概述siRNA的抗病毒治疗应用

近年来,RNAi技术在病毒感染性疾病治疗方面的应用已受到极大关注,尤其在AIDS、乙型肝炎和丙型肝炎等治疗中的应用研究最为活跃。,在siRNA抗AIDS的研究中,针对HIV结构蛋白基因及长末端重复序列(longterminal repeat,LTR)的SiRNA可以控制病毒复制;针对宿主细胞HIV受体CD4基因的siRNA可有效控制病毒进入宿主细胞,抑制病毒的感染过程。但CD4是人体正常免疫功能不可缺少的分子,它的表达抑制势必影响正常的免疫功能,由此设想针对CCR5、CCR4等共同受体设计siRNA,并正在试验中。另外在抗病毒治疗中,分别以丙型肝炎病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、脊髓灰质炎病毒等基因组的编码区或非编码区为靶点设计的siRNA均取得了令人欣喜的体外抑制作用,但利用动物实验模型验证siRNA体内清除病毒的效果需进一步研究。 虽然RNAi有望成为抗病毒治疗的有效工具,但病毒株靶基因的高度突变或碱基丢失......阅读全文

RNA干扰对病毒性疾病的治疗

  加州大学洛杉矶分校和加州理工学院的研究人员开发出使用RNAi技术来阻止艾滋病病毒进入人体细胞。这个研究小组设计合成的lenti病毒载体引入siRNA,激发RNAi使其抑制了HⅣ-1的coreceptor-CCR5进入人体外周T淋巴细胞,而不影响另一种HⅣ-1主要的coreceptor-CCR4,

使用RNAi技术治疗病毒性疾病

加州大学洛杉矶分校和加州理工学院的研究人员开发出使用RNAi技术来阻止艾滋病病毒进入人体细胞。这个研究小组设计合成的lenti病毒载体引入siRNA,激发RNAi使其抑制了HⅣ-1的coreceptor-CCR5进入人体外周T淋巴细胞,而不影响另一种HⅣ-1主要的coreceptor-CCR4,从而

RNA干扰治疗病毒性疾病的方法

加州大学洛杉矶分校和加州理工学院的研究人员开发出使用RNAi技术来阻止艾滋病病毒进入人体细胞。这个研究小组设计合成的lenti病毒载体引入siRNA,激发RNAi使其抑制了HⅣ-1的coreceptor-CCR5进入人体外周T淋巴细胞,而不影响另一种HⅣ-1主要的coreceptor-CCR4,从而

RNA干扰用于病毒性疾病的治疗

加州大学洛杉矶分校和加州理工学院的研究人员开发出使用RNAi技术来阻止艾滋病病毒进入人体细胞。这个研究小组设计合成的lenti病毒载体引入siRNA,激发RNAi使其抑制了HⅣ-1的coreceptor-CCR5进入人体外周T淋巴细胞,而不影响另一种HⅣ-1主要的coreceptor-CCR4,从而

siRNA表达载体的技术特点

多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶Ⅲ启动子(pol Ⅲ)中的一种,操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用RNA pol Ⅲ启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中表

关于siRNA表达框架的介绍

  siRNA表达框架(siRNA expression cassettes,SECs)是一种由PCR得到的siRNA表达模版,包括一个RNA pol Ⅲ启动子,一段发夹结构siRNA,一个RNA pol Ⅲ终止位点,能够直接导入细胞进行表达而无需事前克隆到载体中。和siRNA表达载体不同的是,SE

Small-interfering-RNA(siRNA)的概念

Small interfering RNA(siRNA):是一种小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成。SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默。

siRNA表达框架的技术特点

siRNA表达框架(siRNA expression cassettes,SECs)是一种由PCR得到的siRNA表达模版,包括一个RNA pol Ⅲ启动子,一段发夹结构siRNA,一个RNA pol Ⅲ终止位点,能够直接导入细胞进行表达而无需事前克隆到载体中。和siRNA表达载体不同的是,SECs

关于siRNA机制的基本介绍

  1.长dsRNA(可来自发夹,互补RNA和RNA依赖性RNA聚合酶)被称为Dicer的内切核糖核酸酶切割。Dicer切割长dsRNA以形成短干扰RNA或siRNA;这使得分子能够形成RNA诱导的沉默复合物(RISC)。   2.一旦siRNA进入细胞,它就会被整合到其他蛋白质中以形成RISC。

开发肽siRNA偶联物,向肝外组织定向递送siRNA疗法!

