抗血清的制备
1、动物的选择羊、马、鸡、猴、豚鼠，都是常用的免疫动物，在实验中，选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体等因素。免疫用动物应选适龄、健壮．最好为雄性。最常用的实验动物是家兔，一般选择选择年龄在6个月以上当年繁殖的♂性，体重2 ～3公斤，健康家兔三只，免疫前用金属编号牌固定兔耳，或用染料涂沫在动物的背部，作出明确的标记。2、抗原制备1）抗原稀释：用灭菌生理盐水将抗原稀释为2mg/ml，于免疫前一天加入溶液，使每毫升抗原溶液含青霉素1000 UI，链霉素1000 UI，放4℃过夜（一般可不加青、链霉素）次日取出，与佐剂混合制成乳剂后用于动物免疫。免疫原的注射剂量应考虑其抗原性的强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。对于纯的可溶性抗原的免疫剂量，通常小鼠首次抗原剂量为50～100μg/次，大鼠为100～200μg/次，兔为100μg ～1 mg/次，合成免疫原为2 ......阅读全文
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒封闭缓冲液封闭试剂抗体LB 顶层琼脂糖LB 平板琼脂培养基仪器、耗材硝酸纤维素滤膜λ噬菌体载体cDNA 文库实验步骤材料缓冲液和溶液贮存液，缓冲液和试剂的组分请见附录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)150 mmol/L NaCl
抗血清的制备的免疫程序有哪些？
1.免疫原的剂量：免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受，在一定剂量范围内，免疫原剂量越大，产生的抗体效价越高。2.免疫途径：有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径。皮内或皮下免疫时一般采用多点注射。初次免疫一般选择皮内接种，加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量
去除抗血清中交叉反应的抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液封闭试剂抗体LB 顶层琼脂糖LB 平板琼脂培养基仪器、耗材 硝酸纤维素滤膜λ噬菌体载体cDNA 文库实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液，缓冲液和试剂的组分请见附录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl(pH8.0)150 mmol/L N
病毒中和实验_固定抗血清－稀释病毒法
实验材料已知标准的抗病毒血清 (20抗体单位 0. 1 ml)试剂、试剂盒已知阴性血清 (56℃ 30 min 灭活）宿主：敏感细胞、敏感动物、鸡胚仪器、耗材细胞培养板水浴锅细胞培养箱实验步骤（以细胞培养为例）：①用细胞维持液连续 10倍稀释病毒分离物10-1~10-8);②取 0. 6ml不同浓度
抗血清中去除交叉反应性抗体实验
试剂、试剂盒 封闭缓冲液封闭液细胞悬浮缓冲液抗体LB 培养基仪器、耗材 Sorval GSA 转子或相当转子适用于处理细菌的超声波破碎仪大肠杆菌 Y1090 hsdR实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存缓冲液和试剂的组分请见时录 12。将贮存液稀释到适当的浓度。封闭缓冲液10 mmol/L Tris-Cl
抗血清的制备免疫程序知识点
1.免疫原的剂量：免疫原剂量过大或过小都可使动物产生免疫耐受，在一定剂量范围内，免疫原剂量越大，产生的抗体效价越高。2.免疫途径：有皮内、皮下、肌内、静脉、腹腔、淋巴结等途径。皮内或皮下免疫时一般采用多点注射。初次免疫一般选择皮内接种，加强免疫和颗粒性抗原一般选择静脉注射。宝贵抗原可选择淋巴结内微量
病毒中和实验_固定病毒－稀释抗血清法
中和试验 (neutralization test)是在体外适当条件下孵育病毒与特异性抗体的混合物，使病毒与抗体相互反应，再将混合物接种到敏感的宿主体内，然后测定残存的病毒感染力的一种方法。凡是能与病毒结合，并使其失去感染力的抗体称为中和抗体。因为病毒要依赖于活的宿主系统复制增殖，因此，中和试验必须
概述抗原抗体反应的抗血清的特性鉴定
根据不同目的制备的抗血清，对其中所含抗体的浓度，特异性及免疫球蛋白种类的要求也不一样。为了获得质量和数量上合符要求的抗血清，在收集动物血清前必须对免疫效果进行检测，对收获后的抗血清也必须对—些参数进行分析，如效价、亲和力及交叉反应等。根据不同的抗原性质选用合适的检测方法。最常用的为免疫沉淀，EL
双向免疫扩散法测定抗血清效价
