概述siRNA的抗病毒治疗应用
近年来,RNAi技术在病毒感染性疾病治疗方面的应用已受到极大关注,尤其在AIDS、乙型肝炎和丙型肝炎等治疗中的应用研究最为活跃。,在siRNA抗AIDS的研究中,针对HIV结构蛋白基因及长末端重复序列(longterminal repeat,LTR)的SiRNA可以控制病毒复制;针对宿主细胞HIV受体CD4基因的siRNA可有效控制病毒进入宿主细胞,抑制病毒的感染过程。但CD4是人体正常免疫功能不可缺少的分子,它的表达抑制势必影响正常的免疫功能,由此设想针对CCR5、CCR4等共同受体设计siRNA,并正在试验中。另外在抗病毒治疗中,分别以丙型肝炎病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、脊髓灰质炎病毒等基因组的编码区或非编码区为靶点设计的siRNA均取得了令人欣喜的体外抑制作用,但利用动物实验模型验证siRNA体内清除病毒的效果需进一步研究。 虽然RNAi有望成为抗病毒治疗的有效工具,但病毒株靶基因的高度突变或碱基丢失......阅读全文
简述丙肝抗病毒治疗指南
对于丙型肝炎,只要诊断确立,个管急性还是慢性符合适应症者,应尽早给予抗病毒治疗,急性丙肝抗病毒有效率可达80%-90%,效果比乙肝好。当前治疗丙肝,国内外尚无特效药,唯有IFNα治疗有一定疗效,当前被认为治疗丙肝的首选药物。另外,IFNα加病毒唑(RBV)联合治疗,IFNα和其他各种免疫促进剂如
Rules-of-siRNA-design-for-RNA-interference-(RNAi)
General GuidelinessiRNA targeted sequence is usually 21 nt in length.Avoid regions within 50-100 bp of the start codon and the termination codonAvoid
miRNA和siRNA简介及区别
1998年,Andrew Fire和Craig Mello提出了一项新技术:通过dsRNA诱导特异基因的沉默,即所谓RNAi。2000年,Amy Pasquinelli等将lin-4和let-7作小时序RNAs(stRNAs,mall temporal RNAs)。RNA干涉(RNAi)在实验室
简述乙肝肝硬化的抗病毒治疗
1、一般适应证包括: ①HBeAg阳性者,HBV-DNA≥105拷贝/ml(相当于20000IU/ml);HBeAg阴性者,HBV-DNA≥104拷贝/ml(相当于2000U/ml); ②ALT≥2×ULN;如用IFN治疗,ALT应≤10×ULN,血清总胆红素应﹤2×ULN; ③ALT﹤2
乙肝肝硬化的抗病毒治疗简介
1、一般适应证 ①HBeAg阳性者,HBV-DNA≥105拷贝/ml(相当于20000IU/ml);HBeAg阴性者,HBV-DNA≥104拷贝/ml(相当于2000U/ml); ②ALT≥2×ULN;如用IFN治疗,ALT应≤10×ULN,血清总胆红素应﹤2×ULN;③ALT﹤2×ULN,
关于抗病毒治疗的医学讨论介绍
在HIV感染中,CD+4T淋巴细胞计数及血浆HIV-RNA水平(病毒载量)可以为临床医生提供病人病毒水平、免疫状态,是预测疾病进程的可靠指标。医师可利用结果判定病人疾病的进程和进展,以及可在接受抗病毒治疗过程中起监测与指导作用。开始治疗前对病人进行CD+4T淋巴细胞计数及HIV-RNA水平检测,
关于乙肝抗病毒治疗指南的介绍
对于HBV-DNA(+)和(或)HBeAg(+)、肝功能异常的乙型肝炎患者主张抗病毒治疗,目的是抑制HBv的活性和复制,减轻或抑制对肝细胞的损害,并不是清除病毒。需要指出,目前抗病毒治疗对乙肝病毒携带者(即肝功检查正常)无效,这类人群肝硬化及肝癌发生率极低,因而不建议抗病毒治疗、但必须定期监测肝
简述乙肝肝硬化的抗病毒治疗
1、代偿期乙型肝炎肝硬化 HBeAg阳性者的治疗指征为HBV DNA ≥104拷贝/ml,HBeAg阴性者为HBV DNA ≥103拷贝/ml,ALT正常或升高。治疗目标是延缓和降低肝功能失代偿和HCC的发生。因需要较长期治疗,最好选用耐药发生率低的核苷(酸) 类似物治疗。可选择:拉米夫定10
