原代细胞富尔根（Feulgen）反应显示DNA
基本原理：显示DNA的传统方法是富尔根（Feulgen）反应，切片先用稀盐酸处理，DNA经弱酸（1mol/L HCL）水解后，在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开，脱氧核糖的一端释放出醛基，并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应，使细胞核DNA显紫红色。在此过程中RNA不受影响，故染色具有DNA特异性。准确的温度和盐酸浓度，适宜的水解时间是成功的关键。水解过度或不足均降低染色强度。配制试剂：1. 1mol/L HCL:将8.5ml浓盐酸和91.5ml蒸馏水混合即得；2. 0.5%亮绿水溶液；染色步骤：1. 取培养于盖玻片上的贴壁原代细胞，用Hanks液漂洗三次；2. 在卡诺（Carnoy）固定液中固定10min，然后蒸馏水洗三次；3. 移入60℃浓度为1mol/L的HCL中静置10min；4. 用蒸馏水漂洗几次；5. 放入Schiff试剂中静置30—60min，可随时检查显色情况；......阅读全文
原代细胞富尔根（Feulgen）反应显示DNA
基本原理：显示DNA的传统方法是富尔根（Feulgen）反应，切片先用稀盐酸处理，DNA经弱酸（1mol/L HCL）水解后，在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开，脱氧核糖的一端释放出醛基，并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应，使细胞核DNA显紫红色
原代细胞富尔根（Feulgen）反应显示DNA
原代细胞富尔根（Feulgen）反应显示DNA 基本原理：显示DNA的传统方法是富尔根（Feulgen）反应，切片先用稀盐酸处理，DNA经弱酸（1mol/L HCL）水解后，在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开，脱氧核糖的一端释放出醛基，并在原位与Schiff试剂反应生成紫红
DNA的细胞化学反应——Feulgen反应
实验概要 1、了解Feulgen反应的基本原理。 2、熟悉传统细胞化学实验的基本实验技能和操作方法。实验原理 Feulgen反应是1924年由Feulgen和Rossenbeck开创的。这一反应的原理是：DNA经酸（1mol/LHCL）水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游
DNA的细胞化学――孚尔根反应（一）
Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应，为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明，简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性，故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。 1．实 验 目 的
DNA的细胞化学――孚尔根反应（一）
Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应，为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明，简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性，故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。1．实 验 目 的1．1. 熟悉并掌握Feulge
DNA的细胞化学――孚尔根反应（二）
（注意: 这个步骤非常重要，必须用1 mol/L稀盐酸冲洗，因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗，则试剂本身也可以水解，所释放出的碱性品红，可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚，可延长其水解时间，而且每次均需更换洗涤剂） ↓ 蒸馏水冲洗3
DNA的细胞化学――孚尔根反应（二）
（注意: 这个步骤非常重要，必须用1 mol/L稀盐酸冲洗，因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗，则试剂本身也可以水解，所释放出的碱性品红，可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚，可延长其水解时间，而且每次均需更换洗涤剂）↓蒸馏水冲洗3次（使水解停止）↓S
原代细胞甲基绿哌咯宁法显示DNA和RNA
基本原理：甲基绿（methyl green）和哌咯宁（pyronin）均为碱性染料，因此可与带负电荷的磷酸根形成盐。甲基绿分子有2个正电荷，易与双链DNA分子结合使原代细胞核内的DNA呈蓝绿色。哌咯宁分子有一个正电荷，易与单链RNA分子结合使原代细胞质和核仁内的RNA显示红色。也有人认为染色原理
原代细胞甲基绿哌咯宁法显示DNA和RNA
基本原理：甲基绿（methyl green）和哌咯宁（pyronin）均为碱性染料，因此可与带负电荷的磷酸根形成盐。甲基绿分子有2个正电荷，易与双链DNA分子结合使原代细胞核内的DNA呈蓝绿色。哌咯宁分子有一个正电荷，易与单链RNA分子结合使原代细胞质和核仁内的RNA显示红色。也有人认为染色原理
福尔根反应的反应过程
DNA经弱酸（1mol/L HCl）水解后，嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开，并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff（无色品红亚硫酸溶液）试剂结合，形成紫红色化合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌
富尔根氏核染色液的配制方法
富尔根氏核染色液 1．席夫氏(Schiff)试剂 将1g碱性复红加入200ml煮沸的蒸馏水中，振荡5分钟，冷至50℃左右过滤，再加入1mol/LHC120ml，摇匀。待冷至25℃时，加Na2S2O5(偏重亚硫酸钠)3g，摇匀后装在棕色瓶中，用黑纸包好，放置暗处过夜，此时试剂应为淡黄色(如为粉红色
什么是福尔根反应？
DNA经弱酸（1mol/L HCl）水解后，嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开，并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯福尔根反应键断开，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff（无色品红亚硫酸溶液）试剂结合，形成紫红色化合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理实验目的： 学习DNA的Feulgen染色方法，观察染色结果，了解反应原理。实验原理： DNA经弱酸(1mol／L HCl)水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应，形成紫红色的化合物，
