MOI值怎么测定

R&A对MOI值的限制规定是:垂直MOI: 13.1盎司·平方英寸/2400克·平方厘米水平MOI: 21.9盎司·平方英寸/4000克·平方厘米倾斜MOI: 23.3盎司·平方英寸/4250克·平方厘米举例说明:如果一支球杆的MOI是3000g·cm2,另一支是2000g·cm2,那么3000g·cm2的这一支不管在距离、方向或弹道上,都拥有较大的误差容许度。滴度是稀释度的倒数。例如:稀释度是溶液被冲淡的程度。例如,1 m l 血清加1 7 9 m l 的生理盐水, 则稀释度为1 8 0。上例中的180 的稀释度,其滴度就是1:180 。效价是滴度的同义词。效价即滴度,两者通用。......阅读全文

如何选择病毒细胞培养的病毒?

  病毒会感染几乎每一种生物机体,无论是人、老鼠、跳蚤还是细菌,都逃脱不了病毒的攻击。但是这些寄生生物无法独立生活:它们需要进入宿主细胞内部,这也就是为什么病毒学家也需要培养细胞,不过要想掌握这种细胞培养技术,就必须对病毒和宿主细胞都有所了解。  因为这个过程并不是简单的把病毒和细胞都放到培养皿中就

慢病毒载体相关知识问答大总结

慢病毒包装技术专题Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒载体 (Lenti vector)是用于感染细胞以实现稳定导入基因或siRNA的病毒载体系统,其感染效率可以达到100%。慢病毒和细胞结合后通过包装蛋白将含有目的基因或者干扰序列释放到细胞内。慢病毒RNA通过逆转录酶转录为DNA。DNA整合前复合

THP1细胞体外培养时健康的标准或主要特点

通常通过提高MOI值来提高病毒的转染效率,必要时可以在培养基中加入polybrene(5-10 μg/ml)来提高病毒的感染效率。同时,目的细胞良好的生长状态是获得正常感染效率的保证。

判断THP1细胞体外培养时健康的标准

通常通过提高MOI值来提高病毒的转染效率,必要时可以在培养基中加入polybrene(5-10 μg/ml)来提高病毒的感染效率。同时,目的细胞良好的生长状态是获得正常感染效率的保证。

判断THP1细胞体外培养时健康的标准或主要特点

通常通过提高MOI值来提高病毒的转染效率,必要时可以在培养基中加入polybrene(5-10 μg/ml)来提高病毒的感染效率。同时,目的细胞良好的生长状态是获得正常感染效率的保证。

判断THP1细胞体外培养时健康的标准或主要特点

通常通过提高MOI值来提高病毒的转染效率,必要时可以在培养基中加入polybrene(5-10 μg/ml)来提高病毒的感染效率。同时,目的细胞良好的生长状态是获得正常感染效率的保证。

腺病毒体外在293细胞中大量扩增的方法

在293 细胞中大量扩增腺病毒一旦重组病毒已被纯化和鉴定,即可在293 细胞中进行大量扩增。本手册提供了递增培养规模和腺病毒感染周期的基本方法,按这一方法最终得到的病毒量约为3×1011~3×1012。由于一个细胞中所含的病毒颗粒为1000~10000,因此1L 培养细胞可得到约5×1012 病毒颗

离心机用于腺病毒体外在293细胞中大量扩增

一旦重组病毒已被纯化和鉴定,即可在293 细胞中进行大量扩增。本手册提供了递增培养规模和腺病毒感染周期的基本方法,按这一方法zui终得到的病毒量约为3×1011~3×1012。由于一个细胞中所含的病毒颗粒为1000~10000,因此1L 培养细胞可得到约5×1012 病毒颗粒。如果要把病毒用氯化铯梯

慢病毒使用操作手册

一、慢病毒的储存与稀释:1. 病毒的储存:收到病毒液后在很短时间内即使用慢病毒进行实验,可以将病毒暂时放置于4 ℃保存;如需长期保存请放置于-80℃(病毒置于冻存管,并使用封口膜封口)① 病毒可以存放于-80℃ 6个月以上;但如果病毒储存时间超过6个月,建议在使用前需要重新滴定病毒滴度。② 反复冻融

