cccDNA的定量检测
在定性检测的基础上，可以进一步对cccDNA进行定量检测。仍以PCR定量分析技术中，尤其是竞争PCR技术的敏感性和精确度高。方法是在PCR反应管中加入一种已知量的、能与野生模板等效扩增的内参照，内参照是经过突变处理的，其两端尤其是引物退火区的序列与野生模板相同。PCR扩增后通过一定的方法将野生片段与突变片段区分开，分别计算其绝对量，或求出其相对比值，就可以推算PCR扩增以前野生模板的量。He等建立了实时荧光定量PCR检测cccDNA的方法。他们将TaqmanMGB探针设计在负链缺刻的下游，与负链互补结合。对cccDNA，在上游引物的引导下，Taq酶到达TaqmanMGB探针所结合的位点，利用其5’→3’外切活性将探针切断，3’端的淬灭基团失去对5’端的发光基团的抑制作用，从而产生荧光信号。每扩增一个cccDNA分子，就会产生一个荧光信号，PCR仪可对产生的信号进行实时监测，根据荧光信号的强弱对cccDNA进行定量。对rcDNA，......阅读全文
cccDNA的定量检测
在定性检测的基础上，可以进一步对cccDNA进行定量检测。仍以PCR定量分析技术中，尤其是竞争PCR技术的敏感性和精确度高。方法是在PCR反应管中加入一种已知量的、能与野生模板等效扩增的内参照，内参照是经过突变处理的，其两端尤其是引物退火区的序列与野生模板相同。PCR扩增后通过一定的方法将野生片段与
关于共价闭合环状DNA（cccDNA）的定量检测介绍
在定性检测的基础上，可以进一步对共价闭合环状DNA（cccDNA）进行定量检测。仍以PCR定量分析技术中，尤其是竞争PCR技术的敏感性和精确度高。方法是在PCR反应管中加入一种已知量的、能与野生模板等效扩增的内参照，内参照是经过突变处理的，其两端尤其是引物退火区的序列与野生模板相同。PCR扩增后
cccDNA的定性检测
既往绝大多数文献报道的是用Southern blot对cccDNA进行定性检测，该方法是分子生物学的经典方法，但技术要求较高，敏感度低。近年来，也有较多文献报道用PCR技术对cccDNA进行检测。但是，由于PCR技术灵敏度极高，rcDNA和cccDNA的序列又具有高度的同源性，因此在用PCR技术检测
cccDNA的检测方法
cccDNA和rcDNA在结构和理化特性上有三点不同：①rcDNA在正链与负链上均有缺口或缺刻，只是部分区域互补故能形成环状结构，但非超螺旋结构；而cccDNA两条链均是完整的，二者共价互补，形成超螺旋结构。②rcDNA能与蛋白质共价结合，cccDNA则不能。③由于缺口或缺刻的存在，rcDNA可以被
cccDNA检测方法及应用价值
细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA（relaxed circularDNA，rcDNA）分子，其两条链均不是闭合的，其中负链较长，约3200个碱基，含有乙肝病毒基因组的全长基因，在其5’起始端与3’末端之间有一个数个碱基的“缺刻”(nick)；正链较短，有较大的“缺口”(gap)，其
简述共价闭合环状DNA（cccDNA）的检测意义
乙肝病毒不仅仅是一种嗜肝病毒，一些肝外组织中也可检测到乙肝病毒DNA，如肾脏、胰腺以及外周血单个核细胞（peripheralblood mononuclearcell,PBMC）等。早就有人发现乙肝病毒可以感染白细胞,而这种免疫细胞的感染似乎有利于病毒逃避免疫反应，从而导致机体清除乙肝病毒的能力
关于共价闭合环状DNA（cccDNA）的检测方法介绍
共价闭合环状DNA（cccDNA）和rcDNA在结构和理化特性上有三点不同： ①rcDNA在正链与负链上均有缺口或缺刻，只是部分区域互补故能形成环状结构，但非超螺旋结构；而cccDNA两条链均是完整的，二者共价互补，形成超螺旋结构。 ②rcDNA能与蛋白质共价结合，cccDNA则不能。 ③
关于共价闭合环状DNA（cccDNA）的定性检测的介绍
既往绝大多数文献报道的是用Southern blot对cccDNA进行定性检测，该方法是分子生物学的经典方法，但技术要求较高，敏感度低。 近年来，也有较多文献报道用PCR技术对cccDNA进行检测。但是，由于PCR技术灵敏度极高，rcDNA和共价闭合环状DNA（cccDNA）的序列又具有高度的
cccDNA的功能和结构特点
