阻断ELISA检测法操作程序

① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加工作量1:4稀释被检猪血清100μl → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干⑤ 加100μl工作量猪抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液⑦ 用ELISA检测仪测定OD值。本试验同时设标准阴、阳性血清对照、兔抗AP2型阳性对照、空白对照。......阅读全文

阻断ELISA检测法操作程序

① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加工作量1:4稀释被检猪血清100μl → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干⑤

阻断ELISA法的操作程序

本法主要用于检测型特异性抗体。该方法现已成为猪传染性胃肠炎(TGE)、猪伪狂犬病(PR)及猪胸膜肺炎(AP)的主要检测方法。下面以AP2型抗体的阻断ELISA检测法为例介绍其操作程序:① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃

阻断ELISA的操作程序

本法主要用于检测型特异性抗体。该方法现已成为猪传染性胃肠炎(TGE)、猪伪狂犬病(PR)及猪胸膜肺炎(AP)的主要检测方法。下面以AP2型抗体的阻断ELISA检测法为例介绍其操作程序:① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl阻断缓冲液进行封闭 → 37℃

斑点ELISA法的操作程序

常规的微量板ELISA比较,Dot-ELISA具有简便、节省抗原等优点,而且结果可长期保存;但其也有不足,主要是在结果判定上比较主观,特异性不够高等。该方法的主要操作程序为:⑴载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中,置

斑点ELISA法主要操作程序

⑴载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中,置37℃使硝酸纤维素膜彻底干燥。每张7cm×2.3cm的膜一般可点加40-53个样品,每个压圈可加抗原液1-20μl。⑵ 封闭 将硝酸纤维素膜置于封闭液中,37℃感作15-30

布ELISA法的操作程序

(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面

间接ELISA法的操作程序

本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。⑵ 方法步骤① 加抗原包被 → 4

斑点ELISA法的操作程序

与常规的微量板ELISA比较,Dot-ELISA具有简便、节省抗原等优点,而且结果可长期保存;但其也有不足,主要是在结果判定上比较主观,特异性不够高等。该方法的主要操作程序为:⑴载体膜的预处理及抗原包被 取硝酸纤维素膜用蒸馏水浸泡后,稍加干燥进行压圈。将阴性、阳性抗原及被检测抗原适度稀释后加入圈中,

竞争ELISA法的操作程序

此法主要用于测定小分子抗原及半抗原,其原理类似于放射免疫测定。其基本程序为:① 抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液④ 用ELISA检测仪测定OD值。被结合的酶标

布ELISA法的操作程序

(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大学者Blais,B. W.等于1989年建立的一种新型免疫检测技术。该方法是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即涤纶布为固相载体,这种大孔径的的疏水布具有吸附样品量大,可为免疫反应提供较大的表面

间接ELISA法的操作程序

本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。⑵ 方法步骤① 加抗原包被 → 4

竞争ELISA法的操作程序

此法主要用于测定小分子抗原及半抗原,其原理类似于放射免疫测定。其基本程序为:① 抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原(对照孔仅加酶标抗原)→ 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液④ 用ELISA检测仪测定OD值。被结合的酶标

双夹心ELISA法的操作程序

此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于:它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原,它不仅不必标记每一种抗体,还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为:① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特异性抗体(A

双夹心ELISA法的操作程序

此法与双抗体夹心ELISA的主要区别在于:它是采用酶标抗抗体检查多种大分子抗原,它不仅不必标记每一种抗体,还可提高试验的敏感性。此法的基本程序为:① 加抗体(Ab-1)包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原(Ag) → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加用非同种动物生产的特异性抗体(A

抗体捕捉ELISA法的操作程序

本法主要用于检测IgM抗体。由于IgM抗体出现于感染早期,所以检测出IgM,则可作为某种疾病的早期诊断。抗体捕捉ELISA根据所用标记方式不同可分为标记抗原、标记抗体、标记抗抗体捕捉ELISA等几种,其中以标记抗原捕捉ELISA比较有代表性,该方法的主要程序为:① 用抗u链(抗IgM重链)抗体包被→

