双夹心ELISA法的操作程序
此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于:它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原,它不仅不必标记每一种抗体,还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为:① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特异性抗体(Ab-2)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加入酶标抗Ab-2抗体(AB-3)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干⑤ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液⑥ 用ELISA检测仪测定OD值。......阅读全文
双夹心ELISA法的操作程序
此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于:它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原,它不仅不必标记每一种抗体,还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为:① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特异性抗体(A
双夹心ELISA法的操作程序
此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于:它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原,它不仅不必标记每一种抗体,还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为:① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特异性抗体(A
双抗体夹心ELISA法的操作程序
本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加
双夹心免疫荧光法的操作程序
中文名称双夹心免疫荧光法英文名称sandwich immunoflurescence定 义用免疫荧光法进行的双抗体夹心试验。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
双抗夹心-ELISA
实验概要夹心 ELISA 法是应用两种抗体协同测定抗原含量的方法(即:捕获抗体和检测抗体)。因此抗原必须包含至少 2 个能被抗体识别的抗原位点。在夹心 ELISA 中,单克隆抗体和多克隆抗体都可以被用作捕获抗体和检测抗体。单抗识别单一的抗原表位,可以区别抗原的微小差别,使抗原得到更精确地检测和
双抗夹心-ELISA
实验概要夹心 ELISA 法是应用两种抗体协同测定抗原含量的方法(即:捕获抗体和检测抗体)。因此抗原必须包含至少 2 个能被抗体识别的抗原位点。在夹心 ELISA 中,单克隆抗体和多克隆抗体都可以被用作捕获抗体和检测抗体。单抗识别单一的抗原表位,可以区别抗原的微小差别,使抗原得到更精确地检测和
双抗体夹心法的操作程序
①将含有已知抗体的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里,洗涤一次;②加待测抗原,如两者是特异的,则发生结合,然后把多余抗原洗除;③加入与待测抗原呈特异反应的酶联抗体,使形成“夹心”;④加入该酶的底物,若看到有色的酶解产物产生,说明在孔壁上存在相应的抗原。
双抗体夹心法的操作程序
本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加
谷胱甘肽的测定实验——双抗夹心ELISA法
以及含量;(2)谷胱甘肽具有广谱解毒作用,不仅可用于药物,更可作为功能性食品的基料,在延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用实验方法原理先将康体包被于反应板上,加入待测抗原,然后再加入酶标康体,显色后即可测得抗原含量。实验材料抗体试剂、试剂盒碳酸盐缓冲液Na2CO3磷酸盐缓冲液NaClKC
双夹心ELISA基本程序
① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特异性抗体(Ab-2)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加入酶标抗Ab-2抗体(AB-3)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干⑤ 加底物液 → 37℃ 2
ELISA双抗体夹心法
操作步骤 1.包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵
ELISA双抗体夹心法原理
原理LISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。加入酶标记的抗原或抗体,
检测鸡传染性法氏囊病病毒的双夹心抗体ELISA操作程序
① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加终止液⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。
双抗体夹心ELISA法检测待测样品sT...
实验概要本实验利用双抗体夹心ELISA法检测了待测样品sTNF-α的含量。选用两株针对TNF-α分子不同位点的单克隆抗体,即McAb1(包被抗体)与McAb2(酶标抗体)。先用McAb1包被固相载体,使待测sTNF-α与之特异性结合,然后再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的McAb2,则形成McAb
ELISA(双抗体夹心法)—检测HBsAg
以已知抗体(抗HBs)包被载体,然后将含有抗原的待检标本加入,共同孵育后,抗原结合于包被抗体上,再加入酶标记特异抗体(酶标抗HBs),酶标抗体连接到抗原上,最后加入底物溶液,根据颜色反应来判定抗原含量。 【材料】HBsAg试剂盒,本试剂盒含: 1、包被抗-HBs反应条 1瓶
ELISA(双抗体夹心法)—检测HBsAg
以已知抗体(抗HBs)包被载体,然后将含有抗原的待检标本加入,共同孵育后,抗原结合于包被抗体上,再加入酶标记特异抗体(酶标抗HBs),酶标抗体连接到抗原上,最后加入底物溶液,根据颜色反应来判定抗原含量。【材料】HBsAg试剂盒,本试剂盒含: 1、包被抗-HBs反应条1瓶2、酶结合物1瓶3、HBsA
ELISA(双抗体夹心法)—检测HBsAg
以已知抗体(抗HBs)包被载体,然后将含有抗原的待检标本加入,共同孵育后,抗原结合于包被抗体上,再加入酶标记特异抗体(酶标抗HBs),酶标抗体连接到抗原上,最后加入底物溶液,根据颜色反应来判定抗原含量。 【材料】HBsAg试剂盒,本试剂盒含: 1、包被抗-HBs反应条 1瓶
双抗体夹心ELISA法检测待测样品sTNFα含量
【基本原理】 选用两株针对TNF-α分子不同位点的单克隆抗体,即McAb1(包被抗体)与McAb2(酶标抗体)。先用McAb1包被固相载体,使待测sTNF-α与之特异性结合,然后再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的McAb2,则形成McAb1-sTNF-α -HRP标记McAb2复合物,
双抗体夹心ELISA法检测待测样品sTNFα的含量
实验概要本实验利用双抗体夹心ELISA法检测了待测样品sTNF-α的含量。选用两株针对TNF-α分子不同位点的单克隆抗体,即McAb1(包被抗体)与McAb2(酶标抗体)。先用McAb1包被固相载体,使待测sTNF-α与之特异性结合,然后再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的McAb2,则形成McAb
ELISA双抗体夹心法:检测未知抗原
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原
布ELISA法的操作程序
(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面
斑点ELISA法的操作程序
常规的微量板ELISA比较,Dot-ELISA具有简便、节省抗原等优点,而且结果可长期保存;但其也有不足,主要是在结果判定上比较主观,特异性不够高等。该方法的主要操作程序为:⑴载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中,置
竞争ELISA法的操作程序
此法主要用于测定小分子抗原及半抗原,其原理类似于放射免疫测定。其基本程序为:① 抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液④ 用ELISA检测仪测定OD值。被结合的酶标
布ELISA法的操作程序
(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面
竞争ELISA法的操作程序
此法主要用于测定小分子抗原及半抗原,其原理类似于放射免疫测定。其基本程序为:① 抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液④ 用ELISA检测仪测定OD值。被结合的酶标
斑点ELISA法的操作程序
与常规的微量板ELISA比较,Dot-ELISA具有简便、节省抗原等优点,而且结果可长期保存;但其也有不足,主要是在结果判定上比较主观,特异性不够高等。该方法的主要操作程序为:⑴载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中,
间接ELISA法的操作程序
本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。⑵ 方法步骤① 加抗原包被 → 4
间接ELISA法的操作程序
本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。⑵ 方法步骤① 加抗原包被 → 4
阻断ELISA法的操作程序
本法主要用于检测型特异性抗体。该方法现已成为猪传染性胃肠炎(TGE)、猪伪狂犬病(PR)及猪胸膜肺炎(AP)的主要检测方法。下面以AP2型抗体的阻断ELISA检测法为例介绍其操作程序:① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃
双抗体夹心ELISA法检测待测样品sIL2R含量
【基本原理】 选用两株针对sIL-2R分子不同位点的单克隆抗体,即McAb1(包被抗体)与McAb2(酶标抗体)。先用McAb1包被固相载体,使待测sIL-2R与之特异性结合,然后再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的McAb2,则形成McAb1-sIL-2R-HRP标记McAb2复合物,再加入H