cccDNA检测方法及应用价值

细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA(relaxed circularDNA,rcDNA)分子,其两条链均不是闭合的,其中负链较长,约3200个碱基,含有乙肝病毒基因组的全长基因,在其5’起始端与3’末端之间有一个数个碱基的“缺刻”(nick);正链较短,有较大的“缺口”(gap),其3’末端不固定,故长度是可变的,约为负链长度的50%~100%。在乙肝病毒的复制过程中,病毒DNA进入宿主细胞核,在DNA聚合酶的作用下,两条链的缺口均被补齐,形成超螺旋的共价、闭合、环状DNA分子(covalently closed circularDNA,cccDNA)。cccDNA是乙肝病毒前基因组RNA复制的原始模板,虽然其含量较少,每个肝细胞内只有约5~50个拷贝,但对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义,只有清除了细胞核内的cccDNA,才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态,是抗病毒治疗的目标。......阅读全文

cccDNA检测方法及应用价值

细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA(relaxed circularDNA,rcDNA)分子,其两条链均不是闭合的,其中负链较长,约3200个碱基,含有乙肝病毒基因组的全长基因,在其5’起始端与3’末端之间有一个数个碱基的“缺刻”(nick);正链较短,有较大的“缺口”(gap),其

共价闭合环状DNA(cccDNA)的检测方法及应用价值

  细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA(relaxed circularDNA,rcDNA)分子,其两条链均不是闭合的,其中负链较长,约3200个碱基,含有乙肝病毒基因组的全长基因,在其5’起始端与3’末端之间有一个数个碱基的“缺刻”(nick);正链较短,有较大的“缺口”(gap)

cccDNA的检测方法

cccDNA和rcDNA在结构和理化特性上有三点不同:①rcDNA在正链与负链上均有缺口或缺刻,只是部分区域互补故能形成环状结构,但非超螺旋结构;而cccDNA两条链均是完整的,二者共价互补,形成超螺旋结构。②rcDNA能与蛋白质共价结合,cccDNA则不能。③由于缺口或缺刻的存在,rcDNA可以被

cccDNA的定性检测

既往绝大多数文献报道的是用Southern blot对cccDNA进行定性检测,该方法是分子生物学的经典方法,但技术要求较高,敏感度低。近年来,也有较多文献报道用PCR技术对cccDNA进行检测。但是,由于PCR技术灵敏度极高,rcDNA和cccDNA的序列又具有高度的同源性,因此在用PCR技术检测

cccDNA的定量检测

在定性检测的基础上,可以进一步对cccDNA进行定量检测。仍以PCR定量分析技术中,尤其是竞争PCR技术的敏感性和精确度高。方法是在PCR反应管中加入一种已知量的、能与野生模板等效扩增的内参照,内参照是经过突变处理的,其两端尤其是引物退火区的序列与野生模板相同。PCR扩增后通过一定的方法将野生片段与

关于共价闭合环状DNA(cccDNA)的检测方法介绍

  共价闭合环状DNA(cccDNA)和rcDNA在结构和理化特性上有三点不同:  ①rcDNA在正链与负链上均有缺口或缺刻,只是部分区域互补故能形成环状结构,但非超螺旋结构;而cccDNA两条链均是完整的,二者共价互补,形成超螺旋结构。  ②rcDNA能与蛋白质共价结合,cccDNA则不能。  ③

武汉大学开发新方法,灵敏检测乙肝病毒cccDNA

  武汉大学中南医院的研究人员近日利用微滴式数字PCR(ddPCR)技术,开发出一种新型的HBV检测方法。   201804181524017685822.png   根据世界卫生组织的最新统计,全球约有2.57亿人感染乙型肝炎病毒(HBV)。慢性HBV感染会造成肝硬化和肝细胞癌(HCC)等严重

气体检测仪的应用价值

气体检测仪在我国工业领域中的应用范围很广,应用价值也越来越被人们所重视与关注。大家都知道,有毒气体会对人体造成伤害。因此,在过去的工业生产中出于安全的考虑,人们开始对气体检测仪进行研制并已投入使用使用。随着我国经济的快速发展以及人们生活水平的不断提高,人们不但要求工作环境的安全性,而且要求生活的舒适

气体检测仪的应用价值

   气体检测仪在我国工业领域中的应用范围很广,应用价值也越来越被人们所重视与关注。大家都知道,有毒气体会对人体造成伤害。因此,在过去的工业生产中出于安全的考虑,人们开始对气体检测仪进行研制并已投入使用使用。随着我国经济的快速发展以及人们生活水平的不断提高,人们不但要求工作环境的安全性,而且要求生活

