rna浓度太低能反转录么
要看你的rna浓度有多低,一般20ng/ul。rna浓度太低可能反转不出来或者反转不是目的产物,浓度太低建议不做。......阅读全文
转运RNA的研究历史
在tRNA被发现以前,佛朗西斯·克里克就假设有种可以将RNA讯息转换成蛋白质讯息的适配分子存在。1960年代早期,亚历山大·里奇、唐纳德·卡斯帕尔等生物学家开始研究tRNA的结构,1965年,罗伯特·W·霍利首次分离了tRNA,并阐明了其序列与大致的结构,他因此贡献而获得1968年的诺贝尔生理学或医
全血RNA提取实验
实验方法原理 红细胞裂解液选择性裂解红细胞,然后独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解白细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂
信使RNA的功能特点
信使RNA(mRNA)最早发现于1960年,在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成,具有以下特点。 1.含量低,占细胞总RNA的1%~5%。 2.种类多,可达105种。不同基因表达不同的mRNA。3.寿命短,不同mRNA指导合成不同的蛋白质,完成使命后即被降解。细菌mRNA的平均半衰
肝脏细胞RNA的提取
一.原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关重要的,
micro-RNA(miRNA)综述2
miRNA的作用方式最早被发现的两个miRNAs――lin-4 and let-7被认为是通过不完全互补结合到目标靶mRNA3'非编码区端,以一种未知方式诱发蛋白质翻译抑制,进而抑制蛋白质合成,阻断mRNA的翻译。多个果蝇miRNAs也被发现和他们的目标靶mRNAs的3'非编码区
RNA沉默的功能作用
植物可利用 PTGS 和 TGS 来抵抗病毒侵染, 病毒侵染植物后会产生大量病毒来源的小 RNA (virus-derived small interfering RNAs, vsiRNA), 介导对病毒 RNA 的降解或抑制病毒基因的转录;而在与植物长期共进化过程中, 病毒编码一个或多个RNA沉默
小分子RNA的简介
MicroRNA (miRNA) 是一类内生的、长度约为20-24个核苷酸的小RNA,其在细胞内具有多种重要的调节作用。每个miRNA可以有多个靶基因,而几个miRNA也可以调节同一个基因。这种复杂的调节网络既可以通过一个miRNA来调控多个基因的表达,也可以通过几个miRNA的组合来精细调控某
甲型肝炎病毒-RNA-提取
试剂、试剂盒 TSES 缓冲液 TSES 缓冲液饱和酚 氯仿 辛醇 乙酸钾 乙醇 缓冲液 A lmol L
细胞化学词汇核仁RNA
中文名称:核仁RNA英文名称:nucleolar RNA定 义:核仁中的RNA。包括核糖体核糖核酸(rRNA)前体、核仁小RNA等。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
防止RNA酶污染方法
防止RNA酶污染的措施1. 所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6hr或更长时间。2. 塑料器皿可用0.1% DEPC水浸泡或用氯仿冲洗(注意:有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀,故不能使用)。3. 有机玻璃的电泳槽等,可先用去污剂洗涤,双蒸水冲洗,乙醇干燥,再浸泡在3% H2O2 室温10mi
全血RNA提取实验
实验材料 鲜血液试剂、试剂盒 抗凝剂红细胞裂解液RLB去蛋白液RW1乙醇漂洗液RW仪器、耗材 制冰机离心机离心管移液枪移液管针头注射器水浴锅实验步骤 一、在适合大小的RNase free离心管中加入1体积(
RNA干扰相关知识Microprocessor
Microprocessor:一种核内的复合物,主要由Drosha和Pasha两者组成,在miRNA的生物合成中促使原始的miRNA成为miRNA前体。
使用-Trizol-纯化-RNA-实验
实验材料 磨细的组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇,75%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水配制DEPC 处理过的水2. 细胞和组织50~100 mg 已磨细的组织二、方法1
如何确认RNA的质量
1、RNA胶(凝胶成像)检测。例如:原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。在胶上就有三条明显大小不一的条带。2、凝胶迁移分析。可以用来研究RNA-蛋白相互作用。基本原理是:结合了蛋白的RNA在凝胶中的迁移速率更慢,因而可以区分出结合蛋白与未结合蛋白的RNA条带。3、RNA-seq
转移RNA的功能特点
转移RNA(tRNA)在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%,绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在,Zamecnik和 Hoagland于1957年鉴定。 1.tRNA一级结构具有以下特点:①是一类单链小分子RNA,
