真核细胞基因组的特点

(1)主要存在于细胞核内,少量存在于线粒体中。(2)为单顺反子,表现为一个结构基因经过转录后生成一个单顺反子mRNA分子,翻译成一条多肽。(3)基本上没有操纵子。(4)为断裂基因,内含子占绝大多数,不翻译成蛋白质;外显子占少数,可以翻译成蛋白质。(5)具有较高重复序列。(6)具有多基因家族基因和假基因。(7)不同个体间基因组DNA存在着相当大的差异。(8)具有重叠基因。......阅读全文

真核细胞型微生物的形状

  真核微生物是细胞核具有核膜、核仁,能进行有丝分裂,细胞质存在线粒体或同时存在叶绿体等多种细胞器的一类微生物。其广泛分布于自然界,种类很多,形态各异。

脂质体介导的真核细胞转染实验

脂质体介导短暂表达 脂质体进行稳定转染 哺乳动物细胞的选择标记             实验材料 哺乳动物细胞

脂质体介导的真核细胞转染实验

实验材料 哺乳动物细胞试剂、试剂盒 质粒DNA完全培养基氯化铯DMEM仪器、耗材 培养皿培养箱聚苯乙烯管实验步骤 1.  按5×105细胞/孔的量在六孔板中接种指数期生长的细胞,在37℃ 5%CO2培养箱中 培养过夜,直至细胞80%汇片。(如果用100 mm 培养皿代替六孔扳,则培养细胞至80%汇片

外源基因在真核细胞表达技术

生化方法l      磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞1.      转染前24 h,通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%~7% CO2的37℃温箱孵育20~24 h。转染前1 h换液。2.     

真核细胞基因组DNA的提取

实验概要高等动物,高等植物的基因组相当庞大,如人类细胞基因组由30亿个碱基对组成,果蝇基因组有1.4×108个碱基对,水稻基因组有1.4×109个碱基对。真核细胞基因组中,约1万-1.5万个可表达的结构基因,其它大量存在的是调控序列和内含子序列。可以说某特定物种的基因组,包含了该物种生长,发育,繁殖

真核细胞总RNA的提取与鉴定

【原理】RNA的制备与分析对于了解基因表达在转录水平上的调节是必不可少的,也是最常使用的通过cDNA途径分析细胞基因表达的前提。通常一个典型的哺乳动物细胞约含10-5μg RNA,但其中大部分为rRNA及由tRNA,而mRNA仅占1%~5%。虽然mRNA大小和序列各不相同,但在多数真核细胞m

真核细胞的基本结构和功能单位

  细胞是一切生命活动的基本结构和功能单位。一般认为:  1.细胞是由膜包围的原生质(protoplasm)团,通过质膜与周围环境进行物质和信息交流;  2.是构成有机体的基本单位,具有自我复制的能力,是有机体生长发育的基础;  3.是代谢与功能的基本单位,具有一套完整的代谢和调节体系;  4.是遗

外源基因在真核细胞表达技术

生化方法* 磷酸钙介导的质粒DNA转染真核细胞转染前24 h,通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以1×105至4×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60 mm组织培养皿或12孔板上。于含5%~7% CO2的37℃温箱孵育20~24 h。转染前1 h换液。2.按照下属方法制备磷酸钙-DNA沉淀:

真核细胞总RNA的提取与鉴定

【原理】RNA的制备与分析对于了解基因表达在转录水平上的调节是必不可少的,也是最常使用的通过cDNA途径分析细胞基因表达的前提。通常一个典型的哺乳动物细胞约含10-5μg RNA,但其中大部分为rRNA及由tRNA,而mRNA仅占1%~5%。虽然mRNA大小和序列各不相同,但在多数真核细胞mRNA的

真核细胞型微生物的简介

  真核细胞型微生物包括了真菌、真核藻类和原生动物。真菌的种类极多,是微生物中的一个庞大类群,据统计,真菌约有12万多种。真菌的菌体为单细胞或多细胞的分枝丝状体,或为单细胞的不分枝的个体。真菌细胞中没有光合色素,不能进行光合作用。真菌包括了单细胞的酵母菌、单细胞或多细胞的丝状霉菌以致产生子实体的蕈菇

真核细胞和原核细胞分别有哪些

  真核细胞指含有真核的细胞,被核膜包围的核。除细菌和蓝藻植物的细胞以外,所有的动物细胞以及植物细胞都属于真核细胞。原核细胞指没有核膜且不进行有丝分裂、减数分裂、无丝分裂的细胞。这类细胞主要特征是没有明显可见的细胞核,同时也没核膜和核仁,只有拟核,进化地位较低。原核细胞包括细菌、衣原体、支原体、蓝藻

真核细胞细胞核的分裂方式

按细胞核分裂的状况可分为3种:即有丝分裂、减数分裂和无丝分裂。有丝分裂是真核细胞分裂的基本形式。减数分裂是在进行有性生殖的生物中导致生殖母细胞中染色体数目减半的分裂过程。它是有丝分裂的一种变形,由相继的两次分裂组成。无丝分裂又称直接分裂。其典型过程是核仁首先伸长,在中间缢裂分开,随后核也伸长并在中部

真核细胞的减数分裂过程

减数分裂是真核细胞中一种特殊类型的细胞分裂,指通过两个细胞周期使染色体数目减少一半的细胞分裂方式。减数分裂只有出现在进行有性生殖的生物的生殖细胞中,于1883年由Beneden最先阐述。由于发生在生殖细胞成熟过程中,所以又有成熟分裂(maturation division)之称。通过减数分裂使亲代与

