DNA的细胞化学――孚尔根反应(一)

Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。1.实 验 目 的1.1. 熟悉并掌握Feulgen反应的原理及其实验操作方法1.2. 对细胞的免疫组化研究方法有一初步的认识2.实 验 原 理自Feulgen等发明该显示DNA的Feulgen反应法以来,其作用机制也久经研究和讨论,现已取得一致意见。其具体反应原理是,标本经稀盐酸水解后,DNA分子中的嘌呤碱基被解离,从而在核糖的一端出现了醛基。Schiff试剂中的无色品红可与醛基反应,形成含有醌基的化合物分子, 因醌基为发色团,故可呈现出紫红色。也就是说, DNA经稀酸水解后产生的醛基,具有还原作用,可与无色品红结合形成紫红色化合物,从而显示出DNA的分布。其反应机制如下图......阅读全文

DNA的细胞化学――孚尔根反应(一)

Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。 1.实 验 目 的

DNA的细胞化学――孚尔根反应(一)

Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。1.实 验 目 的1.1. 熟悉并掌握Feulge

DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)

(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂) ↓ 蒸馏水冲洗3

DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)

(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂)↓蒸馏水冲洗3次(使水解停止)↓S

原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA

基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应,使细胞核DNA显紫红色

原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA

原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA 基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红

孚尔灵的不良反应

  常见的不良反应为骨髓抑制,用药后约40%的患者中性粒细胞数减低至1000/mm3以下,约20%的患者血小板计数减低至50000/ mm3以下,此外可有贫血。  中枢神经系统症状如精神异常、紧张、震颤等,发生率约5%,偶有昏迷、抽搐等。  可出现皮疹、瘙痒、药物热、头痛、头昏、呼吸困难、恶心、呕吐

福尔根反应的反应过程

DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff(无色品红亚硫酸溶液)试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌

DNA的细胞化学反应——Feulgen反应

实验概要 1、了解Feulgen反应的基本原理。 2、熟悉传统细胞化学实验的基本实验技能和操作方法。实验原理 Feulgen反应是1924年由Feulgen和Rossenbeck开创的。这一反应的原理是:DNA经酸(1mol/LHCL)水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游

孚尔灵的用法用量及不良反应

  用法用量  1、诱导期:静脉滴注 按体重一次5mg/kg,每12小时1次,每次静滴1小时以上,疗程14~21日,肾功能减退者剂量应酌减。肌酐清除率为50~69ml/分钟时,每12小时静脉滴注2.5mg/kg;肌酐清除率为25~49ml/分钟时,每24小时静脉滴注2.5mg/kg;肌酐清除率为10

什么是福尔根反应?

DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯福尔根反应键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff(无色品红亚硫酸溶液)试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的

福尔根反应的方法介绍

专一显示DNA的一种染色法。标本经水解去掉RNA后,DNA的嘌呤—脱氧核糖糖苷键中的嘌呤被酸水解,暴露出了脱氧核糖的醛基,游离的醛基同Schiff‘s试剂反应,呈紫红色。

孚尔灵的介绍

  孚尔灵,是一种药品,通用名更昔洛韦注射液,本品为无色或几乎无色的澄明液体。

孚尔灵的不良反应及注意事项

  不良反应  常见的不良反应为骨髓抑制,用药后约40%的患者中性粒细胞数减低至1000/mm3以下,约20%的患者血小板计数减低至50000/ mm3以下,此外可有贫血。  中枢神经系统症状如精神异常、紧张、震颤等,发生率约5%,偶有昏迷、抽搐等。  可出现皮疹、瘙痒、药物热、头痛、头昏、呼吸困难

孚尔灵的用法用量

  1、诱导期:静脉滴注 按体重一次5mg/kg,每12小时1次,每次静滴1小时以上,疗程14~21日,肾功能减退者剂量应酌减。肌酐清除率为50~69ml/分钟时,每12小时静脉滴注2.5mg/kg;肌酐清除率为25~49ml/分钟时,每24小时静脉滴注2.5mg/kg;肌酐清除率为10~24ml/

福尔根反应所需材料和试剂

材料洋葱根尖, 洋葱鳞茎表皮细胞试剂1)Carnoy固定液: 无水乙醇:冰醋酸 = 3:12)95% 乙醇3)70% 乙醇: 95% 乙醇 70mL 加水 25 mL4) 5% 三氯乙酸(TCA):固体TCA 5g,加水溶解到100 mL。5) 1N HCl (当量盐酸)6) Schiff 试剂:煮