信使RNA的功能特点
信使RNA(mRNA)最早发现于1960年,在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成,具有以下特点。 1.含量低,占细胞总RNA的1%~5%。2.种类多,可达105种。不同基因表达不同的mRNA。 3.寿命短,不同mRNA指导合成不同的蛋白质,完成使命后即被降解。细菌mRNA的平均半衰
时序小RNA的定义
中文名称时序小RNA英文名称small temporal RNA;stRNA定 义一类长度约为22核苷酸的非编码RNA,是微RNA大家族的成员。与生物发育时间顺序调控有关,如早期报道的线虫lin-4和let-7时序小RNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
RNA实验方法2
13. Prehybridization mix (add in order listed at 5 mL/100 cm2 membrane)Conc.5 mL10 mL15 mLx mLStocks5x500 礚1000 礚1500 礚50x Denhardt誷5x1 mL2 mL3 m
RNA病毒怎么合成mRNA
和DNA和成mRNA一样的,RNA聚合酶可以完成这一过程,只不过特殊的单股RNA病毒分为正链mRNA(即mRNA和原RNA一样)和负链mRNA(和原RNA互补)。
RNA干扰主体实验介绍
siRNA表达载体构建好后,即可进行RNA干扰主体实验。RNA干扰主体实验的重点在于:成功将siRNA表达载体导入目的细胞如果目的细胞的质粒转染效率较低(低于70%),则应采用腺病毒或慢病毒载体,利用病毒载体的高感染率、高表达特性,更好地开展RNA干扰主体实验。设置好分组和对照按照nature的标准
细胞化学词汇转运RNA
中文名称:转运RNA外文名称:transfer ribonucleic acid,tRNA功 能:携带并转运氨基酸。转运RNA(Transfer RNA),又称传送核糖核酸、转移核糖核酸,通常简称为tRNA,是一种由76-90个核苷酸所组成的RNA,其3'端可以在氨酰-tRNA合
引物延伸法-RNA-分析
实验材料 T4 多核苷酸激酶 AMV 反转录酶 酵母 tRNA 试剂、试剂盒 10X 激酶缓冲液
转运RNA的研究历史
在tRNA被发现以前,佛朗西斯·克里克就假设有种可以将RNA讯息转换成蛋白质讯息的适配分子存在。1960年代早期,亚历山大·里奇、唐纳德·卡斯帕尔等生物学家开始研究tRNA的结构,1965年,罗伯特·W·霍利首次分离了tRNA,并阐明了其序列与大致的结构,他因此贡献而获得1968年的诺贝尔生理学或医
3.1.2-RNA-大量转录合成
RNA 标准转录体系的一般回收率为 lugRNA/ug 质粒 DNA, 使用下面的方法,可以提高回收率至 5〜l0ug RNA/ug 质粒 DNA。大量制备 RNA 可以用于体外翻译。实验材料模板 DNA 或质粒试剂、试剂盒TETE 饱和酚氯仿异内醇3mol LNaAc无水乙醇5X 转录缓冲液lOO
Science突破:实时追踪RNA
第一次,研究人员在单分子水平上实时观测了转录过程中的RNA折叠。他们是如何做到的?他们又从中获悉了什么? 在一个隔音、温度恒定、振动控制的地下实验室,斯坦福大学的研究人员实时观察了RNA的转录,注视着RNA新生单链变长――一个核苷酸一个核苷酸 ――并折叠形成一个调控核糖体开关(regu
核仁RNA的结构组成
中文名称核仁RNA英文名称nucleolar RNA定 义核仁中的RNA。包括核糖体核糖核酸(rRNA)前体、核仁小RNA等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
micro-RNA(miRNA)综述3
未来要解决的问题miRNAs在多个物种中广泛被发现,而且在进化上高度保守。这些“小玩意儿”留给我们一大堆谜团:miRNA的确切功能是什么?它的目标靶是什么?作用机制是什么?也许需要对植物或者线虫的基因组进行miRNAs突变株的筛选,在果蝇中可以用targeted- disruption缺失miR
细胞化学词汇RNA输出
中文名称:RNA输出英文名称:RNA export定 义:真核生物RNA从细胞核输送到细胞质的过程。游离RNA及其前体是不能直接通过核孔的,需要与许多RNA结合蛋白生成核糖核蛋白复合体,才能输出到细胞质行使功能。不同种类RNA需要不同的结合蛋白。核内的信使核糖核酸在切除内含子后才能输出。应用学科:
酵母总RNA的制备
试剂、试剂盒 AE 缓冲液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 无水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸钠 无 RNase 的水仪器、耗材 髙速离心机实验步骤 一 材料与设备1)AE 缓冲液:50 mmol/L 乙酸钠 (PH5.3),lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 缓冲液预先平衡)。3)
动物RNA提取实验原理
RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关