DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)
(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂)↓蒸馏水冲洗3次(使水解停止)↓Schiff 试剂中染色40min↓用亚硫酸水洗3~5次(以洗去多余的非特异性色素及扩散的染料)↓流水冲洗5 min↓蒸馏水洗片刻↓1%亮绿复染数秒钟(注意: 复染时间切忌过长,以免染色过深,影响对DNA的观察)↓水洗脱水封片5.实 验 结 果细胞核中的DNA呈鲜亮的紫红色反应,它不但反应出DNA存在的部位及其分布情况,而且还可从颜色反应的深浅,来判断DNA的相对含量。细胞质被亮绿复染成绿色,核仁通常为负反应;但在有些材料的细胞质中,DNA也会出现阳性反应。6.实验报告(1). 绘图表示Feulgen反应的染色结果, 并验交Feulge......阅读全文
DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)
(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂) ↓ 蒸馏水冲洗3
DNA的细胞化学――孚尔根反应(一)
Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。 1.实 验 目 的
DNA的细胞化学――孚尔根反应(一)
Feulgen反应(Feulgen reaction)是显示DNA的最典型的组织化学反应,为学者Feulgen和Rossenbeck于1924年发明,简称为Feulgen法。因对 DNA的显示反应具有高度专一性,故常被用来显示细胞内DNA的分布情况。1.实 验 目 的1.1. 熟悉并掌握Feulge
DNA的细胞化学――孚尔根反应(二)
(注意: 这个步骤非常重要,必须用1 mol/L稀盐酸冲洗,因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗,则试剂本身也可以水解,所释放出的碱性品红,可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚,可延长其水解时间,而且每次均需更换洗涤剂)↓蒸馏水冲洗3次(使水解停止)↓S
孚尔灵的不良反应
常见的不良反应为骨髓抑制,用药后约40%的患者中性粒细胞数减低至1000/mm3以下,约20%的患者血小板计数减低至50000/ mm3以下,此外可有贫血。 中枢神经系统症状如精神异常、紧张、震颤等,发生率约5%,偶有昏迷、抽搐等。 可出现皮疹、瘙痒、药物热、头痛、头昏、呼吸困难、恶心、呕吐
福尔根反应的反应过程
DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff(无色品红亚硫酸溶液)试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌
什么是福尔根反应?
DNA经弱酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯福尔根反应键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff(无色品红亚硫酸溶液)试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的
孚尔灵的用法用量及不良反应
用法用量 1、诱导期:静脉滴注 按体重一次5mg/kg,每12小时1次,每次静滴1小时以上,疗程14~21日,肾功能减退者剂量应酌减。肌酐清除率为50~69ml/分钟时,每12小时静脉滴注2.5mg/kg;肌酐清除率为25~49ml/分钟时,每24小时静脉滴注2.5mg/kg;肌酐清除率为10
福尔根反应的方法介绍
专一显示DNA的一种染色法。标本经水解去掉RNA后,DNA的嘌呤—脱氧核糖糖苷键中的嘌呤被酸水解,暴露出了脱氧核糖的醛基,游离的醛基同Schiff‘s试剂反应,呈紫红色。
孚尔灵的介绍
孚尔灵,是一种药品,通用名更昔洛韦注射液,本品为无色或几乎无色的澄明液体。
孚尔灵的不良反应及注意事项
不良反应 常见的不良反应为骨髓抑制,用药后约40%的患者中性粒细胞数减低至1000/mm3以下,约20%的患者血小板计数减低至50000/ mm3以下,此外可有贫血。 中枢神经系统症状如精神异常、紧张、震颤等,发生率约5%,偶有昏迷、抽搐等。 可出现皮疹、瘙痒、药物热、头痛、头昏、呼吸困难
福尔根反应所需材料和试剂
材料洋葱根尖, 洋葱鳞茎表皮细胞试剂1)Carnoy固定液: 无水乙醇:冰醋酸 = 3:12)95% 乙醇3)70% 乙醇: 95% 乙醇 70mL 加水 25 mL4) 5% 三氯乙酸(TCA):固体TCA 5g,加水溶解到100 mL。5) 1N HCl (当量盐酸)6) Schiff 试剂:煮
孚尔灵的用法用量
1、诱导期:静脉滴注 按体重一次5mg/kg,每12小时1次,每次静滴1小时以上,疗程14~21日,肾功能减退者剂量应酌减。肌酐清除率为50~69ml/分钟时,每12小时静脉滴注2.5mg/kg;肌酐清除率为25~49ml/分钟时,每24小时静脉滴注2.5mg/kg;肌酐清除率为10~24ml/
原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA
基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红色产物。原理同PAS反应,使细胞核DNA显紫红色
原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA
原代细胞富尔根(Feulgen)反应显示DNA 基本原理:显示DNA的传统方法是富尔根(Feulgen)反应,切片先用稀盐酸处理,DNA经弱酸(1mol/L HCL)水解后,在60℃条件下使DNA分子中脱氧核糖与嘌呤之间的连接打开,脱氧核糖的一端释放出醛基,并在原位与Schiff试剂反应生成紫红
孚尔灵的适应症
1、适用于免疫缺陷患者(包括艾滋病患者)并发巨细胞病毒视网膜炎的诱导期和维持期治疗。 2、亦可用于接受器官移植的患者预防巨细胞病毒感染及用于巨细胞病毒血清试验阳性的艾滋病患者预防发生巨细胞病毒疾病。
孚尔灵的注意事项
用药期间应经常检查血细胞数,初始治疗期间应每二天测定血细胞计数,以后为每周测定一次。对有血细胞减少病史的患者(包括因药物、化学品或射线所致者)或粒细胞计数低于1000/mm3患者,应每天进行血细胞计数。如中性粒细胞计数在500/mm3以下、或血小板计数低于25000/mm3时应暂时停药,直至中性
孚尔灵的性状及适应症
性状 本品为无色或几乎无色的澄明液体。 适应症 1、适用于免疫缺陷患者(包括艾滋病患者)并发巨细胞病毒视网膜炎的诱导期和维持期治疗。 2、亦可用于接受器官移植的患者预防巨细胞病毒感染及用于巨细胞病毒血清试验阳性的艾滋病患者预防发生巨细胞病毒疾病。
孚尔灵的适应症及用法用量
适应症 1、适用于免疫缺陷患者(包括艾滋病患者)并发巨细胞病毒视网膜炎的诱导期和维持期治疗。 2、亦可用于接受器官移植的患者预防巨细胞病毒感染及用于巨细胞病毒血清试验阳性的艾滋病患者预防发生巨细胞病毒疾病。 用法用量 1、诱导期:静脉滴注 按体重一次5mg/kg,每12小时1次,每次静滴
铵根与氢氧根离子反应
铵根离子和氢氧根离子反应方程式:NH42++QH-=H2O+NH3。离子方程式,即用实际参加反应的离子符号表示离子反应的式子。是指可溶性物质可拆的反应。多种离子能否大量共存于同一溶液中,归纳起来就是:一色,二性,三特殊,四反应。铵根离子和氢氧根离子反应方程式铵根离子(Ammonium;化学式;NH4
狄尔斯–阿尔德反应的反应机理
狄尔斯–阿尔德反应是典型的[4+2] 型的环加成反应,其反应机理一般认为,在反应时两反应物彼此靠近,相互作用, 形成一个环状过滤态。然后逐渐转化为产物分子,即旧键的断裂与新键的形成是相互协调地在同一步骤中完成的—协同反应,无中间体生成。反应图如下所示:证明,1,3-丁二烯和乙烯的反应是一个简单而典型
富尔根氏核染色液的配制方法
富尔根氏核染色液 1.席夫氏(Schiff)试剂 将1g碱性复红加入200ml煮沸的蒸馏水中,振荡5分钟,冷至50℃左右过滤,再加入1mol/LHC120ml,摇匀。待冷至25℃时,加Na2S2O5(偏重亚硫酸钠)3g,摇匀后装在棕色瓶中,用黑纸包好,放置暗处过夜,此时试剂应为淡黄色(如为粉红色
多线染色体的带和间带的介绍
沿着多线染色体的长轴有一系列深色的带和透亮的间带交替排列。带上的 DNA纤维高度卷曲,DNA 含量高,故能用碱性染料着色,呈孚尔根阳性反应,260纳米紫外光吸收强;间带的DNA含量低,不能用碱性染料着色,呈孚尔根阴性反应,260纳米紫外光吸收弱。 各种多线染色体上带的数目、形态、大小及其分布位
海力孚全自动生化分析仪的反应系统
反应系统是全自动生化分析仪的一个非常重要的组成部分,反应系统包括反应盘、混合装置、温控装置等,这些部分都有什么作用,它们的优差又会对检测造成什么影响呢?pzbvihb (1)反应盘。反应盘装载一系列反应比色杯,多为转盘形式。反应测定过程中按固定程序,在加样臂、加液臂、搅拌棒、光路
狄尔斯阿尔得反应的定义
在加热条件下,共轭二烯烃与含碳碳双键或碳碳三键的化合物进行1,4-环加成反应,生成六元环烯烃,反应也经过一个环状过渡态。成环反应需要的温度比开环反应的温度低些。这个反应称做双烯合成反应,是由德国化学家狄尔斯和阿尔得发现的,又称狄尔斯-阿尔得反应。1928年德国化学家奥托·迪尔斯和他的学生库尔特·阿尔
狄尔斯–阿尔德反应的应用介绍
由于该反应一次生成两个碳碳键和最多四个相邻的手性中心,所以在合成中很受重视。如果一个合成设计上使用了狄尔斯–阿尔德反应,则可以大大减少反应步骤,提高了合成的效率。狄尔斯-阿尔得反应在有机合成中有重要用途,是合成六元环状化合物的重要方法。把反应中的碳原子换成杂原子,也能进行类似的反应,得到含杂原子的六
多线染色体的形态结构
并行排列的染色质纤维多线染色体是DNA多次复制后所产生的子染色体整齐排列,紧密结合在一起而形成的。它所在的细胞在此过程中处于永久间期阶段,不分裂,因而随着复制的不断进行,核体积不断增加,多线化细胞的体积也相应增大。同种动物的不同组织以及不同动物的相同组织的多线化程度各不相同。例如摇蚊马尔皮基氏管细胞
狄尔斯–阿尔德反应的基本内容
狄尔斯–阿尔德反应是一种有机反应,共轭双烯与取代烯烃(一般称为亲双烯体)反应生成取代环己烯。该反应用很少能量就可以合成六元环,是有机化学合成反应中非常重要的碳碳键形成的手段之一,也是现代有机合成里常用的反应之一。反应有丰富的立体化学呈现,兼有立体选择性、立体专一性和区域选择性等。该反应是可逆反应,正
有丝分裂(Feulgen染色)制片技术
实验概要 1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。 实验原理 有丝分裂(mitosis)是植物
有丝分裂(Feulgen染色)制片技术
实验概要1、通过本实验的学习,初步掌握植物染色体制片,奠定细胞遗传学研究的基本技术; 2、通过对植物根尖细胞的观察,掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化; 3、掌握Feulgen染色方法。实验原理有丝分裂(mitosis)是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规