怎么bca法测蛋白浓度标准曲线都不一样

标准曲线就是每次不一样,因为每一次的反应条件,枪的准确度都不一样。所以才要求每次进行测定的时候,需要同时进行标准曲线的测定,这样每次蛋白样品的浓度只能根据平行的标准曲线给出来的公式去计算。基本上只要能保证R2值大于98%,标准曲线就能用于计算蛋白的含量。......阅读全文

蛋白浓度测定方法

  微量凯氏定氮法:由于蛋白质中存在着含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,因此蛋白质溶液在280nm处具有紫外吸收高峰。在一定浓度范围内,蛋白质溶液在此波长处的吸光度与其浓度呈正比关系,因此利用这一性质可进行蛋白质定量测定。微量凯氏定氮法迅速、简便、不消耗样品、低浓度盐类不干扰测定,可测定0.1~1.0m

Bradford法测蛋白浓度

原理:这一方法基于考马斯亮蓝G-250有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下,可配成淡红色的溶液,当与蛋白质结合后,产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在465-595nm处有最大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的

Bradford法测蛋白浓度

原理:这一方法基于考马斯亮蓝G-250有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下,可配成淡红色的溶液,当与蛋白质结合后,产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在465-595nm处有最大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的

蛋白质浓度分析实验

BRADFORD分析(BIORAD) BCA分析(PIERCE) 三氯乙醇沉淀             实验材料 标准蛋白质

酶标仪测蛋白浓度怎么计算

先制备标准曲线,根据标准曲线计算浓度。要看你用的是哪种酶标仪,不同的酶标仪的使用方法不同,但原理都是紫外可见分光光度仪。在特定波长下,测定化合物的吸光度与浓度成线性关系。

酶标仪测蛋白浓度怎么计算

先制备标准曲线,根据标准曲线计算浓度。要看你用的是哪种酶标仪,不同的酶标仪的使用方法不同,但原理都是紫外可见分光光度仪。在特定波长下,测定化合物的吸光度与浓度成线性关系。

怎么用NanoDrop检测蛋白浓度

nano测的不太准的,建议你还是用2100测一下,每种测序仪都有一个上机浓度要求,只要可以达到这个要求就能进行高通量测序了。

蛋白质浓度分析实验

BRADFORD分析(BIORAD)BCA分析(PIERCE)三氯乙醇沉淀实验材料标准蛋白质                                                          试剂、试剂盒BSA                                    

蛋白质浓度计算

1ml蛋白质,你稀释到了100ml, 说明现在里面有1%的蛋白质。然后取0.6毫升,对考马斯和蒸馏水,里面现在有(0.6/6.0)×0.01毫升的蛋白质。测完光,对完标准曲线后,得到的12.777ug/ml 是0.001毫升的蛋白质的浓度哦。所以, 总的蛋白质浓度,也就是一开始的那1毫升里的蛋白质浓

怎么用NanoDrop检测蛋白浓度

nano测的不太准的,建议你还是用2100测一下,每种测序仪都有一个上机浓度要求,只要可以达到这个要求就能进行高通量测序了。

蛋白浓度测定及常用方法

蛋白质溶液浓度测定方法有多种,下述几种方法可供选用。蛋白质浓度的测定,往往用于计算纯化方法的回收率的重要方法。一、蛋白浓度的直接测定(UV法)这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg 公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测

蛋白质浓度计算

1ml蛋白质,你稀释到了100ml, 说明现在里面有1%的蛋白质。然后取0.6毫升,对考马斯和蒸馏水,里面现在有(0.6/6.0)×0.01毫升的蛋白质。测完光,对完标准曲线后,得到的12.777ug/ml 是0.001毫升的蛋白质的浓度哦。所以, 总的蛋白质浓度,也就是一开始的那1毫升里的蛋白质浓

酶标仪测蛋白浓度怎么计算

  先制备标准曲线,用公式算出曲线的斜率(r)和截距(b),根据标准曲线计算浓度c=r*a+bc,其中a表示吸光率。  要看你用的是哪种酶标仪,不同的酶标仪的使用方法不同,但原理都是紫外可见分光光度仪。在特定波长下,测定化合物的吸光度与浓度成线性关系。

BCA法测定蛋白质浓度

【目的】掌握BCA法测定蛋白质浓度的原理。【原理】BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他 试剂组成的 试剂 ,混合一起即成为苹果绿,即BCA工作试剂。在碱性条件下,BCA与蛋白质结合时,蛋白质将Cu2+ 还原为Cu+ ,一个Cu+ 螯合二个BCA分子,工作试剂由原

BCA蛋白浓度检测的实验操作

绘制标准曲线:取96孔酶标板,按下表加入试剂。管号12345678标准蛋白溶液(μl)蒸馏水(μl)BCA试剂(μl)蛋白质浓度(mg/ml)02020001192000.0252182000.054162000.18122000.21282000.31642000.42002000.5上述试剂加完

bca法测蛋白浓度稀释倍数

1、根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。2、完全溶解蛋白标准品,取10微升稀释至100微升 ,使终浓度为0.5mg/ml。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%