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理 实验目的： 学习DNA的Feulgen染色方法，观察染色结果，了解反应原理。 实验原理： DNA经弱酸(1mol／L HCl)水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚
DNA的Feulgen染色法
1.目的与原理实验目的：学习DNA的Feulgen染色方法，观察染色结果，了解反应原理。实验原理：DNA经弱酸(1mol／L HCl)水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液)反应，形成紫红色的化合物，使细胞内含有
微生物拟核体内体外染色观察实验_富尔根氏染色法
实验方法原理富尔根氏（Feulgen）染色法是根据席夫氏（Schiff）试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸，碱性复红与亚硫酸结合后，失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后，使醌式结构恢复，合成一种带紫红色的碱性复红衍生物。此
微生物拟核体内体外染色观察实验
实验方法原理 富尔根氏（Feulgen）染色法是根据席夫氏（Schiff）试剂进行的反应而建立的微生物拟核染色法。席夫氏试剂含有碱性复红和亚硫酸，碱性复红与亚硫酸结合后，失去醌式结构而变为无色。当 DNA 经酸作用而生成的醛化合物与席夫氏试剂结合后，使醌式结构恢复，合成一种带紫红色的碱性复红衍生
福尔根反应的方法介绍
专一显示DNA的一种染色法。标本经水解去掉RNA后，DNA的嘌呤—脱氧核糖糖苷键中的嘌呤被酸水解，暴露出了脱氧核糖的醛基，游离的醛基同Schiff‘s试剂反应，呈紫红色。
福尔根反应所需材料和试剂
材料洋葱根尖， 洋葱鳞茎表皮细胞试剂1）Carnoy固定液： 无水乙醇：冰醋酸 = 3：12）95% 乙醇3）70% 乙醇： 95% 乙醇 70mL 加水 25 mL4) 5% 三氯乙酸(TCA)：固体TCA 5g，加水溶解到100 mL。5) 1N HCl (当量盐酸)6) Schiff 试剂：煮
有丝分裂（Feulgen染色）制片技术
实验概要 1、通过本实验的学习，初步掌握植物染色体制片，奠定细胞遗传学研究的基本技术； 2、通过对植物根尖细胞的观察，掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化； 3、掌握Feulgen染色方法。 实验原理 有丝分裂（mitosis）是植物
有丝分裂（Feulgen染色）制片技术
实验概要1、通过本实验的学习，初步掌握植物染色体制片，奠定细胞遗传学研究的基本技术； 2、通过对植物根尖细胞的观察，掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化； 3、掌握Feulgen染色方法。实验原理有丝分裂（mitosis）是植物细胞分裂的主要方式，细胞分裂过程中，核内染色体准确地复制，并有规
什么是“组织化学”
组织化学是指以常用的组织化学技术,对细胞内主要化学成分和活性的粗略(一般性)的研究.概要介绍如下:一,______ 核酸(DNA和RNA)(一)__ 化学特性1.分布: DNA (细胞核内)RNA(核仁10% ;细胞质-核糖体90%)2. 分子结构:戊糖 + 磷酸 + 碱基特点:① 大量的磷酸基团→
DNA显示和细胞有丝分裂相的观察
核酸是生物最重要的组成成分,核酸分为两大类,即脱氧河塘核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。它们在细胞内的分布及化学性质均有所不同。DNA主要分布在核的染色质或有丝分裂过程中出现的染色体内。RNA分布在细胞质和核仁内。但在染色质及染色体中也含有少量的RNA，核仁中也有少量的DNA。在线粒体，叶绿体等细
培养细胞的染色实验——Feulgen染色法
实验方法原理此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸，使嘌呤碱基与糖苷犍破坏，嘌呤碱脱掉，脱氧核糖的中的醛基游离；醛基能与Schiff试剂相结合，形成一种紫色的复合物。本方法中酸的离解根重要，若温度过低
铵根与氢氧根离子反应
铵根离子和氢氧根离子反应方程式：NH42++QH-=H2O+NH3。离子方程式，即用实际参加反应的离子符号表示离子反应的式子。是指可溶性物质可拆的反应。多种离子能否大量共存于同一溶液中，归纳起来就是：一色，二性，三特殊，四反应。铵根离子和氢氧根离子反应方程式铵根离子(Ammonium；化学式；NH4
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一种常用荧光染料，吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力，但有一定的特异性，即结合后发不同颜色的荧光，DNA呈亮绿色，而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷，既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
原代细胞DNA与RNA的吖啶橙荧光染色法
基本原理：吖啶橙（acridine orange，AO）是一种常用荧光染料，吖啶橙与原代细胞内的DNA、RNA都有亲和力，但有一定的特异性，即结合后发不同颜色的荧光，DNA呈亮绿色，而RNA呈橘红色至火红色。此法简便快捷，既可染活原代细胞又可染固定原代细胞。用于直接染色观察活原代细胞或固定染色观
细胞原代培养
一、原理将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。二、仪器、材料及试剂仪器：培养箱（调整至37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术
原代细胞分离技术
实验概要本文介绍了原代细胞分离技术，包括悬浮细胞的分离方法和实体组织材料的分离方法。实体组织材料的分离方法有机械分散和消化分离两种。实验步骤1. 悬浮细胞的分离方法 1) 将血液、羊水、胸水或腹水等悬液直接转至离心管中，1000rpm/分钟离心5分钟。 2) 去掉上清，离心沉淀用无钙、镁的P
原代细胞传代技术
一、贴壁细胞的消化法传代1、吸除或倒掉瓶内旧培养液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或与EDTA混合液）轻轻摇动培养瓶，使瓶底细胞都浸入溶液中。3、消化2-5分钟后把培养瓶放置在显微镜下进行观察，发现原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时，弃去消化液，加入培养液终止消化。4、用吸管将贴壁的细胞吹打