实验方法原理 将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板中的相邻小孔中，使两者互相扩散，当扩散到它们的浓度达当量点时(浓度相当)形成沉淀线。如果抗原-抗体的浓度合适时，沉淀线在两孔的中间。如抗体过量，沉淀线靠近抗原孔。如抗原过量，沉淀线靠近抗体孔。此技术可以测定抗血清的效价。此外，根据沉淀融合的情况，还可以
概述抗原抗体反应的抗血清的特性鉴定
根据不同目的制备的抗血清，对其中所含抗体的浓度，特异性及免疫球蛋白种类的要求也不一样。为了获得质量和数量上合符要求的抗血清，在收集动物血清前必须对免疫效果进行检测，对收获后的抗血清也必须对—些参数进行分析，如效价、亲和力及交叉反应等。根据不同的抗原性质选用合适的检测方法。最常用的为免疫沉淀，EL
单克隆抗体与常规抗血清的性质比较
单克隆 抗体与常规抗血清的性质比较免疫球蛋白 性质 常规 血清抗体 单克隆
关于抗原抗体反应的抗血清的纯化与保存
（1）采血：加强免疫的动物2—3次后，可通过耳静脉或眼球（小鼠）采血，进行抗血清效价测定。当效价达到理想的高度后，可以采血。采血方式可以从心脏直接取血，也可通过动脉放血。待血液凝固后用针筒或吸管吸取血清。 （2）抗血清的纯化与保存：除抗体外血清中含有多种其他蛋白成分。为了避免这些蛋白质干扰抗体
兔多克隆抗血清的制备实验——耳动脉放血
实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1. 准备用于放血的家兔（见基本方案） 2. 将靠近家兔头部的半只耳朵托在梅指和食指上，用中指和无名指弯曲剩余的半只耳朵使之下垂，以便使血液随重力下流，用一个18G注射用针头（不带注射器）沿着兔耳中动脉进针，针尖指向兔耳根部
兔多克隆抗血清的制备实验——皮内注射免疫法
实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1. 按基本方案中步骤1制备免疫兔用的抗原。 2. 牢牢地抓住兔子，剃除其背毛，用70%乙酵消毒其暴露的皮肤。用拇指和食指将需要免疫注射的区域的皮肤张开，用3 ml 注射器带24G注射针头以相对皮肤30。的角度进针（针尖的斜
兔多克隆抗血清的制备实验——肌肉内注射免疫法
实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1. 取2 ml 的弗氏完全佐剂加到2 ml 的溶于PBS的纯化抗原中，使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液，接上22G注射针头，排出注射器中的气泡。 2. 将兔子敢在固定架上，用一只手抓住兔的颈背部毛皮，另一只手托住兔
放射免疫分析含有特异性抗体的抗血清检定
含有特异性抗体的抗血清是放射免疫分析的主要试剂,常以抗原免疫小动物诱发产生多克隆抗体而得。抗血清的质量直接影响分析的灵敏度和特异性。抗血清质量的指标主要有亲和常数、交叉反应率和滴度。①亲和常数(affinityconstant):常用K值表示。它反映抗体与相应抗原的结合能力。K 值的单位为 mol/
兔多克隆抗血清的制备实验——皮下组织注射免疫法
实验材料抗原试剂、试剂盒PBS乙醇仪器、耗材注射针头注射器培养箱实验步骤1. 准备用于注射家兔的抗原，并准备用于皮下注射免疫的家兔（方法同皮内注射）。2. 将家兔背部皮肤捏出，以远离其下的肌肉，用24G注射针头全程穿剌，进入皮下，小心勿刺入肌肉组织中，在4个不同的部位各注射0.5 ml 抗原。
双向免疫扩散法测定抗血清效价实验—双向免疫扩散法
双向免疫扩散法可用于：（1）诊断疾病；（2）测定抗体的效价。实验方法原理将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板中的相邻小孔中，使两者互相扩散，当扩散到它们的浓度达当量点时(浓度相当)形成沉淀线。如果抗原-抗体的浓度合适时，沉淀线在两孔的中间。如抗体过量，沉淀线靠近抗原孔。如抗原过量，沉淀线靠近抗体孔。此
从抗血清、腹水或杂交瘤上清液中纯化免疫球蛋白G组分
实验方法原理 虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选，然而有时这种纯化方式却非必需，或者无法实施进行（如有时抗原量不充足）。实验材料 抗血清、腹水或杂交瘤上清液试剂、试剂盒 饱和硫酸铵溶液（SAS)仪器、耗材 透析膜（MWCO 12 000〜14 000）、涡旋混合器实验步骤 1)于 4℃ 不断搅
从抗血清、腹水或杂交瘤上清液中纯化免疫球蛋白G组分
DEAE-Affi-Gel Blue层析法分级分离IgG实验材料抗血清、腹水或杂交瘤上清液试剂、试剂盒DEAE-Affi-Gel Blue、加样缓冲液、洗脱缓冲液、晶体形式的NaN3仪器、耗材移液枪、烧杯实验步骤1）根据制造商的说明准备DEAE-Aff1-Gel Blue柱子。于4℃用5倍柱床体积的
从抗血清、腹水或杂交瘤上清液中纯化免疫球蛋白G组分1
