Tris-HCl 生物素标记的 PCR 引物 仪器、耗材

用-PCR-来制备编码随机肽的双链-DNA-文库实验

试剂、试剂盒 限制性内切酶和缓冲液灭菌双蒸水Tris-HCl生物素标记的 PCR 引物仪器、耗材 链霉抗生物素蛋白磁性珠琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂灭菌双蒸水(ddH20)10 mmol/LTris-HCl,pH8.02. 酶和酶缓冲液限制性内切酶和缓冲液

用-PCR-来制备编码随机肽的双链-DNA-文库实验

使用合成的寡核苷酸构建文库时,PCR 有两个重要的作用。第一,用与特定侧翼序列退火的引物来扩增文库,仅用少量的不同模板,就可以得到大量的 PCR 产物。第二,若要产生文库 DNA 的复杂互补链,PCR 合成法是有效的方法。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒限制

【卡梅德生物】噬菌体展示肽库构建与筛选

噬菌体是一种感染细菌的病毒,具有能够在其表面展示外源肽或蛋白质的能力。通过基因工程方法,研究人员可以将外源DNA序列插入到噬菌体外壳蛋白的编码区,使得外源肽与外壳蛋白共同表达,形成展示在噬菌体表面的融合蛋白。噬菌体展示技术是一种重要的生物技术,它可以用于发现新的药物靶点、疫苗设计以及研究蛋白质-蛋白

信息素生物合成激活肽的定义

中文名称信息素生物合成激活肽英文名称pheromone biosynthesis activating neuropeptide;PBAN定  义由脑和食道下神经节分泌的神经肽,由33个氨基酸组成,控制信息素的生物合成与分泌。应用学科生态学(一级学科),化学生态学(二级学科)

文库克隆载体介绍

用来构建所有这三种Ph.D.文库的载体,M13KE,是可以购买到的。M13KE是M13mp19的衍生株,其pIII基因的5’端构建了限制性酶切位点,用户可以将设计好的人工基因盒(synthetic cassette)插入此处构建自己的肽库。因为M13KE是噬菌体,而不是噬菌粒载体,所以在已加

尾促皮质肽的定义和结构特点

中文名称尾促皮质肽英文名称urocortin定  义最初是从大鼠中脑克隆到的促肾上腺皮质素释放素家族中的新成员,四十一肽,与尾紧张肽有63%的同源性,与促肾上腺皮质素释放素有45%的序列相同。人的尾促皮质肽基因定位于第2号染色体,其氨基酸组成与鼠的有95%的一致。尾促皮质肽对促肾上腺皮质素释放素受体

Dharmacon文库在RNAi文库筛选的应用

1.什么是文库?――大幅提高研究效率的利器以往的实验室研究中,无论是寻找新基因的功能、探索已知基因致病的机制、解析复杂信号通路网络、探索疾病发生发展的机制,药物敏感性测试或者是寻找药物开发的新靶点,科研工作者们往往是围绕着潜在的单个目标基因进行改造,包括针对该基因的过表达、沉默、敲除、激活、修饰、突

噬菌体展示技术

1985年,Smith G P第一次将外源基因插入丝状噬菌体f1的基因Ⅲ,使目的基因编码的多肽以融合蛋白的形式展示在噬菌体表面,从而创建了噬菌体展示技术。该技术的主要特点是将特定分子的基因型和表型统一在同一病毒颗粒内,即在噬菌体表面展示特定蛋白质,而在噬菌体核心DNA中则含有该蛋白的结构基因。另

利用FRW的分子制作第一张完整的大脑血管系统图谱

  开发能够结合大脑血管的药物的主要障碍是血脑屏障,这是一种选择性渗透的细胞边界,可保护中枢神经系统免受血液中潜在的有毒物质的侵害。然而,该研究表明FRW与血脑屏障中的内皮细胞连接精确结合。因此,除了生成大脑血管系统的完整图谱之外,新技术还可用于检测血脑屏障中的间隙类型,这可能是阿尔茨海默氏症和帕金

抗原抗体反应抗体基因文库

  抗体基因文库(antibody recombination library)是将不同的重链和轻链基因随机组合,克隆到合适的表达载体中,在原核细胞表达不同的抗体,形成一个抗体库,从这个抗体库中,用抗原可以筛选到相应的抗体基因。抗体基因来源于杂交瘤细胞或动物B细胞(免疫或未免疫)的DNA和mRNA。

CDNA文库

 CDNA文库(主要内容如下)·         Construction of cDNA Library·         Construction of Genome DNA Library·         Library Screening  OthersConstruction of cD

