pcr跑胶结果出现拖尾、弥散说明什么

可能是产物降解,也可能引物、模版的量上的比较大。适当减少循环,调整引物、模版的量......阅读全文

pcr产物酶切后电泳不出条带

如果是空的什么也没有,可以考虑:1、PCR产物有问题;2、电泳跑反了或者跑久了,DNA跑出了胶;3、制胶的问题,如忘加EB等,或加EB等时胶温度过高。其中PCR产物问题可以考虑原因:引物是否正确、程序设置的退火温度是否过高、样本提取等原因。

如何知道PCR产物的大小

如果你的模板序列已知的话,直接将引物序列和模板进行匹配,两条引物之间的DNA片段长度即为目的PCR产物的大小;如果你是想知道PCR仪反应后的产物大小,可以跑琼脂糖凝聚电泳,照胶仪下根据Marker的指示条带读取产物的大小,或者可以用照胶仪自带的软件直接读出所有pcr产物条带的大小

若pcr产物电泳后不能及时回收,胶应怎样处理

把目的条带的位置的胶挖下来,放在一个离心管里,置于4度冰箱,可过夜,第二天再来回收

为什么SDSPAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳中样品跑不进胶

溴酚蓝指示剂跑进去没有,有没有在合适的位置?染料配制的有无问题,最好找别的胶试一试。另外脱色液也很重要,加热(55度)脱色。可以同时上一个预染Marker看一看。

旋振筛出现跑浆跑料现象该怎么办

  不锈钢旋振筛是很比较常见的震动筛,同样是很多生产厂家需要采用的震动设备,因而其应用相对比较普遍,可是不锈钢旋振筛在采用流程时会导致跑料或是跑浆的状况,实际上导致这种情况,大致是因为泥浆黏度高、钻屑分散等要素,震动筛自己震动力度不大、不锈钢筛网面积小、目数高就会致使这类问题的导致。那么该怎么解决这

电泳图怎么看

PCR跑胶只能估计产物的大小,所以你这四个图都是看:有无产物产物大小。在已知目标序列,引物的情况小,可以计算出产物的大小,如果计算和PCR产物大小吻合,而且结果的条带也很清楚,这个条带就是特异性产物。这4个图,每个胶的孔都加了不同的样本,所以根据条带,可以说明原来不同样本是否有目标序列可以被检出。

电泳图怎么看

PCR跑胶只能估计产物的大小,所以你这四个图都是看:有无产物产物大小。在已知目标序列,引物的情况小,可以计算出产物的大小,如果计算和PCR产物大小吻合,而且结果的条带也很清楚,这个条带就是特异性产物。这4个图,每个胶的孔都加了不同的样本,所以根据条带,可以说明原来不同样本是否有目标序列可以被检出。

简介冷胶喷胶机的供胶装置

  组成部份说明:胶桶、泵  胶桶的容量为30L,桶盖用于安装活塞泵活塞泵 4:1活塞泵用于泵起和供应胶水,配有不锈钢胶管和过滤器过滤器 不锈钢过滤器具有过滤胶水和消除泵的震动双重功能调压器 4:1不锈钢调压器能自动控制胶量 I/P自动压力追踪阀 根据糊盒机的速度自动调节胶水的压力与流量技术参数泵的

凝胶电泳常见问题分析

要跑琼脂糖凝胶电泳, 5ng 就能很清楚的跑出来是这样吗?能够照相的清楚的条带,至少需要多少量呢?参考见解:5ng 已经可以了,但是或许20ng50ng-200ng效果好,在此范围内呈线性。把210bp的pcr产物进行酶切,得到190+20bp的两个片段,请问能用琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果吗?用多大

凝胶电泳常见问题分析

1、要跑琼脂糖凝胶电泳,5ng就能很清楚的跑出来,是这样吗?能够照相的清楚的条带,至少需要多少量呢? 参考见解 : 5ng已经可以了,但是或许20ng~200ng效果好,在此范围内呈线性。 2、把210bp的PCR产物进行酶切,

凝胶电泳(gel-electrophoresis)常见问题分析

琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么原因造成的?参考见解: DNA带模糊:1、 DNA降解??避免核酸酶污染。2、 DNA上样量过多??减少凝胶中DNA上样量。3、 所用电泳条件不合适??电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应<15℃,核查所用电泳缓