BCA蛋白浓度检测的实验操作

绘制标准曲线:取96孔酶标板,按下表加入试剂。 管号 1 2 3 4 5 6 7 8 标准蛋白溶液(μl)蒸馏水(μl)BCA试剂(μl)蛋白质浓度(mg/ml) 0202000 1192000.025 2182000.05 4162000.1 8122000.2 1282000.3 1642000

BCA蛋白浓度检测的实验试剂

Bicinchoninic acid (BCA )法是在世界上常用的蛋白浓度检验方法之一BCA法基础上改进而成。其原理与Lowery法蛋白定量相似,即在碱性环境下蛋白质与Cu 2+ 络合并将Cu 2+ 还原成Cu + 。两分子BCA与一个Cu + 螯合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nm处有高的光

bca法测蛋白浓度稀释倍数

1、根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。BCA工作液室温24小时内稳定。2、完全溶解蛋白标准品,取10微升稀释至100微升 ,使终浓度为0.5mg/ml。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9%

BCA蛋白浓度检测的实验操作

绘制标准曲线:取96孔酶标板,按下表加入试剂。管号12345678标准蛋白溶液(μl)蒸馏水(μl)BCA试剂(μl)蛋白质浓度(mg/ml)02020001192000.0252182000.054162000.18122000.21282000.31642000.42002000.5上述试剂加完

蛋白质溶液浓度怎么算

你想:最开始的浓度假设是xug/mL那么取了1ml蛋白质溶液,稀释到了100ml,则浓度为x/100 ug/mL再取0.6mL,加入0.4ml蒸馏水和5ml考马斯后,浓度为x/100 *0.6/6故x/100 *0.6/6 =12.777那么x=12.777*100*6/0.6ug/mL

western-blot中蛋白样品浓度怎样稀释

计算出样品及buffer的体积,加水补足到25ul

为什么提取细胞蛋白浓度总是很低

细胞总蛋白提取量少原因很多比如可能是该细胞状态不好,造成表达量偏低,提取后蛋白总量就会少蛋白与蛋白间性质差异大,因为所需的细胞提取液不一样,会造成一些蛋白不能溶解于提取液中而和细胞碎片一起沉淀掉不同的提取方法不一样,可能造成部分蛋白沉淀,影响到提取总量蛋白质溶液应该是澄清的,可以无色,可以有色,如果

蛋白浓度测定的方法具体有哪些

蛋白浓度测定的方法:1. 紫外分光光度法紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法,不需要任何试剂,操作简单且易回收。蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收,这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的,所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取过程中杂有的核

免疫球蛋白M的浓度变化

  使血清IgM浓度增高的药物有:L-门冬酰胺与氯丙嗪可诱导IgM的合成致使血清中浓度升高;溶菌制剂是一种生物调节剂,为非特异性免疫增强剂,它能提高淋巴母细胞转化率并增强迟发型免疫反应,可使血清IgM和IgG浓度升高;长期使用甲基多巴、磺胺类药、呋嘲妥因、丙硫氧嘧啶、阿霉素、异烟肼等药物导致肝损害引

蛋白浓度测定的方法具体有哪些

蛋白浓度测定的方法:1. 紫外分光光度法紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法,不需要任何试剂,操作简单且易回收。蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收,这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的,所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取过程中杂有的核

蛋白浓度测定的方法具体有哪些

蛋白浓度测定的方法:1. 紫外分光光度法紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法,不需要任何试剂,操作简单且易回收。蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收,这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的,所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取过程中杂有的核

蛋白纯化后浓度太低怎么办

提高SDS-PAGE的上样量 将蛋白样品超滤浓缩几倍提高浓度 WB压片时间稍微延长一点

为什么提取细胞蛋白浓度总是很低

细胞总蛋白提取量少原因很多比如可能是该细胞状态不好,造成表达量偏低,提取后蛋白总量就会少蛋白与蛋白间性质差异大,因为所需的细胞提取液不一样,会造成一些蛋白不能溶解于提取液中而和细胞碎片一起沉淀掉不同的提取方法不一样,可能造成部分蛋白沉淀,影响到提取总量蛋白质溶液应该是澄清的,可以无色,可以有色,如果

为什么提取细胞蛋白浓度总是很低

细胞总蛋白提取量少原因很多比如可能是该细胞状态不好,造成表达量偏低,提取后蛋白总量就会少蛋白与蛋白间性质差异大,因为所需的细胞提取液不一样,会造成一些蛋白不能溶解于提取液中而和细胞碎片一起沉淀掉不同的提取方法不一样,可能造成部分蛋白沉淀,影响到提取总量蛋白质溶液应该是澄清的,可以无色,可以有色,如果