靶向-EGFR基因-siRNA表达载体的构建
实验材料靶向EGFR基因siRNA试剂、试剂盒pSilencer2.1-U6载体EcoR IBamH IT4 DNA连接酶鼠抗人anti-EGFRFITC标记兔抗小鼠IgGCy3标记兔抗小鼠IgG甘油多聚甲醛二甲基亚砜仪器、耗材流式细胞仪荧光显微镜二氧化碳细胞培养箱酶标仪培养板盖玻片载玻片利用Lip
siRNA表达载体制备方法的特点
多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶Ⅲ启动子(pol Ⅲ)中的一种,操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用RNA pol Ⅲ启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中表
dsRNA消化法制备siRNA的方法介绍
dsRNA消化法的主要优点在于可以跳过检测和筛选有效siRNA序列的步骤,为研究人员节省时间和金钱(注意:通常用RNAse Ⅲ通常比用Dicer要便宜)。不过这种方法的缺点也很明显,就是有可能引发非特异的基因沉默,特别是同源或者是密切相关的基因。多数的研究显示这种情况通常不会造成影响。最适用于:快速
Cell新文章聚焦神秘的内源siRNA
来自加州大学旧金山分校的研究人员发现,一种独特的RNA分子在细胞核内发挥作用,可以触发线虫快速的行为改变。 新研究发现还进一步地证明了,这种RNA在控制基因活性中的重要性,其有可能在疾病中发挥了作用,是一个潜在的治疗靶点。 认识到这类RNA的重要性,美国国立卫生研究院和其他的研究机构
【分享】siRNA转染成功的主要关键
siRNA在RNA沉寂通道中起中心作用,是对特定信使RNA(mRNA)进行降解的指导要素,细胞转染实验中经常会遇到siRNA转染,下面介绍一下siRNA转染成功的主要关键点。图片来源于网络 1.设计合成有效的siRNA RNAi的核心需要siRNA对相应mRNA进行有效的结合和作用。si
miRNA和siRNA的基本介绍及区别
1998年,Andrew Fire和Craig Mello提出了一项新技术:通过dsRNA诱导特异基因的沉默,即所谓RNAi。2000年,Amy Pasquinelli等将lin-4和let-7作小时序RNAs(stRNAs,mall temporal RNAs)。RNA干涉(RNAi)在实验室中是
关于小干扰RNA的siRNA设计介绍
最初,siRNA序列的选择是基于实验经验而获得的(Elbashir et al. 2001,2002)。最近,生物信息学工具被用来设计siRNA(表18-1),目前多个数据库收录了经过实验确证的siRNA和shRNA。值得推荐的是,在设计新的siRNA之前可以通过搜索已有的siRNA数据库和科研
siRNA实验成功的十个要点
1. 对每个基因设计并检测两到四个siRNA 序列为了找到潜在靶位点,扫描靶基因中的AA序列。记录每个AA 3’端19个核苷酸作为潜在siRNA 靶位点。潜在靶位点需通过GENBANK数据库的BLAST分析,去除那些与其它基因明显同源的靶位点。如果可能,siRNA 应根据mRNA 低二级结构
抗病毒治疗的材料方法的基本介绍
研究对象 选择52例HBV感染患者:年龄18~65岁,ELISA检测HBV-1抗体阳性并通过Westernblot结果确认的,在此之前14天内CD4计数在100/mm3~350/mm3之间,肝、肾、心、肺功能、电解质、血象、尿、淀粉酶、HCG等检验指标基本正常,继发感染被控的AIDS病人,病毒载
关于抗病毒治疗的检测方法的介绍
1、药物、剂量和用法 司他夫定(D4T),40mg,bid;拉米夫定(3TC),150mg,bid/300mg,qd;奈韦拉平(NAP), 200mg,bid;齐多夫定(AZT),300mg,bid;去羟肌苷(DDI),200mg,bid。 2、观察指标和方法 分别在用药后4周、8周、12周、
概述核酸纯化仪的应用
几乎在每个实验室,与生物分子相关的分离纯化工作都是十分重要,且必不可少的。但要对多个样品进行纯化还是相当困难的,不仅需要选择合适的纯化技术,而且工作量也特别大,很难满足当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取纯化系统是使用磁珠法技术,可同时操作1-32个样