在乙肝病毒的复制过程中，病毒DNA进入宿主细胞核，在DNA聚合酶的作用下，两条链的缺口均被补齐，形成超螺旋的共价、闭合、环状DNA分子（covalently closed circularDNA，cccDNA）。细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA（relaxed circularDN
共价闭合环状DNA（cccDNA）的检测方法及应用价值
细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA（relaxed circularDNA，rcDNA）分子，其两条链均不是闭合的，其中负链较长，约3200个碱基，含有乙肝病毒基因组的全长基因，在其5’起始端与3’末端之间有一个数个碱基的“缺刻”（nick）；正链较短，有较大的“缺口”（gap）
cccDNA：慢性乙肝持续感染的元凶
慢性乙型病毒性肝炎影响着全球超过 2.5 亿人口，每年约有 65 万人死于 HBV 相关终末期肝病。共价闭合环状（ccc）DNA 是慢性乙肝持续感染的元凶，作为病毒复制的中介，其在宿主肝细胞核内以微染色体的形式存在，目前的治疗手段难以将其彻底清除，从而达到慢性乙肝的彻底治愈。 Gut 杂志上发
武汉大学开发新方法，灵敏检测乙肝病毒cccDNA
武汉大学中南医院的研究人员近日利用微滴式数字PCR（ddPCR）技术，开发出一种新型的HBV检测方法。 201804181524017685822.png 根据世界卫生组织的最新统计，全球约有2.57亿人感染乙型肝炎病毒（HBV）。慢性HBV感染会造成肝硬化和肝细胞癌（HCC）等严重
关于共价闭合环状DNA（cccDNA）的简介
在乙肝病毒的复制过程中，病毒DNA进入宿主细胞核，在DNA聚合酶的作用下，两条链的缺口均被补齐，形成超螺旋的共价、闭合、环状DNA分子（covalently closed circularDNA，cccDNA）。细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA（relaxed circular
细胞内cccDNA的抽提与纯化
最常用的抽提细胞内cccDNA的方法是蛋白质－去污剂沉淀法，其原理是基于rcDNA和cccDNA与蛋白质结合能力的差异。rcDNA能与蛋白质共价结合，与绝大多数细胞染色体DNA一起形成沉淀，而cccDNA不能与蛋白质结合故游离于上清中，用酚氯仿抽提上清即可得到cccDNA。根据笔者的经验，该方法的主
乙肝病毒cccDNA检测可作为评价抗病毒治疗的新指标
第二军医大学长征医院缪晓辉报告，共价闭合环状DNA(cccDNA)是乙肝病毒前基因组RNA复制的原始模板，虽然其含量较少，每个肝细胞内只有约5～50个拷贝，但对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义，只有清除了细胞核内的cccDNA，才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态，是抗
关于共价闭合环状DNA（cccDNA）的展望介绍
我们对HBVcccDNA的认识有待提高。在检测技术上有许多问题需要解决，比如，如何进一步提高灵敏度，如何避免rcDNA同时被扩增（国内有些文献报告的结果可能忽视了这一问题），如何简化操作步骤，从而能够被广泛应用等。检测或监测cccDNA的临床意义也有待挖掘，比如，可以通过细胞和动物模型，来评判新
纸张及纸板定量的检测
纸张或纸板单位面积的质量称为纸张或纸板的定量， (俗称克重)，单位是g/m2。定量是构成纸张规格的基本度量，它是进行纸张各种技术指标评价的基本条件。纸张定量测定标准GB/T 451.2- -2008。定量也是表示纸张或纸板厚薄的一个比较参数，在浆料和造纸工艺一样的情况下，纸张的定量越大，纸张就越厚
核酸扩增荧光定量检测
如果怀疑有乙肝的情况，那么需要到医院进行专业的检查，比如做核酸扩增荧光定量检测之类的，当然核酸扩增荧光定量检测还可以测量其他方面的情况，比如测解脲脲原体，接下来我们来了解一下核酸扩增荧光定量检测的相关情况吧。核酸扩增荧光定量检测检查什么核酸方面的检查有核酸扩增荧光定量检测检查，那么核酸扩增荧光定量检
荧光定量PCR检测方法
所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 检测方法 1.SYBRGreenⅠ法： 在PCR反应体系中，加入过量SYBR荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，发射荧光信
