金标记流式细胞术方法介绍

金标记流式细胞术:胶体金可以明显改变红色激光的散射角,利用胶体金标记的羊抗鼠Ig抗体应用于流式细胞术,分析不同类型细胞的表面抗原,结果胶体金标记的细胞在波长632nm时,90度散射角可放大10倍以上,同时不影响细胞活性。而且与荧光素共同标记,彼此互不干扰。......阅读全文

金标记流式细胞术方法介绍

金标记流式细胞术:胶体金可以明显改变红色激光的散射角,利用胶体金标记的羊抗鼠Ig抗体应用于流式细胞术,分析不同类型细胞的表面抗原,结果胶体金标记的细胞在波长632nm时,90度散射角可放大10倍以上,同时不影响细胞活性。而且与荧光素共同标记,彼此互不干扰。

流式细胞术介绍

流式细胞术(flowcytometry,FCM)是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术,使被测溶液流经测量区域,并逐一检测其中每一个细胞的物理和化学特性,从而对高速流动的细胞或亚细胞进行快速定量测定和分析的方法。 首先,待测细胞经处理或染色后被压人流

流式细胞术的技术介绍

  一种在液流系统中,快速测定单个细胞或细胞器的生物学性质,并把特定的细胞或细胞器从群体中加以分类收集的技术。其特点是通过快速测定库尔特电阻、荧光、光散射和光吸收来定量测定细胞 DNA含量、细胞体积、蛋白质含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原等许多重要参数。根据这些参数将不同性质的细胞分开,以获得供生

关于流式细胞术的介绍

  流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,具有速度快、精度高、准确性好等优点,成为当代最先进的细胞定量分析技术。流式细胞术能够快速测定单个细胞或细胞器的生物学性质,并把特定的细胞或细胞器从群体中加以分类收集。流式细胞术

流式细胞术的应用介绍

流式细胞术在很多领域中都有应用,包括分子生物学、病理学、免疫学、植物学、和海洋生物学等[11]。在分子生物学中,它主要用于荧光标记的抗体。特异性的抗体与靶细胞上的抗原结合,能够通过流式细胞仪研究这些细胞的特别信息。这在医学中具有很广泛的应用,尤其是在器官移植、血液学、肿瘤免疫学和化疗、遗传学、精子分

简介流式细胞术的染色方法

  细胞表面染色:大多数免疫表型分析均采用此方法。但由于许多抗原也同时存在细胞内,所以在细胞表面抗原检测时应特别注意保持细胞膜的完整以保证检测的特异性。表面标记又分溶血前标记和溶血后标记。若红细胞对标记有影响或血浆成分对标记有影响的,适合溶血后标记,但要注意溶血剂膜抗原的影响,所以,溶血剂一般不含固

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

            实验方法原理 取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

            实验方法原理 取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实

流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验

实验方法原理取一定量的细胞悬液,先加入特异的第一抗体,待反应完全后洗去未结合抗体,在加入荧光标记的第二抗体,生成抗原-抗体复合物,以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。实验材料实验样品试剂、试剂盒抗体、PBS溶液仪器、耗材移液器移液吸头离心机实验步骤一、不同来源样品的处理1 . 培养细

流式细胞术

一. 流式细胞术概述流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是七十年代发展起来的高科学技术,它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体, 同时具有分析和分选细胞功能。它不仅可测量细胞大小、内部颗粒的性状,还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等,可对

流式细胞术常用样品的制备方法

实验概要流式细胞术的实验检测对象是单细胞悬液,因此,在组织化学和免疫组织化学实验中欲对待测样品细胞进行分类计数,也需把样品制备成细胞悬液,并要求被检细胞大小为0.2~80pm,每个样品中至少有20 000个细胞,细胞浓度为105~107个/ml。制备成的单细胞悬液经荧光或免疫荧光标记即可上机检测。本

流式细胞术检测样品推荐制备方法

A. 直接标记抗体(FITC标记抗体):(1) 收集1×106个细胞,800rpm离心5min,4℃以上冷PBS洗一次。(2) 用4%多聚甲醛1ml室温固定40分钟,800rpm离心5min去上清。加2ml PBS重悬洗涤细胞,800rpm离心5min。(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重悬

免疫金标记检测方法标准操作程序

【目的】保证免疫金标技术检验准确性【本SOP 适用范围】免疫金标技术【该SOP 变动程序】本标准操作程序的变动,可由任一使用本SOP 的工作人员提出,并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。【原理】氯化金分子在还原剂作用下聚合形成金颗粒,颗粒与颗粒之间因静电作用而相互排斥,使其保持一个比较稳定的胶

免疫金标记检测方法标准操作程序

  【目的】  保证免疫金标技术检验准确性  【本SOP适用范围】  免疫金标技术  【原理】  氯化金分子在还原剂作用下聚合形成金颗粒,颗粒与颗粒之间因静电作用而相互排斥,使其保持一个比较稳定的胶体状态,故称作胶体金。利用胶体金颗粒的高电子密度及其表面能结合生物大分子(如抗体、SPA、植物血凝素和

流式细胞术原理

流式细胞术公开课会形成鞘液流(鞘液是为了保证细胞在中间形成单个排列的细胞流,因为要保证激光覆盖整个样本中心流)在外周,样本流在中央的层流状态,使得样本仅在轴心激光照射到样本流上,激光60um宽,20um高(宽高有限,只有样本流刚好在中间才能保证激光能覆盖样本流细胞)样本流中的细胞表面的荧光抗体受到激