拍击筛的概述和应用
拍击筛概述: 拍击筛(拍击式标准振筛机)又称拍击式振动筛是实验室的常用检测仪器之一结构主要由机座、筛具与传动机构等部分组成。拍击筛(拍击式标准振筛机)可配备专用夹具,即可装夹ф200标准筛,又可夹装ф75、ф100套筛,装夹方便灵活,夹紧牢固,并能自动停机 拍击筛主要应用行业: 拍击筛(拍
概述显性标记的应用范围
所以,共显性标记,在揭示遗传多样性方面要比显性标记具有更大的优势。更为重要的是,SSR引物是以外显子保守序列为引物结合点,即以已知DNA序列为基础所开发的引物,在基因组上具有特定的位置,所以在QTL等分析上,应用极为广泛。 共显性:说白了就是可以分辨出纯和的跟杂合的
概述拉米夫定的应用
拉米夫定作为抗病毒药,用于乙型肝炎病毒感染所致肝胆疾病的治疗。国内外随机对照临床试验表明,每日口服100 mg 可明显抑制HBV DNA 水平, HBeAg 血清学转换率随治疗时间延长而提高,对HbeAg阳性患者治疗1、2、3、4 和5 年后HBeAg血清转换率分别为22% 、29% 、40%、
膜分离技术的应用概述
膜技术是一项新型的高新分离技术.自上世纪五十年代以来,微滤膜、离子交换膜、反渗透膜、超滤膜、气体膜分离等相继得到广泛应用.成为世界各国研究的热点.已被国际公认为本世纪最有发展前途的重大高新生产技术之一,有操作方便、设备紧凑、工作环境安全、节约能源和化学试剂等优点,目前已被广泛应用于食品、医药、
概述变频器的应用
变频器主要用于交流电动机(异步电机或同步电机)转速的调节,是公认的交流电动机最理想、最有前途的调速方案,除了具有卓越的调速性能之外,变频器还有显著的节能作用,是企业技术改造和产品更新换代的理想调速装置。自上世纪80年代被引进中国以来,变频器作为节能应用与速度工艺控制中越来越重要的自动化设备,得到
概述卫星DNA的标记应用
卫星标记应用遗传多样性的分析与评估,生物个体表现出的各种遗传变异,在本质上就是DNA的差异,因此通过研究DNA的变异来分析群体的遗传结构及遗传多样性则更为直接,Arranz等(1996)对牛的卫星DNA和蛋白质标记的比较研究发现卫星标记比蛋白质标记具有更加丰富的多态性,且其两者所得到的系统发生树
关于血型遗传的应用概述
输血和移植配型 在临床输血中如果受血者血液含有针对供血者红细胞抗原的抗体,常导致严重的溶血性输血反应。输入的血液如含有针对受血者红细胞抗原的抗体则并无妨碍。这是因为输入的抗体立即被受血者的血液稀释,并为组织细胞所吸收的缘故。因此输血配型的原则是输入的红细胞不能具有受血者所缺的抗原。 临床器官
概述手持折射仪的应用
手持折射仪又叫手持折光仪是能测定透明、半透明液体或固体的折射率nD和平均色散nF-nC的仪器(其中以测透明液体为主)。折射率和平均色散是物质的重要光学常数之一,能借以了解物质的光学性能、纯度、浓度及色散大小等。仪器并能测出蔗糖溶液内含糖量浓度百分数。此种仪器使用范围甚广,是石油工业、油脂工业、制
概述草酸的广泛应用
络合剂、掩蔽剂、沉淀剂、还原剂。分析中用以检定和测定铍、钙、铬、金、锰、锶、钍等金属离子。显微微晶分析检验钠和其他元素。沉淀钙、镁、钍和稀土元素。校准高锰酸钾和硫酸铈溶液的标准溶液。漂白剂。助染剂。也可用来除去衣服上的铁锈建筑行业在涂刷外墙涂料前、由于墙面碱性较强应先涂刷草酸除碱。 医药工业用
概述抗原抗体反应的应用
(1)抗原:免疫动物是制备抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、细菌或者其他蛋白质抗原,如果使用半抗原如小分子激素等,必须与大分子载体连接。抗原的用量视抗原种类及动物而异,—次注射小鼠可以少至几个微克,免、羊甚至更大的动物每次注射的量就相应增加,从几百μg/次至几mg/次。 〔2)佐剂及乳化
概述壳聚糖的应用方向
壳聚糖被发现已经有100多年,也有许多人在对它进行研究,广泛应用于农业、食品、医疗、工业。 甲壳素及其衍生物的用途大量研究表明,甲壳质及其衍生物具有成膜性、可纺性、抗凝血性,促进伤口愈合等功能。因此,甲壳质及其衍生物在食品、生化、医药、日用化妆品及污水处理等众多领域得到广泛的应用。