福尔根反应所需材料和试剂
材料洋葱根尖, 洋葱鳞茎表皮细胞试剂1)Carnoy固定液: 无水乙醇:冰醋酸 = 3:12)95% 乙醇3)70% 乙醇: 95% 乙醇 70mL 加水 25 mL4) 5% 三氯乙酸(TCA):固体TCA 5g,加水溶解到100 mL。5) 1N HCl (当量盐酸)6) Schiff 试剂:煮沸200mL 水,稍冷放入1g 碱性品红,充分搅拌有助溶解,50℃时过滤,置磨口棕色瓶内,向滤液中加1N HCl 20mL ,待25℃时加亚硫酸氢钠或亚硫酸钾 1g ,盖严放暗处,静止勿动,几天后,红色稍退,溶液呈无色或淡黄色,即可使用,如有红色,可加一勺活性炭,振荡过滤,黑布罩好。7) Unna 染色液(甲基绿-哌洛宁G)溶液A: 5% 哌洛宁G 水溶液 17.5 mL2% 甲基绿水溶液 10 mL蒸馏水 250 mL溶液 B:0.2mol/L 的pH为4.8的 醋酸盐缓冲液。配法:先将1.2mL 醋酸......阅读全文
福尔根反应所需材料和试剂
材料洋葱根尖, 洋葱鳞茎表皮细胞试剂1)Carnoy固定液: 无水乙醇:冰醋酸 = 3:12)95% 乙醇3)70% 乙醇: 95% 乙醇 70mL 加水 25 mL4) 5% 三氯乙酸(TCA):固体TCA 5g,加水溶解到100 mL。5) 1N HCl (当量盐酸)6) Schiff 试剂:煮
福尔根反应的反应过程
DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff(无色品红亚硫酸溶液)试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌
什么是福尔根反应?
DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯福尔根反应键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff(无色品红亚硫酸溶液)试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的
福尔根反应的方法介绍
专一显示DNA的一种染色法。标本经水解去掉RNA后,DNA的嘌呤—脱氧核糖糖苷键中的嘌呤被酸水解,暴露出了脱氧核糖的醛基,游离的醛基同Schiff‘s试剂反应,呈紫红色。
PCR(聚合酶链式反应)反应方法所需材料和试剂
【材料】 1. 试剂和溶液 (1)10 × PCR缓冲液 500 mM 氯化钾 100 mM Tris-Cl (室温时pH 8.3) 15 mM 氯化镁 (2)10 mM脱氧三磷酸核苷(dNTPs) 溶液-含有所有四种dNTPs(pH 8.0) (3)耐热的DNA 聚合酶: ①
细胞划痕实验的方法和所需试剂材料
材料:6孔板marker笔直尺20微升枪头(灭菌)无血清培养基PBS准备:所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)流程:1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。2、在空中加入约
食品中灰分的测定所需要试剂和材料
试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T6682规定的三级水。1试剂乙酸镁[(CH3COO)2Mg·4H2O]、浓盐酸(HCl)2试剂配制乙酸镁溶液(80g/L):称取8.0g乙酸镁加水溶解并定容至100mL,混匀;乙酸镁溶液(240g/L):称取24.0g乙酸镁加水溶解并定
常规的PCR反应体系所需试剂和仪器有哪些?
1.常规的PCR反应体系所需试剂 ①高压过的超纯水(高压的目的是使其中的 DNase失活,以免降解模板DNA); ②PCR缓冲液(选用与所用聚合酶对应的缓冲液) ;③4种dNTP混合物(每种dNTP的浓度为2.5mmol/L); ④引物(引物合成后,用超纯水稀释为10mmol/L); ⑤热稳定的DN
福根目镜的主要类型和特点
目镜可分正型目镜系和负型目镜系两类。正型目镜的主焦点在场透镜以外,虽然由二个或两个以上的透镜组合而成,但整个光学系统可视为单一的凸透镜,故在适当情况下可单独作为放大镜使用。负型目镜的主焦点是在场透镜以内,即在场透镜与目透镜两个透镜之间,显然不能单独作为放大镜使用。最简单类型的目镜的焦点在两透镜之间,
原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA
基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应,使细胞核DNA显紫红色
DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)
(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂) ↓ 蒸馏水冲洗3
原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA
原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA 基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红
DNA的细胞化学――孚尔根反应(一)
Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。 1.实 验 目 的
DNA的细胞化学――孚尔根反应(一)
Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。1.实 验 目 的1.1. 熟悉并掌握Feulge
DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)
(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂)↓蒸馏水冲洗3次(使水解停止)↓S
原子吸收法测定土壤和沉积物汞的测定所需试剂和材料
除非另有说明,分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂和蒸馏水。(1)高纯氧气(O2):纯度要求99.999%以上在气源与测汞仪器之间安装一个网孔过滤器,以防止汞蒸气污染。(2)重铬酸钾(K2Cr2O7):优级纯。(3)硝酸(HNO3):ρ=1.42g/ml。(4)氯化汞(HgCl2):分析纯,在硅胶(
食品中水溶性灰分和水不溶性灰分的测定所需试剂和材料
试剂和材料除非另有说明,本方法所用水为GB/T6682规定的三级水。
逆转录聚合酶链反应所需试剂
1.RMA提取试剂2.第一链cDNA合成试剂盒3.dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM4.Taq DNA聚合酶
总有机碳分析所需试剂和设备
分析所需试剂和设备1.总碳标准溶液称取已经在110℃干燥2h的邻苯二甲酸氢钾(2.215±0.002)g,溶于实验室纯水中,移入1000mL容量瓶中,用水稀释至标线,此溶液每1mL中含有1mg总碳。2.无机碳标准溶液称取无水碳酸钠(4.412±0.004)g和无水碳酸氢钠(3.497±0.003)g
细胞转染实验所需材料和器材
(1)材料293T细胞、MyoD表达质粒和EGFP表达质粒、DMEM培养基、链霉素/青霉素(双抗)、FCS(小牛血清)、PBS(磷酸盐缓冲溶液)、胰酶/EDTA消化液、转染试剂(TransFast)(2)器材20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip头酒精灯、废液缸、血球计数板、涡旋振荡器、恒温
氧化还原电位测定所需的仪器和试剂
仪器①毫伏计或通用pH计;②铂电极;③饱和甘汞电极或银-氯化银电极;④温度计;⑤1000 ml棕色广口瓶。试剂①纯水:本方法所用去离子水电导率要求小于2 μS/cm。在配制标准溶液前,应将去离子水煮沸数分钟,以驱除水中的二氧化碳,密塞冷却;②硫酸亚铁铵-硫酸高铁铵标准溶液;③硝酸溶液:(1+1);④
硫酸铵纯化法所需仪器和试剂
1.组织培养上清液、血清样品或腹水等 2. 硫酸铵( NH 4 ) SO 4 3. 饱和硫酸铵溶液( SAS ) 4. 蒸馏水 5. PBS( 含 0.2g /L 叠氮钠 ) 6. 透析袋 7. 超速离心机 8. pH 计 9. 磁力搅拌器
直接法测抗原的所需仪器和试剂
磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份配制搪瓷桶三只(内有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)有盖搪瓷盒一只(内铺一层浸湿的
中性粒细胞吞噬功能的测定所需试剂及材料
1. 丝裂霉素C(Sigma):用培养液或PBS配制300μg/ml。2. 含20%的新生牛血清的RPMI 16403. EB病毒转化的B淋巴母细胞株
福尔可定
检查吗啡取本品0.10g,加盐酸溶液(9→1000)5ml溶解后,再加亚硝酸钠试液2ml,摇匀,放置15分钟,加氨试液3ml,摇匀,如显色,与吗啡溶液[取无水吗啡2mg,加盐酸溶液(9→1000)使溶解成100m]5m1用同法制成的对照液比较,不得更深(0.1%)。有关物质照薄层色谱法(通则0502
福尔可定的类别和制剂类型
类别镇咳药贮藏遮光,密封保存。制剂福尔可定片
细胞伤口愈合实验所需材料和仪器
1.人MDA-MB-231cell(ATCC#HTB-26)2.DMEM培养基(Invitrogen#10313-021)3.胎牛血清(ATCC#30-2020)4.PBS(Invitrogen#14190-144)5.BD24孔细胞培养板(Fisher#08-772-1H;BD#353226)6.
火箭免疫电泳所需使用仪器和材料
(一)材料和试剂1、PH8.6,0.1M巴比妥--巴比妥钠缓冲液巴比妥钠 10.3 g巴比妥 1.84 g硫柳汞 100 mg(防腐剂)蒸馏水加热溶解并定容至500ml2、1%预复琼脂(或琼脂糖)1g琼脂(或琼脂糖)加蒸馏水100ml溶化即可。3、1.5%琼脂糖凝胶1.5g琼脂糖加50ml蒸馏水置水
鞣酸化红细胞试验所需仪器和材料
1.红血球2.反应板分聚苯乙烯塑料板和有机玻璃板(聚甲基丙烯酸甲酯),每板又有96孔和72孔两种规格。按孔型又可分为V和U型两种,V型具有更典型的凝集模型,U型有时比V型的血清效价高1~2孔。反应板不能煮沸消毒和浸泡于来苏儿水中。消毒可用0.5%甲醛溶液,1%新洁尔灭及紫外线照射等。3.稀释棒由合金
悬浮细胞的传代的所需材料和流程
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮,因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞的损伤也较小。悬浮生长细胞的传代培养要比贴壁细胞简单得多,通常有两种方法。 1.直接给带传代的培养瓶中补充一定量的新鲜培养基,然后将进行分装。 2.先通