生物实验室实战经验分享(一)

  平时在实验室最常听到的一句话就是“今天某某试验没做好是为什么?今天某某试验没出结果是什么原因?今天某某试验为什么会是这样的呢?” 等等。然后仔细一查找原因,往往是由于操作上面的不认真,或是一些小小的细节没有注意到。以下是集各路朋网友的一些实战经验,在此与大家分享。   1. 跑pa

普通PCR、实时荧光定量PCR和数字PCR对比分析(二)

模板 DNA 量越多,荧光达到域值的循环数越少,即 Ct 值越小。Log 起始模板浓度与 Ct 呈线性关系,通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,根据样品 Ct 值,就可以计算出样品中所含的模板量。目前常用荧光标记方法 方法 优点

蛋白胶如何干胶保存

最好有个干胶仪的,直接按照仪器要求做就可以了。如果你要让胶自然干,需要很长时间,而且胶容易变形破裂。

自动滴胶匀胶机

自动滴胶匀胶机/真空旋转涂层机  型号:MHY-29071MHY-29071产品简介:主要用于液体,胶体在材料表面薄膜的形成,适用于硅片,晶片,玻璃,陶瓷等制版表面涂覆工艺。可在科研,教育,生产中应用。 MHY-29071主要特点:1可设定存储26个不同样片的旋转涂敷工艺过程。2每个涂敷工艺过程可以

细胞系的-DNA-STR-谱_利用ABI377DNA测序仪进行凝胶电泳

试剂、试剂盒TEMEDSGM Plus®凝胶上样混合液仪器、耗材ABI377 DNA 测序仪制胶材料凝胶装置材料冰或者电制冷板热循环仪凝胶板和凝胶盒缓冲液梢热传导板实验步骤1. 在烧杯中混合以下各成分,制备 4 % 聚丙烯酰胺凝胶(制胶材料:量筒、天平、过滤器(如 Sartolab 150 ml 滤

荧光pcr探针室温放置会降解吗

实时定量PCR是通过产物发出荧光,根据荧光强度来定量的.激发荧光的方式有荧光染料法和探针法.荧光探针比荧光染料更具特异性,可检测特定序列的扩增产物的量.荧光染料可以检测PCR中获得的全部双链DNA,但不能区分不同的双链DNA.可以说荧光PCR包括探针法和染料法不建议这么做,pcr产物的话大部分的都会

pcr产物没有纯化能够直接进行双酶切吗

PCR产物经PCR纯化试剂盒纯化后,可以做EcoRI和BamHI的双酶切。酶切、纯化都可以用PCR纯化试剂盒完成,只有一种情况例外,PCR模板为质粒,且这个质粒和要用的载体有相同的抗性。此时需要跑一次胶来丢掉模板质粒,否则在连接产物转化的平板上长出的菌落许多是模板质粒,而不是你所构建的质粒。PCR产

生物实验室那些事-都是精华!

  1. 跑page胶的时候  小电压跑会避免高电压产生的热量尔导致的胶层变形。低电压泳道会比大电压泳道跑的直一些,且分离效果更高,有利于分子量相差不大的蛋白分离。  2. 提取质粒的时候  最后一步的酒精挥发很关键,基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间,最好是空调吹热

qpcr荧光染料降解会让阴性对照出现扩增吗

qpcr荧光染料降解会让阴性对照出现扩增实时定量PCR是通过产物发出荧光,根据荧光强度来定量的.激发荧光的方式有荧光染料法和探针法.荧光探针比荧光染料更具特异性,可检测特定序列的扩增产物的量.荧光染料可以检测PCR中获得的全部双链DNA,但不能区分不同的双链DNA.可以说荧光PCR包括探针法和染料法

旋振筛会出现跑浆跑料情况分析及解决方法

  振动筛使用过程中出现跑浆现象怎么处理?出现这种现象,主要与钻井液中固相含量高、泥浆粘度高、钻屑分散等被筛分物料的因素有关;与振动筛的振动力小、筛网目数高、筛网面积小的自身条件有关;与现场安装时振动筛的进液口方向和位置也有很大关系,可以以下从几点逐步进行分析。  第一点,选用的筛网目数不合理。每个