气体检测仪的应用价值

     气体检测仪在我国工业领域中的应用范围很广,应用价值也越来越被人们所重视与关注。大家都知道,有毒气体会对人体造成伤害。因此,在过去的工业生产中出于安全的考虑,人们开始对气体检测仪进行研制并已投入使用使用。随着我国经济的快速发展以及人们生活水平的不断提高,人们不但要求工作环境的安全性,而且要求

气体检测仪的应用价值

气体检测仪在我国工业领域中的应用范围很广,应用价值也越来越被人们所重视与关注。大家都知道,有毒气体会对人体造成伤害。因此,在过去的工业生产中出于安全的考虑,人们开始对气体检测仪进行研制并已投入使用使用。随着我国经济的快速发展以及人们生活水平的不断提高,人们不但要求工作环境的安全性,而且要求生活的舒适

简述共价闭合环状DNA(cccDNA)的检测意义

  乙肝病毒不仅仅是一种嗜肝病毒,一些肝外组织中也可检测到乙肝病毒DNA,如肾脏、胰腺以及外周血单个核细胞(peripheralblood mononuclearcell,PBMC)等。早就有人发现乙肝病毒可以感染白细胞,而这种免疫细胞的感染似乎有利于病毒逃避免疫反应,从而导致机体清除乙肝病毒的能力

抗体检测方法及临床应用

  方法  现在抗体检测的方法众多,除传统的沉淀反应,凝集试验,补体结合试验外,标记免疫测定(如酶联免疫测定、放射免疫测定、荧光免疫测定、发光免疫测定等)已成为主要的免疫测定技术,免疫印迹法也发挥了明显的作用,一些快速测定法(如快速斑点免疫结合试验)也被广泛使用。  临床应用  首先抗体检测用于诊断

关于共价闭合环状DNA(cccDNA)的定量检测介绍

  在定性检测的基础上,可以进一步对共价闭合环状DNA(cccDNA)进行定量检测。仍以PCR定量分析技术中,尤其是竞争PCR技术的敏感性和精确度高。方法是在PCR反应管中加入一种已知量的、能与野生模板等效扩增的内参照,内参照是经过突变处理的,其两端尤其是引物退火区的序列与野生模板相同。PCR扩增后

基因突变检测的检测方法及临床应用

  常见检测方法  1.焦磷酸测序法  测序法的基本原理是双脱氧终止法,是进行基因突变检测的可靠方法,也是使用最多的方法。但其过程繁琐、耗时长,灵敏度不高,对环境和操作者有危害,故在临床应用中存在一定的限制。  2.单链构象异构多态分析技术  依据单链DNA在某一种非变性环境中具有其特定的第二构象,

电子除垢仪的简介、应用及价值

  电子除垢器是一种采用物理方法进行水处理的专用仪器,它能在保持原水化学成分的基础上,通过改变水分子的物理结构,达到防垢、除垢的效果。  设备简介  电子除垢仪有称之为除垢仪,除垢器,是一种采用物理方法进行水处理的专用仪器,它能在保持原水化学成分的基础上,通过改变水分子的物理结构,达到防垢、除垢的效

关于共价闭合环状DNA(cccDNA)的定性检测的介绍

  既往绝大多数文献报道的是用Southern blot对cccDNA进行定性检测,该方法是分子生物学的经典方法,但技术要求较高,敏感度低。  近年来,也有较多文献报道用PCR技术对cccDNA进行检测。但是,由于PCR技术灵敏度极高,rcDNA和共价闭合环状DNA(cccDNA)的序列又具有高度的

农业环境检测仪的5大应用价值

科技与农业的结合,可以有效解决传统农业的痛点。尤其是在农业环境监测方面,科技可以让以前无法监测的各项气候参数得以准确测定,可以让以前单一的环境指标测定变成多方位、多指标的环境监测……这很大程度上提高了现代农业技术水平。农业环境检测仪就是这种先进技术的典型代表,随着这一设备的广泛推广使用,让我国农业的

血清脂肪酶活性检测临床应用的价值

脂肪酶(LPS)是一组特异性较低的脂肪水解酶类,主要来源于胰腺,其次为胃及小肠。 血清脂肪酶作为急性胰腺炎诊断指标更优于血清淀粉酶: 胰腺是人体脂肪酶(LPS)最主要来源。急性胰腺炎时,血清淀粉酶增加的时间较短,而血清LPS活性上升可持续10—15天,可检测时间LPS更早。 血清脂肪酶对急性胰腺炎的

cccDNA的功能和结构特点

在乙肝病毒的复制过程中,病毒DNA进入宿主细胞核,在DNA聚合酶的作用下,两条链的缺口均被补齐,形成超螺旋的共价、闭合、环状DNA分子(covalently closed circularDNA,cccDNA)。细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA(relaxed circularDN