  此次合作,将超越肝脏范畴,为多种肝外疾病开启siRNA治疗机会。  行业领先的RNAi治疗公司Alnylam与行业领先的肽基药物发现公司PeptiDream近日宣布了一项许可及合作协议,发现和开发肽-siRNA偶联药物,创造多种机会,为肝外组织递送RNAi疗法。通过这一合作,2家公司将合作选择和

丙肝抗病毒治疗指南

  对于丙型肝炎,只要诊断确立,个管急性还是慢性符合适应症者,应尽早给予抗病毒治疗,急性丙肝抗病毒有效率可达80%-90%,效果比乙肝好。当前治疗丙肝,国内外尚无特效药,唯有IFNα治疗有一定疗效,当前被认为治疗丙肝的首选药物。另外,IFNα加病毒唑(RBV)联合治疗,IFNα和其他各种免疫促进剂如

乙肝抗病毒治疗指南

  对于HBV-DNA(+)和(或)HBeAg(+)、肝功能异常的乙型肝炎患者主张抗病毒治疗,目的是抑制HBv的活性和复制,减轻或抑制对肝细胞的损害,并不是清除病毒。需要指出,目前抗病毒治疗对乙肝病毒携带者(即肝功检查正常)无效,这类人群肝硬化及肝癌发生率极低,因而不建议抗病毒治疗、但必须定期监测肝

Transfection-of-siRNA-oligos-to-peritoneal-macrophages

Use DeliverX Transfection from PanomicsModified protocol belowStep 1:  Make complexesNote:  Do not scale up more than 3xThaw siRNA and DeliverX reagen

RNAi片段siRNA设计原则

RNAi target selection rules:Targeted regions on the cDNA sequence of a targeted gene should be located 50-100 nt downstream of the start codon (ATG).S

乙肝肝硬化的抗病毒治疗

  包括:①HBeAg阳性者,HBV-DNA≥105拷贝/ml(相当于20000IU/ml);HBeAg阴性者,HBV-DNA≥104拷贝/ml(相当于2000U/ml);②ALT≥2×ULN;如用IFN治疗,ALT应≤10×ULN,血清总胆红素应﹤2×ULN;③ALT﹤2×ULN,但肝组织学显示K

抗病毒治疗的禁忌症

  (1)干扰素绝对禁忌证 ①妊娠;②精神病史如严重抑郁症;③未能控制的癫痫,④未戒断的酗酒或吸毒者;⑤未经控制的自身免疫性疾病。⑥失代偿期肝硬化;⑦有症状的心脏病;⑧治疗前粒细胞

siRNA表达框架制备方法的特点

siRNA表达框架(siRNA expression cassettes,SECs)是一种由PCR得到的siRNA表达模版,包括一个RNA pol Ⅲ启动子,一段发夹结构siRNA,一个RNA pol Ⅲ终止位点,能够直接导入细胞进行表达而无需事前克隆到载体中。和siRNA表达载体不同的是,SECs

化学合成siRNA的技术特点

主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了,比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于:已经找到最有效的siRNA的情况下,需要大量siRNA进行研究。不适用于:筛选siRNA等长时间的研究

化学合成siRNA的方法特点

许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了,比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于:已经找到最有效的siRNA的情况下,需要

概述蔗糖的应用介绍

  蔗糖是一种双糖,它是由1个分子的葡萄糖和1个分子的果糖组成的。蔗糖是从糖料作物甜菜或甘蔗中提取出来的。因此,蔗糖是天然食品,是大自然赐予人类的恩惠。几百年来,蔗糖对人类的营养和健康起了重要的作用。人类享受着蔗糖的甜美及利用蔗糖为添加剂生产出来的食品,还应用着以蔗糖为原料生产出的成百上千种的生活物

概述DNA解旋酶的应用

  核酸等温扩增技术及其应用:一直以来,病原微生物的体外培养是病原体诊断的“金标准”。据微生物学家的估计,采用培养技术,仅有约1%的细菌可以培养。在过去的一个世纪里,以聚合酶链反应(PCR)为代表的基于核酸的检测技术发展迅速,为其他病原体的精确检测诊断提供了可能。毋庸置疑,Kary Mtlllis发