聚丙烯酰胺凝胶电泳为什么跑出双条带

先要问问,你是跑蛋白还是DNA啊,如果是DNA,可能是PCR扩增出非特异的条带了,也就是我们所说的杂带,因为丙烯酰胺的分辨率很高,有时这些杂带在琼脂糖胶中不会被发现,但是到了丙烯酰胺胶中就会很明显了,因为如果在足够高的浓度下,单个碱基的差异都可以被区分。

聚丙烯酰胺凝胶电泳为什么跑出双条带

先要问问,你是跑蛋白还是DNA啊,如果是DNA,可能是PCR扩增出非特异的条带了,也就是我们所说的杂带,因为丙烯酰胺的分辨率很高,有时这些杂带在琼脂糖胶中不会被发现,但是到了丙烯酰胺胶中就会很明显了,因为如果在足够高的浓度下,单个碱基的差异都可以被区分。

梯度PCR仪常见问题及现场解决方案

 梯度PCR仪常见问题及现场解决方案如下:    1、梯度PCR仪在产物序列中引入了错误,这大多是由于聚合酶忠实性低或者循环数太多,这时需要使用带有校正活性的热稳定聚合酶,同时降低循环数。此外,四种dNTP的浓度不同也会出现该问题,此时应制备新的浓度相同的dNTP混合物。    2、PCR跑胶,目的

梯度PCR仪常见问题及现场解决方案

  梯度PCR仪常见问题及现场解决方案如下:    1、梯度PCR仪在产物序列中引入了错误,这大多是由于聚合酶忠实性低或者循环数太多,这时需要使用带有校正活性的热稳定聚合酶,同时降低循环数。此外,四种dNTP的浓度不同也会出现该问题,此时应制备新的浓度相同的dNTP混合物。    2、PCR跑胶,目

梯度PCR仪常见问题及现场解决方案

 梯度PCR仪常见问题及现场解决方案如下:    1、梯度PCR仪在产物序列中引入了错误,这大多是由于聚合酶忠实性低或者循环数太多,这时需要使用带有校正活性的热稳定聚合酶,同时降低循环数。此外,四种dNTP的浓度不同也会出现该问题,此时应制备新的浓度相同的dNTP混合物。    2、PCR跑胶,目的

梯度PCR仪常见问题及现场解决方案

梯度PCR仪常见问题及现场解决方案如下:    1、梯度PCR仪在产物序列中引入了错误,这大多是由于聚合酶忠实性低或者循环数太多,这时需要使用带有校正活性的热稳定聚合酶,同时降低循环数。此外,四种dNTP的浓度不同也会出现该问题,此时应制备新的浓度相同的dNTP混合物。    2、PCR跑胶,目的条

PCR产物进行凝胶电泳电压、时间各是多少好

先说溴酚蓝,先搞搞清楚,你加的溴酚蓝,还是含有溴酚蓝的loading buffer??loading buffer在管子上有写明用量,比如5X的loading buffer就是5μl上样量中占1μl,也就是1μl loading buffer+4μl待测PCR产物混合上样。电压80-150V都可以用

凝胶电泳常见问题分析

要跑琼脂糖凝胶电泳, 5ng 就能很清楚的跑出来是这样吗?能够照相的清楚的条带,至少需要多少量呢? 参考见解:5ng 已经可以了,但是或许20ng50ng-200ng效果好,在此范围内呈线性。 把210bp的pcr产物进行酶切,得到190+20bp的两个片段,请问能用琼脂糖凝

基本方案2-确定甲基化特异性-PCR-产物中-CpG-位点的甲基化

实验材料甲基化特异性PCR (MSP) 产物试剂、试剂盒适合的限制性内切核酸酶和缓冲液牛血清白蛋白糖苷配糖基1 X 甲酰胺上样缓冲液乙醇实验步骤1.在 1.5 ml 管中加入 10ul MSP 产物。加入 15ul 10 X 限制性内切核酸酶和缓冲液,需要的话加 BSA,加水至 150ul。加入 1