孚尔灵的适应症

  1、适用于免疫缺陷患者(包括艾滋病患者)并发巨细胞病毒视网膜炎的诱导期和维持期治疗。  2、亦可用于接受器官移植的患者预防巨细胞病毒感染及用于巨细胞病毒血清试验阳性的艾滋病患者预防发生巨细胞病毒疾病。

孚尔灵的注意事项

  用药期间应经常检查血细胞数,初始治疗期间应每二天测定血细胞计数,以后为每周测定一次。对有血细胞减少病史的患者(包括因药物、化学品或射线所致者)或粒细胞计数低于1000/mm3患者,应每天进行血细胞计数。如中性粒细胞计数在500/mm3以下、或血小板计数低于25000/mm3时应暂时停药,直至中性

孚尔灵的性状及适应症

  性状  本品为无色或几乎无色的澄明液体。  适应症  1、适用于免疫缺陷患者(包括艾滋病患者)并发巨细胞病毒视网膜炎的诱导期和维持期治疗。  2、亦可用于接受器官移植的患者预防巨细胞病毒感染及用于巨细胞病毒血清试验阳性的艾滋病患者预防发生巨细胞病毒疾病。

有丝分裂(Feulgen染色)制片技术

实验概要1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。实验原理有丝分裂(mitosis)是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规

有丝分裂(Feulgen染色)制片技术

实验概要 1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。 实验原理 有丝分裂(mitosis)是植物

孚尔灵的适应症及用法用量

  适应症  1、适用于免疫缺陷患者(包括艾滋病患者)并发巨细胞病毒视网膜炎的诱导期和维持期治疗。  2、亦可用于接受器官移植的患者预防巨细胞病毒感染及用于巨细胞病毒血清试验阳性的艾滋病患者预防发生巨细胞病毒疾病。  用法用量  1、诱导期:静脉滴注 按体重一次5mg/kg,每12小时1次,每次静滴

多线染色体的形态结构

并行排列的染色质纤维多线染色体是DNA多次复制后所产生的子染色体整齐排列,紧密结合在一起而形成的。它所在的细胞在此过程中处于永久间期阶段,不分裂,因而随着复制的不断进行,核体积不断增加,多线化细胞的体积也相应增大。同种动物的不同组织以及不同动物的相同组织的多线化程度各不相同。例如摇蚊马尔皮基氏管细胞

细胞化学词汇DNA微不均一性

中文名称:DNA微不均一性英文名称:DNA microheterogeneity定  义:对DNA状态的一种描述。精细的分析表明,表面上看来均一的DNA,其在大小、序列、荷电性、聚集状态和其他特征上有细小的差异。这种差异是由于遗传上的差别或某种人为的因素所造成。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学

细胞化学基础线粒体DNA

线粒体DNA是线粒体中的遗传物质,线粒体能为细胞产生能量(ATP),是在细胞线粒体内发现的脱氧核糖核酸特殊形态。线粒体是为细胞提供能量(ATP)的细胞器。一个线粒体中一般有多个DNA分子。它们携带着自己的DNA——mtDNA,而这些基因的突变能引起线粒体疾病。虽然疾病症状是多变的,但大脑、肌肉和心脏

细胞化学基础互补-DNA

中文名称:互补 DNA英文名称:complementary DNA;cDNA定  义:利用反转录酶以mRNA为模板合成的DNA。应用学科:细胞生物学(一级学科),细胞化学(二级学科)

细胞化学基础卫星DNA

卫星DNA(satelliteDNA)是一类高度重复序列DNA。在介质氯化铯中作密度梯度离心(离心速度可以高达每分钟几万转)时,DNA分子将按其大小分布在离心管内不同密度的氯化铯介质中,小的分子处于上层,大的分子处于下层。从离心管外看,不同层面的DNA形成了不同的条带。根据荧光强度的分析,可以看到在

细胞化学词汇DNA突变

突变是由于DNA复制(特别是减数分裂)出错或DNA损伤(如暴露于辐射或致癌物引起)后错误的修复造成的。

细胞化学词汇变性DNA

中文名称:变性DNA英文名称:denatured DNA定  义:由于物理(如过热)或化学(如加入尿素)等因素的影响,使之失去生物活性的DNA分子。不再具有致密的、双链的螺旋结构,而成为松散的和单链的结构。去除变性因素,DNA一般可以复性。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级

细胞化学词汇弯形DNA

中文名称:弯形DNA英文名称:curved DNA定  义:由于某些内在的或诱导的原因造成DNA分子局部变形,形成突环状而使在序列上相距较远部分在空间上彼此紧邻。通常发生在启动子区域,可以极大地增强DNA与蛋白质之间的相互作用,有利于增强转录起始复合体的亲和性,在许多基因的转录起始中发挥作用。应用学