概述细胞免疫的应用

  器官移植在同卵双胞胎之间进行较易成功,这是因为两者的基因组是一样的,细胞表面的MHC分子也是一样的,2个个体都不排斥对方的器官。  激素、放射线照射、药物(6-巯基嘌呤)等可以抑制受体的免疫功能,增加移植手术的成功率。但它同时增加了感染疾病的可能性。虽然环孢素(cyclosporin)选择性抑制

概述水蛭素的应用

  水蛭素是一类很有前途的抗凝化瘀药物,它可用于治疗各种血栓疾病,尤其是静脉血栓和弥漫性血管凝血的治疗;也可用于外科手术后预防动脉血栓的形成,预防溶解血栓后或血管再造后血栓的形成;改善体外血液循环和血液透析过程。在显微外科手术中常因为吻合处血管栓塞而导致失败,采用水蛭素可促进伤口愈合。研究还表明,水

概述果糖的食品应用

  果糖产品在食品领域起初是作为蔗糖的替代性产品出现的。由于果糖产品具有蔗糖不可比拟的性能优势,果糖产品在食品加工中的很多领域,逐渐完全或部分取代蔗糖。这种取代的目的不仅仅是解决甜度问题,更主要是改善制品性能、增进风味口感、提高产品档次。经过实践证明,在果酒、药酒、汽酒、药用糖浆、果汁饮料、果酱、水

概述显微注射的应用

  微注射应用的范围非常广泛,从辅助(体外)细胞受精技术至分子和细胞基本组分的转运都需使用这一技术,比较典型的是将某些物质注射进细胞中以操作和/或监测某种特定的存活细胞中的基本机体生物化学状态。这些可以注射进细胞的物质包括有:各种细胞器、激酶、组织化学标志物(比如辣根过氧化物酶或者荧光黄)、蛋白质、

概述适配体的应用

  1990 年,Tuerk与Ellingtong基于 SELEX 技术率先分别筛选获得了噬菌体T4DNA聚合酶与有机染料的特异性RNA适配体。自此以来,适配体已经被广泛应用于细胞成像、新药研发、疾病治疗与微生物检测等众多方面。  细胞成像:荧光标记适配体或适配体复合物是适配体应用于细胞成像的基础。

概述脑电图的临床应用

  1.癫痫  由于癫痫在发作时脑电图可以准确地记录出散在性慢波、棘波或不规则棘波,因此对于诊断癫痫,脑电图检查十分准确,且脑电图对抗癫痫药的停药具有指导作用。  2.精神性疾病  为了确诊精神分裂症、躁狂抑郁症、精神异常等,可做脑电图检查,排除包括癫痫在内的脑部其他疾患。  3.其他疾病  脑电图

概述异烟肼药物的应用

  口服吸收快而完全,1~2h血药浓度达峰值,广泛分布于全身体液和组织,包括脑脊液和胸水中。穿透力强,可渗入关节腔,胸、腹水以及纤维化或干酪化的结核病灶中,也易透入细胞内作用于已被吞噬的结核杆菌。异烟肼主要在肝内代谢,由乙酰化酶乙酰化为乙酰异烟肼和异烟酸等,最后与少量原形药一同从肾排出。由于乙酰化酶

概述凝胶层析的应用

  ⑴脱盐:高分子(如蛋白质、核酸、多糖等)溶液中的低分子量杂质,可以用凝胶层析法除去,这一操作称为脱盐。本法脱盐操作简便、快速、蛋白质和酶类等在脱盐过程中不易变性。适用的凝胶为SephadexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6.柱长与直径之比为5-15,样品体积可达柱床体积的25

简述丙肝抗病毒治疗指南

  对于丙型肝炎,只要诊断确立,个管急性还是慢性符合适应症者,应尽早给予抗病毒治疗,急性丙肝抗病毒有效率可达80%-90%,效果比乙肝好。当前治疗丙肝,国内外尚无特效药,唯有IFNα治疗有一定疗效,当前被认为治疗丙肝的首选药物。另外,IFNα加病毒唑(RBV)联合治疗,IFNα和其他各种免疫促进剂如