杆状病毒储液制备实验——从单层培养中制备

实验材料单层培养的 Sf 9 细胞待接种的杆状病毒(野生型的或重组)试剂、试剂盒含10%胎牛血清的昆虫细胞培养液 TNM-FH仪器、耗材150 mm 培养瓶27℃ 培养箱倒置显微镜带有 GH-3.7 水平转子的4℃GPR离心机带螺口盖的冻存管液氮罐500 ml 旋转细胞培养瓶多转瓶的揽拌台实验步骤1

肌酐的参考范围

  血肌酐:正常人的血清肌酐  男54-106μmoI/L  女44-97μmol/L  小儿24.9-69.7μmol/L  尿肌酐 :主要来自血液经过肾小球过滤后随尿液排出的肌酐。  【参考值】8.4-13.25mmol/24小时尿或40mg/dl到130mg/dl是正常的。[1]

病毒包装技术2——慢病毒生产及使用操作手册

  锐赛小课堂0625-107   一、实验流程   制备慢病毒表达质粒及其辅助载体,四个质粒共转染293T细胞,转染后6h更换为完全培养基,培养48和72h后,分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,病毒上清液通过超离心浓缩病毒。   二、实验材料   慢病毒载体包装系统为四质粒系统, 组成为

病毒包装技术——慢病毒生产及使用操作手册

一、实验流程制备慢病毒表达质粒及其辅助载体,四个质粒共转染293T细胞,转染后6h更换为完全培养基,培养48和72h后,分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,病毒上清液通过超离心浓缩病毒。二、实验材料慢病毒载体包装系统为四质粒系统, 组成为Gag/pol、vsvg、rev及pLenti-X-EGFP表

知识分享:维真稳转株构建流程

  稳转株即稳定表达细胞株,指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法,具有高效整合、目标细胞广泛等特点。  一.准备及预实验  确定细胞系相关信息,需包括如下内容  目标细胞系培养条件  目标细胞增殖速度  支原体污染情况  

维真稳转株构建流程

  稳转株即稳定表达细胞株,指的是基于某一细胞系构建的持续过表达或干扰某特定基因的细胞系。慢病毒感染-药物筛选法是目前广泛应用的稳转株构建方法,具有高效整合、目标细胞广泛等特点。  一.准备及预实验  确定细胞系相关信息,需包括如下内容  目标细胞系培养条件  目标细胞增殖速度  支原体污染情况  

稳转株的制备

实验原理:利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种:瞬时转染和稳转株筛选。通过稳定细胞系构建筛选稳定表达细胞株。针对瞬时转染,外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量较少,能够满足小量蛋白制备,大量生产成本很高。相对于此,稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上,随着细胞的生长分裂外源基因可以稳定转染

自噬双标腺相关病毒说明(二)

(Tom Egil Hansen and Terje Johansen,BMC Biology,2011) 图4 Vigene自噬双标病毒载体图谱五.Vigene mCherry-GFP-LC3B 自噬双标操作方法(一)体外实验以2型AAV病毒为例,Vigene为您推荐的MOI值104-105,是根

M13噬菌体衍生载体的制备实验

实验材料 质粒试剂、试剂盒 YT培养基仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1.  将来自一个单菌落的过夜培荞新鲜菌液按1 :50稀释,在含有适当抗生素的2×YT培养液(1~5 ml)中,于37℃培养至OD600=0.1。2.  按1,10,20,50 MOI感染细胞,于37℃剧烈振荡下培养4.

