怎么bca法测蛋白浓度标准曲线都不一样
标准曲线就是每次不一样,因为每一次的反应条件,枪的准确度都不一样。所以才要求每次进行测定的时候,需要同时进行标准曲线的测定,这样每次蛋白样品的浓度只能根据平行的标准曲线给出来的公式去计算。基本上只要能保证R2值大于98%,标准曲线就能用于计算蛋白的含量。......阅读全文
为什么提取细胞蛋白浓度总是很低
细胞总蛋白提取量少原因很多比如可能是该细胞状态不好,造成表达量偏低,提取后蛋白总量就会少蛋白与蛋白间性质差异大,因为所需的细胞提取液不一样,会造成一些蛋白不能溶解于提取液中而和细胞碎片一起沉淀掉不同的提取方法不一样,可能造成部分蛋白沉淀,影响到提取总量蛋白质溶液应该是澄清的,可以无色,可以有色,如果
血红蛋白浓度(HGB)的简介
血红蛋白浓度(HGB)指单位提及(L)血液内所含的血红蛋白的量。血红蛋白又称血色素,是红细胞的主要组成部分,能与氧结合,运输氧和二氧化碳。 正常值 男性:120-160g/L(12.0-16.0g/dl); 女性:110-150g/L(11.0-15.0g/dl); 新生儿:170-20
bca法最高能测的蛋白浓度
(1) BCA试剂的配制① 试剂A,1L:分别称取10g BCA (1%),20g Na2CO3·H2O(2%),1.6g Na2C4H4O6·2H2O(0.16%),4g NaOH (0.4%) ,9.5g NaHCO3(0.95%) ,加水至1L,用NaOH或固体NaHCO3调节pH值至11.2
常用蛋白质浓度测定方法汇总
蛋白质是细胞中最重要的含氮生物大分子之一,承担着各种生物功能。蛋白质的定量分析是蛋白质构造分析的基础。目前常用的蛋白测量的方法主要有BCA法、考马斯亮蓝法(Bradford)和Lowry法等。BCA法 原理在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+(biuret reaction)
蛋白浓度测定的方法具体有哪些
蛋白浓度测定的方法:1. 紫外分光光度法紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法,不需要任何试剂,操作简单且易回收。蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收,这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的,所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取过程中杂有的核
免疫球蛋白M的浓度变化
使血清IgM浓度增高的药物有:L-门冬酰胺与氯丙嗪可诱导IgM的合成致使血清中浓度升高;溶菌制剂是一种生物调节剂,为非特异性免疫增强剂,它能提高淋巴母细胞转化率并增强迟发型免疫反应,可使血清IgM和IgG浓度升高;长期使用甲基多巴、磺胺类药、呋嘲妥因、丙硫氧嘧啶、阿霉素、异烟肼等药物导致肝损害引
蛋白浓度测定的方法具体有哪些
蛋白浓度测定的方法:1. 紫外分光光度法紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法,不需要任何试剂,操作简单且易回收。蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收,这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的,所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取过程中杂有的核
BCA蛋白浓度测定试剂盒说明
BCA蛋白浓度测定试剂盒BCA Protein Assay Kit ● 试剂盒内容及保存: 产品名称 包装 贮存方式 BCA试剂A 100 ml RT BCA试剂B 3 ml RT
几种蛋白质浓度测定方法
一、Bradford法蛋白质与考马斯亮兰染料结合生成蓝色物质,蓝色物质的量与蛋白质浓度的高低成正比。生成的蓝色物质在595nm处有最大光吸收,通过测定595nm的光吸收,来测定蛋白质浓度。实验中一般利用牛血清白蛋白(BSA)来作标准曲线,此法的灵敏度为25~200ug/ml。甘油、吐温(tween)
BCA法测定蛋白质浓度原理
BCA法测定蛋白质浓度原理:BCA与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂混合一起即成为苹果绿,即 BCA 工作试剂。在碱性条件下,BCA 与蛋白质结合时,蛋白质将 Cu2+ 还原为 Cu+,工作试剂由原来的苹果绿色变为紫色复合物。562 nm 下其光吸收强度与蛋白质浓度成正比。BCA 蛋白浓度测定
bca法测蛋白浓度会有哪些误差
BCA法是衡量蛋白质浓度的一种方法,但是在实际操作中可能会产生多种误差。1. 操作误差:不正确的试剂使用、不正确的搅拌、沉淀残留以及操作的时间和温度等因素都可能影响测量结果的准确性。2. 反应性差异:不同的蛋白质对BCA试剂的反应性可能存在差异,这可能会导致一些蛋白质表现出较低的吸收值,从而导致偏差
蛋白浓度测定的方法具体有哪些
蛋白浓度测定的方法:1. 紫外分光光度法紫外光谱吸收法测定蛋白质含量是讲蛋白质溶液直接在紫外分光光度计中测定的方法,不需要任何试剂,操作简单且易回收。蛋白质溶液在280nm附近有强烈的吸收,这是由于蛋白质中酪氨酸、色氨酸残基而引起的,所以光密度受这两种氨基酸含量的支配。另外核蛋白或提取过程中杂有的核
蛋白质浓度测定的注意事项