菟丝子科的地理分布及应用价值介绍

  地理分布  广布于全世界暖温带,主产美洲。在我国产于连云港、邱县、铜山、宝应、南京、吴江等地,生长在山坡路旁、河边,多寄生在豆科、菊科、蓼科等植物上;分布于华北、华东、中南、西北及西南各省。  应用价值  本亚科植物种子含脂肪油及淀粉;又可入药,为滋养性强壮收敛药,治阳痿,遗精,遗尿等症。味辛甘

微生物鉴定常见生化反应及应用价值

 明胶液化试验  (1)原理:某些细菌可以产生一种胞外蛋白水解酶(明胶酶),能使明胶分解为氨基酸,使明胶失去凝固能力而液化,因而使半固体的明胶培养基成为流动的液体。    (2)方法:将待检菌接种于明胶培养基中,22℃培养7d或更长时间,每天观察结果有无凝固。    (3)结果:如无凝固,则表示明胶

mNGS对于皮肤及软组织感染的应用价值

皮肤和软组织感染是一种最常见的感染性疾病,皮肤和软组织感染涉及到不同临床表现、病因和严重程度,病情可以是轻度的也可能严重威胁生命。其发病率约为尿路感染的2倍,肺炎的10倍。鉴于皮肤和软组织感染中病原体的多样性,临床医生倾向于选择广谱抗生素作经验性治疗,这可能会增加耐药菌的患病率,培养结果对于抗生素的

cccDNA:慢性乙肝持续感染的元凶

  慢性乙型病毒性肝炎影响着全球超过 2.5 亿人口,每年约有 65 万人死于 HBV 相关终末期肝病。共价闭合环状(ccc)DNA 是慢性乙肝持续感染的元凶,作为病毒复制的中介,其在宿主肝细胞核内以微染色体的形式存在,目前的治疗手段难以将其彻底清除,从而达到慢性乙肝的彻底治愈。  Gut 杂志上发

类黄酮的应用价值

黄酮类化合物中有药用价值的化合物很多,如向天果、槐米中的芦丁和陈皮中的陈皮苷,能降低血管的脆性,及改善血管的通透性、降低血脂和胆固醇,用于防治老年高血压和脑溢血。其中向天果是一种非常难得的植物,它同时富含人参和银杏中的重要成分:皂甙和黄酮化合物,在同一植物中同时获取这两种成分,且在量的比例相当合适,

D二聚体临床应用原则及价值

 D-二聚体简介:  D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子XIII交联后,再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物,是一个特异性的纤溶过程标记物。D-二聚体来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块。英文缩写D-Dimer  D-二聚体的临床价值已经得到普遍的认同,它以其高度的敏感性,在深静脉血栓和肺栓塞的排

罗布麻叶的医用价值及临床应用

  医用价值  1、降压作用  罗布麻叶煎剂对肾型高血压狗灌胃后2小时,血压从194/142mm汞柱降至152/100mm汞柱,并一直稳定在较低水平,3天后才有回升。[3]  2、强心作用  罗布麻根中所含加拿大麻甙对离体及在位猫心均能使其收缩幅度增大,心率变慢,然后心律不齐,终于心跳停止于收缩期,

彩色多普勒超声在胎儿窘迫检测中的应用价值探讨

  性或者急性缺氧对胎儿的生命和健康造成威胁的一种综合征[1]。对于胎儿宫内窘迫长期的诊断法方法是应用胎心监护的方式,为了提高对胎儿产前宫内的监测水平,对胎儿在宫内的状态进行准确的评估,加强对围产儿的保健,降低胎儿在围产期的发病率和死亡率,彩色多普勒超声已经广泛的普及。现在对我院在2010年1月到2

实验室检测尿微量白蛋白的临床应用价值

  尿微量白蛋白指高于正常,但常规方法无法检出的白蛋白尿。通常,血尿素和血肌酐的测定值正常时并不能排除肾脏的受损, 而尿常规蛋白测定结果为阳性时,肾脏的损伤往往已达到不可恢复的阶段。尿微量白蛋白(MA)的测定已越来越多地用做肾组织损伤的早期诊断指标,其临床意义也已日益为临床医生所重视。 1

抗角蛋白抗体的检测及临床价值是什么

  抗角蛋白抗体(AKA)又称为抗丝集蛋白抗体(AFA)或抗角质层抗体(ASCA)。AKA主要见于类风湿性关节炎患者,其阳性率为30%~55%,特异性可达95%~99%。在非类风湿性关节炎的自身免疫病患者,AKA的阳性检出率极低。AKA与RF在诊断RA时具有显著的相关性。由于AKA的出现常可先于疾病