读懂流式细胞术

流式细胞术,顾名思义,是研究细胞的一种技术,但是它的研究对象绝对不仅仅局限于真核细胞,还可以研究细菌、病毒以及各种蛋白等等。无论你是基础科研工作者还是临床医生,你都用得上这项技术。自1974年BD公司和斯坦福大学联合研制出世界上第一台商用流式细胞仪以来,作为集N个学科的智慧于一身,将计算机技术、电子

流式细胞术简介

一、流式细胞术发展简史  流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是:①测量速度快,最快可在1秒种内计测数万个细胞;②可进行多参数测量,可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量,并具有明显的统计学意义;③是一

流式细胞术原理

流式细胞术是一种细胞分析技术。流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。流式细胞术是一种用于细胞计数、细胞分

流式细胞术原理

FSC通道FSC,即前向角散射,它的值代表细胞的 大小 。所以可以利用细胞的FSC值初步比较细胞的大小,利用FSC值对细胞进行分群和分类。SSC通道SSC,即侧向角散射,它的值代表 细胞的颗粒度 (granularity)。细胞越不规则,细胞表面的突起越多,细胞内能够引起激光散射的细胞器或者颗粒性物

流式细胞术原理

FSC通道FSC,即前向角散射,它的值代表细胞的 大小 。所以可以利用细胞的FSC值初步比较细胞的大小,利用FSC值对细胞进行分群和分类。SSC通道SSC,即侧向角散射,它的值代表 细胞的颗粒度 (granularity)。细胞越不规则,细胞表面的突起越多,细胞内能够引起激光散射的细胞器或者颗粒性物

流式细胞术简介

流式细胞术是一种细胞分析技术,它在20世纪50年代首次被用于测量细胞体积,可在细胞随快速流动的流体直线通过观察孔时进行检测。从那时起,许多工程师和研究人员不断创新,最终带来了现代流式细胞仪。在流式细胞仪中,溶液中的细胞以每秒10,000个细胞(或更多)的速度通过仪器的激光束,进而对细胞进行检测。如今

流式细胞术检测细胞的应用介绍

流式细胞术检测细胞的结果在以下众多研究领域都有广泛应用:免疫学:分析免疫细胞的表型,如 T 细胞、B 细胞、NK 细胞等表面标志物的表达,评估免疫细胞的活化状态和分化阶段。检测细胞因子的分泌,研究免疫细胞的功能。进行免疫细胞的分选,用于后续的功能研究或细胞治疗。肿瘤学:肿瘤细胞的鉴定和分型,检测肿瘤

流式细胞术实验去除红细胞的方法

  红细胞裂解法,操作简单、快、并最可能保持原始标本的白细胞分布。最好在染色后溶血。若在染色前溶血,需确认:(1)抗原性不被溶血过程改变;(2)溶血剂被彻底洗去,细胞和抗体结合的动力反应未受影响;(3)所用溶血剂不含固定剂,否则会影响细胞活性及表面标记结果。密度梯度离心法,靶细胞回收较好并可能得到富

流式细胞术样本采集后的保存方法

为保证流式细胞术检测结果的准确性,样本采集后的保存方法如下:外周血和骨髓样本:全血样本:如果不能立即检测,可在室温(18 - 25°C)保存,应在 24 小时内处理;如需长时间保存,可加入细胞保存液,在 4°C 可保存 72 小时。分离的单个核细胞:可加入含有 10% - 20% 血清和 10% D

胶体金标记技术(制备方法和应用)

胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。现已广泛应用于电镜、流式细

流式细胞术和流式细胞仪

1、流式细胞仪(Flow Cytometer):是集光电子物理,光电测量,计算机,细胞荧光化学,单抗技术为一体的高科技细胞分析仪。2、流式细胞术(Flow  Cytometry):利用流式细胞仪对处于快速流动的细胞或生物颗粒进行多参数、快速(每秒可达1000-10000个)的定量分析和分选(纯度可达

有关流式细胞术的数据分析介绍

  在数据分析中,百分率、荧光强度、DNA指数(DI)、多少个/ul是我们报告中常用的。百分率主要适用于检验指标集中在细胞有无的数量变化。如T细胞亚群检测、网织红细胞检测等;荧光强度主要适用于检验指标的变化集中在细胞上抗原量的多少。如血小板无力症(GT)的检测、慢性淋巴细胞白血病(CLL)CD20的

流式细胞术介绍及常见问题分析

流式细胞术广泛应用于细胞表面和细胞内分子表达特征的分析,界定不同种类的细胞群,测定分离出的亚类纯度,分析细胞的大小和总量,它可以同时分析单个细胞的多个参数。它主要用于检测标记在抗体上的荧光强度,这些荧光抗体则可以检测与特定细胞分子结合的蛋白或配体,如与 DNA 结合的溴化丙啶 (PI)等。染色步骤包

流式细胞术检验基础

流式细胞术是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术。流式细胞术(flowcytometry,FCM)是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术,使被测溶液流经测量区域,并逐一检测其中每一个细胞的物理和化学特性,从而对

流式细胞术的特点

  1.测量速度快;  2.可进行多参数测量;  3.是一门综合性的高科技方法( FCM综合了光学,电子学,流体力学,细胞化学,免疫学,激光和计算机等多门学科和技术);  4.既是细胞分析技术,又是精确的分选技术。