检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后,应禁食。 检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。测定中,蛋白-染料复合物会有少部分吸附于比色杯壁上,实验证明此复合物的吸附量是可以忽略的。
BCA法测定蛋白浓度结果偏大原因
bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。
BCA法测定蛋白浓度结果偏大原因
bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。
蛋白浓度多少做westernblot比较合适
Western-blot是一种半定量的检测手段。 个人认为如果要通过灰度值来计算蛋白浓度,那就是和内参来做对比,因为内参的浓度是已知且单一条带的蛋白样品。通过待测样品盒内参样品灰度值做对比可以算出待测样品大概的浓度。
Lowry-检测法测定蛋白质浓度实验
实验方法原理Lowry 法又称为 Folin-酚试剂法。首先在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物,然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂 (Folin-酚上级),产生钼蓝和钨蓝复合物的深蓝色,这种深蓝色 的复合物在745~750 nm 处有最大的吸收峰,颜色的深浅(吸收值)与蛋白质浓度成正比,可根据 750
BCA法测定蛋白浓度结果偏大原因
bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。
BCA法测定蛋白浓度结果偏大原因
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蛋白质浓度分析实验——BRADFORD分析(BIORAD)
实验材料标准蛋白质试剂、试剂盒BSA仪器、耗材干燥试管实验步骤一、标准 Bradford 分析1. 准备 3 份标准品(用水稀释),BSA 浓度为 0.2~0.9 mg/ml,IgG 浓度为 0.2~1.5 mg/ml。一般设定 4 个或 5 个浓度比较合适。如果样品中蛋白质浓度可能超过分析范围,那
蛋白质浓度测定(双缩脲法)
实验概要1.掌握本实验方法的原理和操作2.掌握标准工作(A—C)曲线的制作3.熟悉蛋白质定量测定的几种常用方法实验原理测定蛋白质的定量方法有很多,目前常用的有凯氏定氮法;比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法;紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法:在碱性溶液中,双缩脲(H2N
BCA法测定蛋白浓度结果偏大原因
bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。
转基因作物叶片蛋白浓度测定有“妙招”
随着转基因技术的快速发展,很多转基因产品也迅速进入到人类的生活中。为了维护消费者的食品安全,很多国家都会要求进行转基因作物叶片蛋白浓度测定。目前最常用的方法还属试剂盒法,它能快速提取植物叶片中的转基因成分,整个测定过程只需十分钟左右即可完成,在很多检测机构都非常实用。 很多人可能会觉得
蛋白质浓度测定(双缩脲法)
实验原理测定蛋白质的定量方法有很多,目前常用的有凯氏定氮法;比色法主要包括双缩脲法、Folin-酚试剂法及 染料结合法;紫外分光光度法等双缩脲(Biuret)法:在碱性溶液中,双缩脲(H2N—CO—NH—CO—NH2)与二价铜离子作用形成紫红色的络合物,这一反应称双缩脲反应。凡分子中含二个或二个以上
Lowry-检测法测定蛋白质浓度实验
实验方法原理 Lowry 法又称为 Folin-酚试剂法。首先在碱性溶液中形成铜-蛋白复合物,然后这一复合物还原磷钼酸-磷钨酸试剂 (Folin-酚上级),产生钼蓝和钨蓝复合物的深蓝色,这种深蓝色 的复合物在745~750 nm 处有最大的吸收峰,颜色的深浅(吸收值)与蛋白质浓度成正比,可根
BCA法测定蛋白浓度结果偏大原因
bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。
BCA法测定蛋白浓度结果偏大原因
bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。
BCA法测定蛋白浓度结果偏大原因
bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。
BCA法测定蛋白浓度结果偏大原因
bca法测蛋白浓度超过量程肯定不准确的超过量程一般就是是超过了标准曲线的最高点。双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,硫铵不干扰显色, Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成紫蓝色络合物,此物在540nm波长处有最大吸收。双缩脲法常用于0.5g/L~10g/L含量的蛋白质溶液测定。
平均红细胞血红蛋白浓度简介
平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)是指每升血液中平均所含血红蛋白浓度,以g/L表示,计算公式为:MCHC=每升血液中血红蛋白量/每升血液中血细胞比容=Hgb(g/L)/HCT(L/L)。平均红细胞血红蛋白浓度适用于各种贫血病的诊断和治疗。平均红细胞血红蛋白浓度降低主要见于小细胞低色素性贫血。