实时定量PCR法对mRNA的检测、分析及定量的方法
方法：实时定量PCR目标RNA的类型：mRNA同时定量的目标RNA的数量：通常为一个，但也可检测多个目标RNA，参见Stanley和Szewczuk（2005）等的研究结果，他们在单个多重反应中同时分析过72个mRNA。用途：是检测目标RNA的一种高灵敏及高精度的方法。即使目标RNA在细胞中拷贝数极
检测限和定量限的区别
3倍信噪比是检出限，10倍信噪比是定量限，除此之外，检出限表示方法能测出该物质时的zui低浓度。定量限则表示方法能准确定量出该物质的zui低浓度。1、检测限：分析方法在规定实验条件下所能检出被测组分的zui低浓度或zui低量。2、定量限：分析方法可定量测定样品中待测组分的zui低浓度或zui低量。
检测限和定量限的区别
3倍信噪比是检出限，10倍信噪比是定量限，除此之外，检出限表示方法能测出该物质时的zui低浓度。定量限则表示方法能准确定量出该物质的zui低浓度。1、检测限：分析方法在规定实验条件下所能检出被测组分的zui低浓度或zui低量。2、定量限：分析方法可定量测定样品中待测组分的zui低浓度或zui低量。
溴酸钾的含量定量检测方法
准确称取用适当干燥剂干燥至恒重的试样约100mg，用50ml水溶于一250ml具玻塞三角瓶中。加碘化钾3g，再加3ml浓盐酸。放置5分钟后，加冷水100ml，用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定所释放的碘，将近终点时，加淀粉试液（TS-235）。同时进行空白试验。每ml 0.1ml/L硫代硫酸钠液相当于
定量限和检测限的区别
检测限是分析方法在规定实验条件下所能检出被测组分的最低浓度或最低量。定量限是分析方法可定量测定样品中待测组分的最低浓度或最低量。检测限指试样在确定的实验条件下，被测物能被检测出的最低浓度或含量，定量限指样品中被测物能被定量测定的最低量。定量限和检测限的区别检测限指由基质空白所产生的仪器背景信号的3倍
辣椒素的定量检测方法
近红外光谱是20世纪90年代以来发展最快、最引人注目的光谱分析技术。近红外光是介于可见光和中红外光之间的电磁波，波长范围是700 2500nm，一般有机物在该区的近红外光谱吸收主要是含氢基团(0-H，C-H, N-H, S-H, P-H)等的倍频和合频吸收。由于几乎所有的有机物的一些主要结构和组成都
检测限和定量限的区别
3倍信噪比是检出限，10倍信噪比是定量限，除此之外，检出限表示方法能测出该物质时的zui低浓度。定量限则表示方法能准确定量出该物质的zui低浓度。1、检测限：分析方法在规定实验条件下所能检出被测组分的zui低浓度或zui低量。2、定量限：分析方法可定量测定样品中待测组分的zui低浓度或zui低量。
检测限和定量限的区别
3倍信噪比是检出限，10倍信噪比是定量限，除此之外，检出限表示方法能测出该物质时的zui低浓度。定量限则表示方法能准确定量出该物质的zui低浓度。1、检测限：分析方法在规定实验条件下所能检出被测组分的zui低浓度或zui低量。2、定量限：分析方法可定量测定样品中待测组分的zui低浓度或zui低量。
检测限和定量限的区别
3倍信噪比是检出限，10倍信噪比是定量限，除此之外，检出限表示方法能测出该物质时的zui低浓度。定量限则表示方法能准确定量出该物质的zui低浓度。1、检测限：分析方法在规定实验条件下所能检出被测组分的zui低浓度或zui低量。2、定量限：分析方法可定量测定样品中待测组分的zui低浓度或zui低量。
检测限和定量限的区别
3倍信噪比是检出限，10倍信噪比是定量限，除此之外，检出限表示方法能测出该物质时的zui低浓度。定量限则表示方法能准确定量出该物质的zui低浓度。1、检测限：分析方法在规定实验条件下所能检出被测组分的zui低浓度或zui低量。2、定量限：分析方法可定量测定样品中待测组分的zui低浓度或zui低量。
检测限和定量限的区别
3倍信噪比是检出限，10倍信噪比是定量限，除此之外，检出限表示方法能测出该物质时的zui低浓度。定量限则表示方法能准确定量出该物质的zui低浓度。1、检测限：分析方法在规定实验条件下所能检出被测组分的zui低浓度或zui低量。2、定量限：分析方法可定量测定样品中待测组分的zui低浓度或zui低量。