赖仞小组发现结核杆菌噬菌体中含抗菌肽

  中科院昆明动物所研究员赖仞领导的课题组,从结核杆菌噬菌体中识别出一小分子多肽。该抗菌肽有望成为一种治疗结核杆菌感染的辅助药物,或作为研发抗结核药物的模板。相关成果日前发表于《美国实验生物学学会联合会杂志》。   据介绍,结核病由人类重大病原菌结核杆菌感染引起,全球有三分之一的人口感染过结核杆菌

噬菌体展示技术与抗体药物研发

  2018年诺贝尔化学奖尘埃落定,授予Frances Arnold、George Smith、Gregory Winter三人。其中化学奖一半的奖金授予美国科学家Frances Arnold,奖励她的工作实现了酶的定向进化;另一半的奖金授予英国科学家Gregory Winter以及美国科学家Geo

cDNA-文库的构建

此经典方案建立在 Gubler-Hoffman 法(Gulber-Hoffman 1983) 之上,分为六个阶段。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)上册,作者:黄培堂。实验材料λ噬菌体臂大肠杆菌菌株用于λ噬菌体的包装抽提物试剂、试剂盒放线菌素 D二硫苏糖醇EDTATris-ClMgCl2反转录酶

cDNA-文库的构建

            实验材料 λ噬菌体臂 大肠杆菌菌株 用于λ噬菌体的包装抽提物 试剂、试剂盒 放线菌素 D

基因组文库和cDNA文库的构建及筛选

刘芝华 中国医学科学院肿瘤研究所  分子肿瘤学国家重点实验室 概念: 基因组文库是含有某种生物体全部基因的随机片段的重组DNA克隆群体;cDNA文库是指含有所有重组cDNA的克隆群体。   基因组文库:来源于基因组DNA,反映基因组的全部信息,用于基因组物理图谱的构建,基因组序列分析,基因在染色体上

cDNA文库构建

实验方法原理 cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。经典 cDNA 文库构建的基本原理是用 Oligo(dT) 作逆转录引物,或者用随机引物,给所合成的 cDNA 加上适当的连接接头,连接到适当的载体中获得文库。其基

cDNA文库构建

cDNA文库构建可以:(1)用于分离全长基因进而开展基因功能研究;(2)筛选目的基因并直接用于表达;(3)提供构建分子标记连锁图谱的所用探针。实验方法原理cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。经典 cDNA 文库构建

CDNA文库筛选

(一)λgt11 cDNA文库铺平板宿主细菌制备1.用一个E.coli宿主菌株单菌落分别接种2×5ml LB培养基(Y1088用于噬菌斑杂交,Y1090用于免疫筛选),于37℃振荡培养过夜。2.将过夜培养物以3000×g离心5min。3.分别用2ml λ-dil(10 mmol/L tris-Cl,

cDNA文库构建

cDNA文库[原理]:cDNA文库不同于基因组文库,被克隆DNA是从mRNA反转录来源的DNA。CDNA组成特点是其中不含有内含子和其他调控序列。从而做cDNA克隆时应是先从获得mRNA开始,在此基础上,通过反转录酶作用产生一条与mRNA相互补的DNA链,然后除掉mRNA,以第一条DNA链为模板复制

CDNA文库筛选

CDNA文库筛选(一)λgt11 cDNA文库铺平板宿主细菌制备1.用一个E.coli宿主菌株单菌落分别接种2×5ml LB培养基(Y1088用于噬菌斑杂交,Y1090用于免疫筛选),于37℃振荡培养过夜。2.将过夜培养物以3000×g离心5min。3.分别用2ml λ-dil(10 mmol/L

cDNA文库构建

cDNA文库构建             实验方法原理 cDNA 文库是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。

λ噬菌体的局限性λ噬菌体

实验方法原理 本实验以含原λ噬菌体和缺陷噬菌体λdg的双重溶原菌gal+作为供体,经紫外线诱导后,获取能转导半乳糖发酵基因的高频转导噬菌体裂解液,然后让这些转导噬菌体将gal+基因转移到受体菌gal-中去。实验材料 供体菌 : Escherichia coli K12 F2 gal + (带有原噬菌

关于噬菌体的培养和应用

可以用M13噬菌体展示系统来构建cDNA文库吗?A: 通常M13不适合cDNA表达,因为M13噬菌体展示需要前导序列(分泌所需)和外壳蛋白pIII或pVIII的N末端之间的框内表达。为了将相应的蛋白质适当地融合到外壳蛋白中,插入物必须在两端的正确阅读框中并且不包含框内终止密码子。这导致M13 c

cDNA-文库的构建2

阶段 3:cDNA 的甲基化材料缓冲液和溶液将贮存液稀释到合适浓度。氯仿10XEcoRⅠ 缓冲液1XEcoRⅠ 甲基化酶缓冲液(选用)如希望,可替代步骤 1 中的 Tris-HCl,NaCl 和 EDTA。EDTA(0.5mol/L,pH8.0)乙醇MgCl2(1mol/L)NaCl(5mol/L)