抗体捕捉ELISA法的操作程序

本法主要用于检测IgM抗体。由于IgM抗体出现于感染早期,所以检测出IgM,则可作为某种疾病的早期诊断。抗体捕捉ELISA根据所用标记方式不同可分为标记抗原、标记抗体、标记抗抗体捕捉ELISA等几种,其中以标记抗原捕捉ELISA比较有代表性,该方法的主要程序为:① 用抗u链(抗IgM重链)抗体包被→37℃ 60分钟后置4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检血清 → 37℃ 2小时,洗涤三次、抛干③ 加酶标抗原 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。......阅读全文

抗体捕捉ELISA法的操作程序

本法主要用于检测IgM抗体。由于IgM抗体出现于感染早期,所以检测出IgM,则可作为某种疾病的早期诊断。抗体捕捉ELISA根据所用标记方式不同可分为标记抗原、标记抗体、标记抗抗体捕捉ELISA等几种,其中以标记抗原捕捉ELISA比较有代表性,该方法的主要程序为:① 用抗u链(抗IgM重链)抗体包被→

抗体捕捉ELISA法的操作程序

本法主要用于检测IgM抗体。由于IgM抗体出现于感染早期,所以检测出IgM,则可作为某种疾病的早期诊断。抗体捕捉ELISA根据所用标记方式不同可分为标记抗原、标记抗体、标记抗抗体捕捉ELISA等几种,其中以标记抗原捕捉ELISA比较有代表性,该方法的主要程序为:① 用抗u链(抗IgM重链)抗体包被→

双抗体夹心ELISA法的操作程序

本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加

布ELISA法的操作程序

(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面

斑点ELISA法的操作程序

与常规的微量板ELISA比较,Dot-ELISA具有简便、节省抗原等优点,而且结果可长期保存;但其也有不足,主要是在结果判定上比较主观,特异性不够高等。该方法的主要操作程序为:⑴载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中,

竞争ELISA法的操作程序

此法主要用于测定小分子抗原及半抗原,其原理类似于放射免疫测定。其基本程序为:① 抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液④ 用ELISA检测仪测定OD值。被结合的酶标

布ELISA法的操作程序

(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面

阻断ELISA法的操作程序

本法主要用于检测型特异性抗体。该方法现已成为猪传染性胃肠炎(TGE)、猪伪狂犬病(PR)及猪胸膜肺炎(AP)的主要检测方法。下面以AP2型抗体的阻断ELISA检测法为例介绍其操作程序:① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃

间接ELISA法的操作程序

本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。⑵ 方法步骤① 加抗原包被 → 4

斑点ELISA法的操作程序

常规的微量板ELISA比较,Dot-ELISA具有简便、节省抗原等优点,而且结果可长期保存;但其也有不足,主要是在结果判定上比较主观,特异性不够高等。该方法的主要操作程序为:⑴载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中,置

间接ELISA法的操作程序

本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。⑵ 方法步骤① 加抗原包被 → 4

竞争ELISA法的操作程序

此法主要用于测定小分子抗原及半抗原,其原理类似于放射免疫测定。其基本程序为:① 抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液④ 用ELISA检测仪测定OD值。被结合的酶标

斑点ELISA法主要操作程序

⑴载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中,置37℃使硝酸纤维素膜彻底干燥。每张7cm×2.3cm的膜一般可点加40-53个样品,每个压圈可加抗原液1-20μl。⑵ 封闭 将硝酸纤维素膜置于封闭液中,37℃感作15-30

阻断ELISA检测法操作程序

① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加工作量1:4稀释被检猪血清100μl → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干⑤

双夹心ELISA法的操作程序

此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于:它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原,它不仅不必标记每一种抗体,还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为:① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特异性抗体(A

双夹心ELISA法的操作程序

此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于:它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原,它不仅不必标记每一种抗体,还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为:① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特异性抗体(A

标记抗原捕捉ELISA法的主要程序

① 用抗u链(抗IgM重链)抗体包被→37℃ 60分钟后置4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检血清 → 37℃ 2小时,洗涤三次、抛干③ 加酶标抗原 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。

鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA,间接ELISA的操作程序

⑴ 材料① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。⑵ 方法步骤① 加抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检血清 → 37℃ 2小时,洗涤三次、抛干③ 加酶标抗体 → 37℃

ELISA法检测丝虫抗体

丝虫病(filariasis)在我国是由斑氏和马来丝虫寄生于人体淋巴系统所引起的慢性寄生虫病,通过蚊虫传播。早期临床特征主要为淋巴管炎和淋巴结炎,晚期为淋巴管阻塞形成象皮肿。常用的检查方法是用ELISA 法检测丝虫抗体。 [检测方法] ELISA法 [方法学原理] 将微丝蚴固定在玻片上制

间接ELISA的操作程序

    本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下:  ⑴ 材料  ① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;  ② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;  ③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。  ⑵ 方

阻断ELISA的操作程序

本法主要用于检测型特异性抗体。该方法现已成为猪传染性胃肠炎(TGE)、猪伪狂犬病(PR)及猪胸膜肺炎(AP)的主要检测方法。下面以AP2型抗体的阻断ELISA检测法为例介绍其操作程序:① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃

ELISA法检测HIV抗体的影响因素

酶联免疫吸附实验(ELISA)是一种常用的固相免疫测定方法,被广泛应用于各种抗原和抗体的测定。《全国艾滋病检测技术规范》(2009年修订版)中要求:各筛查实验室在进行抗体检测时,先用第一种筛查试剂(高敏感性ELISA)检测,出现阴性反应报告“HIV抗体阴性”,出现阳性反应时不可直接报告阳性结果,则用

检测鸡传染性法氏囊病病毒的双夹心抗体ELISA操作程序

① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加终止液⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,

双抗体夹心法的操作程序

本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加

双抗体夹心法的操作程序

①将含有已知抗体的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里,洗涤一次;②加待测抗原,如两者是特异的,则发生结合,然后把多余抗原洗除;③加入与待测抗原呈特异反应的酶联抗体,使形成“夹心”;④加入该酶的底物,若看到有色的酶解产物产生,说明在孔壁上存在相应的抗原。

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序(一)

    酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者

ELISA方法的基本类型、用途及操作程序

酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原

ELISA测定的常用模式竞争法测抗体

抗体的测定一般不使用竞争法。当抗原中杂质难以去除或抗原的结合特异性不稳定时,可采用这种模式测定抗体。如乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)和乙型肝炎病毒e抗体(HBe·Ab)的测定,由于e抗原较核心抗原仅多29个氨基酸,e抗原很容易转变为核心抗原,因此,HBcAb和HBeAb的测定均采用竞争法。但其测

间接-ELISA-法与双抗体夹心法的区别?

间接 ELISA 法和双抗体夹心法主要有以下区别:原理不同:双抗体夹心法使用两种针对同一抗原不同表位的抗体,一种包被在固相载体上用于捕获抗原,另一种酶标抗体用于检测结合在捕获抗体上的抗原。间接 ELISA 法是将已知抗原包被在固相载体上,然后加入待检样品中的抗体,接着加入酶标抗抗体(抗免疫球蛋白抗体