M13噬菌体衍生载体的制备实验

载体衍生法             实验材料 质粒 试剂、试剂盒

知识分享:稳转株的制备

  实验原理:   利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种:瞬时转染和稳转株筛选。通过稳定细胞系构建筛选稳定表达细胞株。针对瞬时转染,外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量较少,能够满足小量蛋白制备,大量生产成本很高。相对于此,稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上,随着细胞的生长分裂外源基因

慢病毒感染目的细胞实验步骤

1. 感染预实验以 24 孔培养板为例,同时进行目的细胞和工具细胞的感染预实验。工具细胞可选择 293T(人胚肾上皮细胞)、H1299(人肺癌细胞)或其它细胞。实验材料:培养基、24 孔培养板,移液枪,枪头, EP 管,细胞计数板、冰盒、废液缸等。(根据目的细胞情况,可酌情使用 Polybrene)

关于大肠杆菌重组蛋白表达系统解答

大肠杆菌(E.coli)重组蛋白表达技术经过多年的发展,相对于其他表达体系,算是非常成熟的一个体系。大肠杆菌蛋白表达系统主要有以下特点:遗传背景清楚;易于培养和控制;转化操作简单;表达水平高;成本低;周期短。本篇将对大肠杆菌重组蛋白表达系统的常见技术问题进行一一解答。1:大肠杆菌表达体系的优点是什么

蛋白质生产高峰期的确定实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 胎牛血清仪器、耗材 培养瓶离心机实验步骤 1.  分别接种3×106 Sf9细胞于15个盛有5 ml 含10%胎牛血清的完全培养液60 mm血组织培养皿中。27℃溫育2 h,使细胞贴壁,然后每次均以感染复数(MOI)为10的量,用野生型病毒感染7个培养皿,用重组

蛋白质生产高峰期的确定实验

基本方案             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

盖尔定律的应用领域

有些反应的反应热通过实验测定有困难(有些反应进行得很慢,有些反应不容易直接发生,有些反应的产品不纯、有副反应发生),可以用盖斯定律间接计算出来。例题 求反应C(s)+ 1/2 O 2 (g)→CO(g)的反应热ΔH解:已知 (I) C(s)+ O 2 (g)==CO2(g) ΔHΘm = - 393

对几种盆栽樱桃植株光合代谢差异的研究

盆栽果树受容器限制,根系的分布及其所处的土壤条件与田问植株有很大的差异。大部分盆栽果树栽植当年部分植株可分化花芽,翌年即可开花结果,而田问植株 一般需2-3年才能形成花芽,表明盆栽更有利于植株向生殖发育方向转变。但不同栽植方式下植株的光合代谢是否有差异,这些差异对环境的响应是否相同,尚缺 乏深入研究

腺病毒系统使用指南(三)

腺相关病毒感染目的细胞预实验以2型AAV病毒为例,维真生物为您推荐的MOI值10000:1-100000:1,是根HEK293T细胞得出的数据,不同的细胞所使用的病毒MOI值会有所不同。建议您感染目的细胞前,进行预实验摸索最佳MOI值,推荐使用有荧光的对照病毒来摸索条件。1. 为了节省病毒,推荐使用

蛋白质生产高峰期的确定实验

蛋白质(protein)是生命的物质基础,没有蛋白质就没有生命。因此,它是与生命及与各种形式的生命活动紧密联系在一起的物质。实验材料蛋白质试剂、试剂盒胎牛血清仪器、耗材培养瓶离心机实验步骤1.  分别接种3×106 Sf9细胞于15个盛有5 ml 含10%胎牛血清的完全培养液60 mm血组织培养皿中

扫频激光器干什么用

扫描激光源主要是通过产生光源,在遇到光纤光栅时,可以反射特定波段的光谱,解调仪根据反射光谱的变化来判断作用于光纤光栅上的外部量的变化。光纤光栅也是其光纤光栅感器的核心。目前光纤光栅解调仪的原理据我了解的至少有以下三种:宽带光源、扫描激光器、可调激光器。国内的品牌产品大多是宽带光源。这个简单说就是一下

慢病毒转染悬浮细胞效率低怎么办?

悬浮细胞是一类生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长的细胞。与贴壁细胞相比,悬浮细胞难培养,易死亡,且不易转染。对于这类难感染的细胞通常我们会优先选择病毒载体,而慢病毒载体具有可感染分裂与非分裂期细胞,表达时间长等优点,并已作为细胞治疗的理想载体得到广泛应用。然而,慢病毒感染悬浮细胞仍然会存