磷酸钙介导的真核细胞转染实验

磷酸钙法 高效转染法             实验材料 真核细胞 试剂、试剂盒

真核细胞与原核细胞的主要区别

  ①真核细胞具有由染色体、核仁、核液、双层核膜等构成的细胞核;原核细胞无核膜,故无真正的细胞核,仅有由核酸集中组成的拟核。②真核细胞的转录在细胞核中进行,蛋白质的合成在细胞质中进行,而原核细胞的转录与蛋白质的合成交联在一起进行。③真核细胞有内质网、高尔基器、溶酶体等细胞器,原核细胞没有。④真核生物

磷酸钙介导的真核细胞转染实验

实验材料 真核细胞试剂、试剂盒 CaCl2HEPES缓冲液氯化铯PBS仪器、耗材 培养箱锥形管离心管实验步骤 1.  在转染前一天将细胞分入10 cm 组织培养平板中。当被转染的细胞是贴壁细胞,倍增时间为18~24 h时,一般按1:15从长满的培养皿中分细胞效果较好,转染的当天,细胞应在培养

真核细胞蛋白质合成的相关介绍

  真核细胞蛋白质合成的起始真核细胞蛋白质合成起始复合物的形成中需要更多的起始因子参与,因此起始过程也更复杂。  ⑴需要特异的起始tRNA即,-tRNAfmet,并且不需要N端甲酰化。已发现的真核起始因子有近10种(eukaryote Initiation factor,eIF)  ⑵起始复合物形成

真核细胞起始复合物的形成过程

翻译起始也是由eIF-3结合在40S小亚基上而促进80S核糖体解离出60S大亚基开始,同时eIF-2在辅eIF-2作用下,与Met-tRNAfmet及GTP结合,再通过eIF-3及eIF-4C的作用,先结合到40S小亚基,然后再与mRNA结合。mRNA结合到40S小亚基时,除了eIF-3参加外,还需

真核细胞与原核细胞的主要区别

1.真核细胞具有由染色体、核仁、核液、双层核膜等构成的细胞核;原核细胞无核膜、核仁,故无真正的细胞核,仅有由核酸集中组成的拟核,也称核区(生物学名词)。2.真核细胞的转录大多在细胞核中进行,也可以在半自助细胞器(如叶绿体和线粒体)中进行,蛋白质的合成在细胞质中进行,而原核细胞的转录与蛋白质的合成交联

真核细胞总RNA的制备(Total-RNA-Isolation)2

Total RNA Isolation Guanidine-based isolation Objective:  To obtain total RNA from zebrafish embryos. Required Materials  Denaturing Solution

真核细胞利用DEAE葡聚糖的转染实验

用小鼠L型成纤维细胞来进行条件优比的,但只需稍做修改即可适用于几乎任何细胞。根据所研究的细胞类型进行方法优化十分关键。实验材料DNA试剂、试剂盒TBSDMEM葡聚糖DMSOPBS仪器、耗材培养箱离心管实验步骤1.  接种约5×105小鼠L型成纤维细胞/10 cm培养皿,培养3天至30%~50%汇片。

关于真核细胞细胞色素的特征分布特点

  真核细胞(动物、植物、酵母、脉孢菌)的线粒体膜和某些细菌的细胞质膜上的氧化磷酸化电子传递链中,细胞色素包括:Cyt a、Cyt a3、Cyt b、Cyt c、Cyt c1,除Cyt c外其他都是紧密结合在线粒体内膜上,Cyt c1因呈现水溶性,故与线粒体内膜结合不紧密。它们的氧化还原电位(电子亲

真核细胞利用DEAE葡聚糖的转染实验

基本方案             实验材料 DNA 试剂、试剂盒

真核细胞型微生物的致病性

  皮肤感染真菌后,在局部大量繁殖,通过机械刺激与其代谢产物的作用,引起局部炎症—深部组织,脏器感染的真菌遭吞噬细胞吞噬后,不被杀死而能在细胞内繁殖,刺激组织增生,引起组织慢性肉芽肿性炎症和组织坏死。

真核细胞利用DEAE葡聚糖的转染实验

实验材料 DNA试剂、试剂盒 TBSDMEM葡聚糖DMSOPBS仪器、耗材 培养箱离心管实验步骤 1.  接种约5×105小鼠L型成纤维细胞/10 cm培养皿,培养3天至30%~50%汇片。 2.  对每个待转染培养皿,用乙醇沉淀4 μg 待转染的质粒DNA,在组织培养橱中晾干沉淀,重悬于40 μl

真核细胞总RNA的制备(Total-RNA-Isolation)1

从细胞中分离RNA的纯度于完整性对于许多分子生物学实验至关重要。如Northern印迹与杂交分析、寡聚(dT)纤维素选择分离 mRNA,cDNA合成及体外翻译等实验的成败,在很大程度上决定于RNA的质量。RNA分离的最关键因素是尽量减少RNA酶的污染。快速一步法提取总RNA组织及有核细胞在匀浆过程中

研究揭示真核细胞自噬调控新机制

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/9/508113.shtm近日,中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员张小飞团队揭示了E3泛素连接酶MARCH7通过泛素化修饰ATG14抑制自噬,导致蛋白聚集体通过自噬途径降解受阻的机制。相关成果发表于Cel

外源基因在真核细胞中的表达系统

1. 真核生物表达的优越性和必要性① 真核生物具有转录后加工系统,可识别并删除基因中的内含子,剪切加工为成熟mRNA.②具备完善的翻译后加工系统,可进行糖基化、乙酰化等修饰,使蛋白形成正确的天然构型,因而真核生物表达系统产生的蛋白更接近天然状态,有利于其功能、生物活性的研究。③某些真核细胞可将基因表

关于真核细胞的mRNA的提取分离原理介绍

  真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或寡聚(U