抗体捕捉ELISA法的操作程序

本法主要用于检测IgM抗体。由于IgM抗体出现于感染早期,所以检测出IgM,则可作为某种疾病的早期诊断。抗体捕捉ELISA根据所用标记方式不同可分为标记抗原、标记抗体、标记抗抗体捕捉ELISA等几种,其中以标记抗原捕捉ELISA比较有代表性,该方法的主要程序为:① 用抗u链(抗IgM重链)抗体包被→

双抗体夹心ELISA法的操作程序

本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的双夹心抗体ELISA为例介绍本法的操作程序。① 加抗体包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加

阻断ELISA与液相阻断ELISA有什么区别

一、本质不同:间接的酶标抗体是二抗,与待检抗体结合;阻断酶标抗体是一抗,与抗原结合。间接中底物降解的量与抗体量相等,阻断底物降解量与抗体。二、实验结果不同:酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术,其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应

阻断ELISA与液相阻断ELISA有什么区别

一、本质不同:间接的酶标抗体是二抗,与待检抗体结合;阻断酶标抗体是一抗,与抗原结合。间接中底物降解的量与抗体量相等,阻断底物降解量与抗体。二、实验结果不同:酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) :是酶免疫测定技术中应用最广的技术,其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应

什么是阻断ELISA

阻断ELISA,又叫竞争ELISA,我以间接竞争ELISA为例介绍!首先包被猪瘟人工抗原4度过夜,3%脱脂牛奶封闭1H后,加入你需要检测的猪瘟样品及猪瘟提纯标准抗原50微升,再加入猪瘟抗体50微升,混匀,反应1H,再加入酶标记的抗猪瘟抗,反应1H,加入底物显色,根据标准曲线,及OD值,得出样品中的含

间接elisa和阻断elisa有什么异同

相同都是将抗原吸附于固相载体,检测抗体。不同间接的酶标抗体是二抗,与待检抗体结合;阻断酶标抗体是一抗,与抗原结合。间接中底物降解的量与抗体量相等,阻断底物降解量与抗体

ELISA法检测立克次体

ELISA法检测立克次体 立克次体(Rickettsia)是一类专性活细胞内寄生的原核细胞微生物,具有细胞壁,含有RNA和DNA,以二分裂繁殖。需在细胞内繁殖,不能在无细胞的人工培养基中生长。它是属于人兽共患的自然疫源性疾病。临床上常见的有普氏立克次体、莫氏立克次体、恙虫病立克次体和Q热立克次体

间接ELISA的操作程序

    本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下:  ⑴ 材料  ① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;  ② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;  ③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。  ⑵ 方

大鼠Ghrelin-ELISA检测法

大鼠Ghrelin ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Ghrelin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Ghrelin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Ghrelin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化

ELISA法检测丝虫抗体

丝虫病(filariasis)在我国是由斑氏和马来丝虫寄生于人体淋巴系统所引起的慢性寄生虫病,通过蚊虫传播。早期临床特征主要为淋巴管炎和淋巴结炎,晚期为淋巴管阻塞形成象皮肿。常用的检查方法是用ELISA 法检测丝虫抗体。 [检测方法] ELISA法 [方法学原理] 将微丝蚴固定在玻片上制

ELISA法检测细胞凋亡

(一) 原理细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体,与核小体片段形成夹心结构,可特

大鼠Chemerin(Chemerin)ELISA检测法

大鼠Chemerin(Chemerin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Chemerin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Chemerin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Chemerin,形成免疫复

ELISA法检测肺炎衣原体

ELISA法检测肺炎衣原体 肺炎衣原体感染广泛存在于全世界,以隐性感染为主。其临床表现多样,主要引起人非典型肺炎,还可引起咽炎、支气管炎、虹膜炎、肝炎、心内膜炎及结节性红斑等,亦是艾滋病、白血病等疾病继发感染的重要病原,且与冠心病的发生相关,严重威胁人类健康。常见检查方法为ELISA法检测肺炎衣

大鼠催乳素(PRL)ELISA检测法

大鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 PRL 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 PRL与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠PRL,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Strepta

大鼠MK(Midkine)ELISA检测法

大鼠MK(Midkine)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Midkine 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Midkine与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Midkine,形成免疫复合物连接在板上,辣根