饱和硫酸铵沉淀IgG实验方法原理虽然亲和层析法是进行特异性抗体纯化的首选，然而有时这种纯化方式却非必需，或者无法实施进行（如有时抗原量不充足）。实验材料抗血清、腹水或杂交瘤上清液试剂、试剂盒饱和硫酸铵溶液（SAS)仪器、耗材透析膜（MWCO 12 000〜14 000）、涡旋混合器实验步骤1)于 4
抗肽的抗血清制备及从多肽库筛选B细胞和T细胞抗原表位
使用双功能团试剂将合成肽偶联至载体蛋白实验步骤基 本 方 案 使用双功能团试剂将合成肽偶联至载体蛋白材 料家兔肽-载体的连接体（单 元 13. 1)P B S , p H 7. 5弗 氏 完 全 佐 剂（F C A ; Pierce Biotechnology)弗氏不完全佐剂1 . 收 集 血 样（
抗肽的抗血清制备及从多肽库筛选B细胞和T细胞抗原表位
采用合成肽组合库鉴定 B 细 胞 和 T 细胞的表位实验步骤 基 本 方 案 1 采 用 PS-SCL 筛选抗体抑制剂材 料肽或蛋白质抗原目的抗原的单克隆抗体（M A b )1 % (m/V) BS A / P B S (见附录 1PBS)六 肽 的 PS-SCL ( 表 13. 3.1): 5 m
植物病毒检疫技术突破填补国内空白
经过半年多的努力，中山检验检疫局技术中心分子生物学实验室27日传出喜讯，该实验室已经制备出我国最新颁布的检疫性植物病毒李痘病毒、李属坏死环斑病毒和侵染香蕉最为严重的病毒之一黄瓜花叶病毒的抗血清，价值超亿元，该项技术填补了广东检验检疫系统在全国植物病毒方面无自制抗血清的空白。 据《南方都市报》报道，
关于载脂蛋白AⅠ的注意事项介绍
(1) 免疫透射比浊法： ① 关于抗血清：比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。比浊法以用多克隆抗体为宜。抗血清中必须不含杂抗体。必须十分重视从人血清中提取的apoAⅠ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯，这不是一般实验室都能做到的。抗血清效价(滴度)不可低于16。目前国内某些商品试剂中，apoAⅠ
乳糜微粒的注意事项
1、免疫透射比浊法： （1）关于抗血清：比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。比浊法以用多克隆抗体为宜。抗血清中必须不含杂抗体。必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅰ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯，这不是一般实验室都能做到的。抗血清效价（滴度）不可低于16。目前国内某些商品试剂中，apoA-
载脂蛋白aⅱ的注意事项
(1)免疫透射比浊法： ①关于抗血清：比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。比浊法以用多克隆抗体为宜。抗血清中必须不含杂抗体。必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅱ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯，这不是一般实验室都能做到的。抗血清效价(滴度)不可低于16。目前国内某些商品试剂中，apoA-Ⅱ
乳糜微粒的注意事项及检查过程
注意事项 1、免疫透射比浊法： （1）关于抗血清：比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。比浊法以用多克隆抗体为宜。抗血清中必须不含杂抗体。必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅰ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯，这不是一般实验室都能做到的。抗血清效价（滴度）不可低于16。目前国内某些商品试剂中
关于乳糜微粒的免疫透射比浊法注意事项
① 关于抗血清：比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。比浊法以用多克隆抗体为宜。抗血清中必须不含杂抗体。必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅰ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯，这不是一般实验室都能做到的。抗血清效价(滴度)不可低于16。目前国内某些商品试剂中，apoA-Ⅰ抗血清效价极低，选购试剂
乳糜微粒的注意事项
(1) 免疫透射比浊法： ① 关于抗血清：比浊测定与其他方法相比对抗血清的要求更高。比浊法以用多克隆抗体为宜。抗血清中必须不含杂抗体。必须十分重视从人血清中提取的apoA-Ⅰ达到免疫纯、色谱纯与电泳纯，这不是一般实验室都能做到的。抗血清效价(滴度)不可低于16。目前国内某些商品试剂中，apoA-Ⅰ